The method for the extraction of an

The method for the extraction of antioxidant enzymes in the
microbial cells was described by Azcón et al. (2010). Bacterial cells
were homogenized in a cold mortar with 4 mL 50 mM phosphate
buffer (pH 7.8) containing 1 mM EDTA, 8 mM MgCl2, 5 mM
dithiothreitol (DTT), and 1% (w/v) polyvinylpolypyrrolidone
(PVPP). The homogenate was centrifuged at 6000 rpm for 15 min
at 4
C, and the supernatant was used for enzyme activity
determination. Catalase (CAT) activity was measured as described
by Aebi (1984), conducted in 2 mL reaction volume containing
50 mM potassium phosphate buffer (pH 7.0), 10 mM H2O2 and
50mL of enzyme extract. It was determined the consumption of
H2O2 and followed by decrease in absorbance at 240 nm for 1 min(extinction coefficient (e240) of 39.6 mM1 cm1
). Ascorbate
peroxidase (APX) activity was measured in a 1 mL reaction volume
containing 50 mM potassium phosphate buffer (pH 7.0), 0.1 mM
hydrogen peroxide and 0.5 mM sodium ascorbate. The H2O2 was
added to start the reaction, and the decrease in absorbance at
290 nm was recorded for 1 min to determine the oxidation rate for
ascorbate (Amako et al., 1994). Total soluble protein amount was
determined using Bradford method (1976), and bovine serum
albumin as standard.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิธีการสกัดเอนไซม์สารต้านอนุมูลอิสระในการเซลล์จุลินทรีย์ถูกอธิบายไว้โดย Azcón et al. (2010) เซลล์แบคทีเรียถูก homogenized ในครกเย็น 4 มิลลิลิตรฟอสเฟต 50 มม.บัฟเฟอร์ (pH 7.8) ที่มี 1 mM EDTA, 5 มิลลิเมตร 8 มิลลิเมตร MgCl2dithiothreitol (DTT), และ polyvinylpolypyrrolidone 1% (w/v)(PVPP) Homogenate การแก้ไขผลิตภัณฑ์ที่ 6000 รอบต่อนาที 15 นาทีที่ 4 C และ supernatant ที่ใช้สำหรับเอนไซม์ความมุ่งมั่น กิจกรรมคา (CAT) โดยวัดตามที่อธิบายไว้โดย Aebi (1984), ดำเนินการในปริมาตร 2 มล.ปฏิกิริยาที่ประกอบด้วย50 มม.โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.0), 10 มม. H2O2 และ50mL สารสกัดเอนไซม์ ได้กำหนดปริมาณการใช้H2O2 และตาม ด้วยการลดลงของค่าที่ 240 nm 1 นาที (สูญพันธุ์ค่าสัมประสิทธิ์ (e240) ของ mM1 39.6 cm1). Ascorbateกิจกรรมฮอส (APX) โดยวัดปริมาณเป็นปฏิกิริยา 1 มล.ประกอบด้วย 50 มม.โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.0), 0.1 mMascorbate โซเดียมไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์และ 0.5 mM เป็น H2O2เพิ่มการเริ่มปฏิกิริยา และลดลงในค่าที่290 nm บันทึก 1 นาทีเพื่อตรวจสอบอัตราการเกิดออกซิเดชันascorbate (Amako et al. 1994) จำนวนโปรตีนที่ละลายได้ทั้งหมดคือใช้ซีรั่มวิธี (1976), และวัวแบรดฟอร์ดalbumin เป็นมาตรฐาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธีการสกัดเอนไซม์สารต้านอนุมูลอิสระในที่
