The carbonic anhydrases (CAs) in th

The carbonic anhydrases (CAs) in the α class are zinc-dependent metalloenzymes. Previous studies have reported that recombinant forms of carbonic anhydrase IX (CAIX), a membrane-bound form of CA expressed in solid tumors, appear to be activated by low levels of zinc independent of its well-studied role at the catalytic site. In this study, we sought to determine if CAIX is stimulated by zinc in its native environment. MDA-MB-231 breast cancer cells express CAIX in response to hypoxia. We compared CAIX activity associated with membrane ghosts isolated from hypoxic cells with that in intact hypoxic cells. We measured CA activity directly using (18)O exchange from (13)CO(2) into water determined by membrane inlet mass spectrometry. In membrane ghosts, there was little effect of zinc at low concentrations on CAIX activity, although at high concentration zinc was inhibitory. In intact cells, zinc had no significant effect on CAIX activity. This suggests that there is an appreciable decrease in sensitivity to zinc when CAIX is in its natural membrane milieu compared to the purified forms.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Anhydrases carbonic (CAs) ในชั้นเรียนด้วยกองทัพจะขึ้นอยู่กับสังกะสี metalloenzymes การศึกษาก่อนหน้านี้มีรายงานที่ ปรากฏแบบ recombinant carbonic anhydrase IX (CAIX), แบบผูกกับเมมเบรนของ CA ที่แสดงในเนื้องอกที่แข็ง สามารถใช้งาน โดยระดับต่ำของสังกะสีขึ้นอยู่กับบทบาทของ studied ดีไซต์ตัวเร่งปฏิกิริยา ในการศึกษานี้ เราพยายามที่จะกำหนดว่าถ้า CAIX จะถูกกระตุ้น โดยสังกะสีในสภาพแวดล้อมของท้องถิ่น เซลล์มะเร็งเต้านม MDA-MB-231 เอ็กซ์เพรส CAIX ตอบ hypoxia เราเปรียบเทียบกิจกรรม CAIX ที่เกี่ยวข้องกับผีเมมเบรนที่แยกต่างหากจากเซลล์แปรที่แปรเซลล์เหมือนเดิม เราวัดกิจกรรม CA โดยตรงโดยใช้การแลกเปลี่ยน O (18) จาก (13)CO(2) ลงไปในน้ำตามทางเข้าของเมมเบรนรเมท ในเมมเบรนผี มีผลเพียงเล็กน้อยของสังกะสีที่ความเข้มข้นต่ำสุดที่กิจกรรม CAIX แม้ในความเข้มข้นสูง สังกะสีคือลิปกลอสไข ในเซลล์เหมือนเดิม สังกะสีก็ไม่มีผลสำคัญต่อกิจกรรม CAIX แนะนำว่า มีการลดลงความไวให้สังกะสีเมื่อ CAIX อยู่ในฤทธิ์ของเยื่อธรรมชาติเปรียบเทียบกับรูปแบบที่บริสุทธิ์เห็น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

anhydrases คาร์บอ (CAs) αในชั้นเรียนที่มีสังกะสีเมทัลโลขึ้นอยู่กับ ศึกษาก่อนหน้านี้มีรายงานว่ารูปแบบของ recombinant anhydrase คาร์บอทรงเครื่อง (CAIX) ซึ่งเป็นรูปแบบที่ถูกผูกไว้เมมเบรนของ CA แสดงในเนื้องอกที่เป็นของแข็ง, ดูเหมือนจะเปิดใช้งานโดยระดับต่ำของสังกะสีเป็นอิสระจากบทบาทที่ดีการศึกษาของ บริษัท ที่เว็บไซต์ของตัวเร่งปฏิกิริยา ในการศึกษาครั้งนี้เราพยายามที่จะตรวจสอบว่า CAIX ถูกกระตุ้นโดยสังกะสีในสภาพแวดล้อมของพื้นเมือง MDA-MB-231 เซลล์มะเร็งเต้านมแสดง CAIX ในการตอบสนองต่อการขาดออกซิเจน เราเมื่อเทียบกับกิจกรรม CAIX ที่เกี่ยวข้องกับผีเมมเบรนที่แยกได้จากเซลล์ hypoxic ด้วยที่ในเซลล์ hypoxic เหมือนเดิม เราวัดกิจกรรมโดยตรงโดยใช้ CA (18) การแลกเปลี่ยน O จาก (13) CO (2) ลงไปในน้ำที่กำหนดโดยเยื่อหุ้มขาเข้ามวลสาร ผีในเมมเบรนมีผลเพียงเล็กน้อยของสังกะสีที่ความเข้มข้นต่ำในกิจกรรม CAIX แม้ในความเข้มข้นสูงสังกะสีเป็นยับยั้ง ในเซลล์เหมือนเดิมสังกะสีไม่มีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญเกี่ยวกับกิจกรรม CAIX นี้แสดงให้เห็นว่ามีการลดลงเห็นได้ในความไวสังกะสี CAIX เมื่ออยู่ในสภาพแวดล้อมที่เมมเบรนของธรรมชาติเมื่อเทียบกับรูปแบบที่บริสุทธิ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การ anhydrases carbonic ( CAS ) ในการเรียนจะขึ้นอยู่กับαสังกะสี metalloenzymes . การศึกษาก่อนหน้านี้ได้รายงานว่ารูปแบบโปรตีนของฉะนี้แล 9 ( caix ) , มีรูปแบบของ CA แสดงออกในเนื้องอกของแข็ง ปรากฏว่าสามารถใช้งานโดยอิสระของระดับต่ำของสังกะสีอย่างดีศึกษาบทบาทที่เว็บไซต์เร่งปฏิกิริยา ในการศึกษานี้เราพยายามที่จะตรวจสอบว่า caix ถูกกระตุ้นโดยซิงก์ในสภาพแวดล้อมพื้นเมืองของ mda-mb-231 เซลล์มะเร็งเต้านม caix ด่วนในการตอบสนองต่อสังคม เราเทียบ caix กิจกรรมที่เกี่ยวข้องกับแผ่นผีที่แยกจากโกรธเกรี้ยวที่ยังคงโกรธเกรี้ยว . เราสามารถใช้วัดกิจกรรมโดยตรง ( 18 ) O ตราจาก ( 13 ) Co ( 2 ) ลงในน้ำที่กำหนดโดยเมมเบรนปากน้ำแมสสเปกโทรเมตรีในแผ่นผี มีปฏิกิริยาเล็กน้อยของสังกะสีที่ความเข้มข้นต่ำในกิจกรรม caix ถึงแม้สังกะสีความเข้มข้นสูงคือว่า . ของเซลล์ สังกะสีไม่มีผลต่อกิจกรรม caix . นี้แสดงให้เห็นว่ามีการลดลงในความชดช้อย สังกะสี เมื่อ caix อยู่ในเยื่อธรรมชาติ สภาพแวดล้อม เมื่อเทียบกับแยกรูปแบบ