เซลล์จุลินทรีย์ถูกอธิบายโดยAzcón et al, (2010) เซลล์แบคทีเรีย
ถูกปั่นในครกเย็นที่มี 4 มิลลิลิตรขนาด 50 มมฟอสเฟต
บัฟเฟอร์ (pH 7.8) ที่มี 1 มิลลิ EDTA, 8 มิลลิ MgCl2 5 มิลลิ
dithiothreitol (DTT) และ 1% (w / v) polyvinylpolypyrrolidone
(PVPP) homogenate ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 6000 รอบต่อนาทีนาน 15 นาที
ที่ 4 องศาเซลเซียสและสารละลายที่ใช้สำหรับการทำงานของเอนไซม์
ความมุ่งมั่น catalase (CAT) กิจกรรมวัดตามที่อธิบายไว้
โดย Aebi (1984) ดำเนินการใน 2 มิลลิลิตรปริมาณปฏิกิริยาที่มี
ขนาด 50 มมบัฟเฟอร์โพแทสเซียมฟอสเฟต (pH 7.0), 10 มิลลิ H2O2 และ
50mL ของสารสกัดจากเอนไซม์ มันถูกกำหนดบริโภคของ
H2O2 และตามการลดลงของการดูดกลืนแสงที่ 240 นาโนเมตรเป็นเวลา 1 นาที (ค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสีย (E240) 39.6 MM1 CM1
) ascorbate
peroxidase (APX) กิจกรรมวัดใน 1 มิลลิลิตรปริมาณปฏิกิริยา
ที่มีขนาด 50 มมบัฟเฟอร์โพแทสเซียมฟอสเฟต (pH 7.0) 0.1 มิลลิ
ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์และ 0.5 มิลลิโซเดียม ascorbate H2O2 ถูก
เพิ่มเพื่อเริ่มต้นปฏิกิริยาและลดลงในการดูดกลืนแสงที่
290 นาโนเมตรได้รับการบันทึกเป็นเวลา 1 นาทีเพื่อตรวจสอบอัตราการเกิดออกซิเดชันสำหรับ
ascorbate (Amako et al., 1994) รวมปริมาณโปรตีนที่ละลายน้ำได้รับ
การพิจารณาโดยใช้วิธีแบรดฟอ (1976) และซีรั่มวัว
อัลบูมิเป็นมาตรฐาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีการสำหรับการสกัดสารต้านอนุมูลอิสระเอนไซม์ในจุลินทรีย์เซลล์ถูกอธิบายโดย AZC เลออง et al . ( 2010 ) เซลล์แบคทีเรียอยู่ในครกบดเย็นกับ 50 mm ฟอสเฟต 4 มล.บัฟเฟอร์ pH 7.8 ) ประกอบด้วย 1 mM EDTA , 8 มม. ชุด , 5 มม.บัตรแข็ง ( DTT ) และ 1% ( w / v ) polyvinylpolypyrrolidone( pvpp ) โดยแยกเป็นระดับที่ 6 , 000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส และนำมาใช้สำหรับกิจกรรมเอนไซม์ความมุ่งมั่น คะตะเลส ( แมว ) กิจกรรมวัดตามที่อธิบายไว้โดย aebi ( 1984 ) , ดำเนินการใน 2 มิลลิลิตร ปริมาณที่มีปฏิกิริยา50 มิลลิโมลาร์โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 ) , 10 มม. และแบตเตอรี่50ml ของเอนไซม์สกัดเข้มข้น มันถูกกําหนดการบริโภคแบตเตอรี่ และตามด้วย ลดการดูดกลืนแสงที่ 240 nm สำหรับ 1 นาที ( ค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์ ( เบ็นซ์ อี 240 ) 65 mm1 CM1) แอสคอร์เบทเปอร์ออกซิเดส ( APX ) กิจกรรมวัดในปริมาตร 1 มิลลิลิตรปฏิกิริยาประกอบด้วย 50 mm โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 ) , 0.1 มม.ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์และ ascorbate โซเดียม 0.5 มิลลิเมตร มี H2O2 คือเพิ่มเริ่มปฏิกิริยาและการลดลงของค่าการดูดกลืนแสงที่290 nm เป็นบันทึก 1 นาทีเพื่อตรวจสอบอัตราการออกซิเดชันการเปลี่ยนแปลง ( amako et al . , 1994 ) ปริมาณโปรตีนที่ละลายน้ำทั้งหมดหาได้โดยใช้วิธี Bradford ( 1976 ) , และในซีรั่มวัวอัลบูมิน เป็นมาตรฐาน