METHODS:A recombinant expression ve

METHODS:
A recombinant expression vector pPIC9K-Csa2 was constructed and transformed into Pichia pastoris GS115. A large-scale expression of recombinant Csa2 protein (rCsa2) was optimized using methanol, and the protein was purified in P. pastoris expression system. New Zealand Rabbits and guinea pigs were respectively immunized with the purified rCsa2 to prepare polyclonal antisera. The double antibody sandwich ELISA was established by choosing the optimal dilution of coating antisera and detecting antisera. Different concentrations of rCsa2 and culture supernatants of C. albicans collected at different time points were used to evaluate the sensitivity of detection. The specificity of the sandwich ELISA was evaluated by detecting culture supernatants of other three Candida spp, five Aspergillus spp, Cryptococcus neoformans and Penicillium marneffei.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิธีการ:เป็นนิพจน์ recombinant เวกเตอร์ pPIC9K-Csa2 สร้าง และแก่น Pichia pastoris GS115 ค่าขนาดใหญ่ของ recombinant โปรตีน Csa2 (rCsa2) ถูกทำให้เหมาะโดยใช้เมทานอล และโปรตีนที่บริสุทธิ์ในระบบนิพจน์ P. pastoris ลำดับนิวซีแลนด์กระต่ายและหนูตะเภาที่ immunized กับ rCsa2 บริสุทธิ์เพื่อจัดเตรียม polyclonal antisera ก่อตั้งขึ้น โดยเลือกเจือจางเหมาะสมของ antisera เคลือบ และตรวจ antisera แอนติบอดีคู่แซนวิ ELISA ความเข้มข้นแตกต่างกันของ supernatants rCsa2 และวัฒนธรรมของ C. albicans รวบรวม ณจุดเวลาต่าง ๆ ถูกใช้เพื่อประเมินความไวของการตรวจสอบ Specificity ของแซนวิ ELISA ถูกประเมิน โดยการตรวจหา supernatants วัฒนธรรมอื่น ๆ สามโรคเบียส ห้า Aspergillus เบียส Cryptococcus neoformans และ Penicillium marneffei

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธีการ:
การแสดงออก recombinant เวกเตอร์ pPIC9K-Csa2 ถูกสร้างขึ้นและกลายเป็น Pichia pastoris GS115 การแสดงออกขนาดใหญ่ของโปรตีน Csa2 recombinant (rCsa2) ถูกปรับให้เหมาะสมโดยใช้เมทานอลและโปรตีนบริสุทธิ์ใน P. pastoris ระบบการแสดงออก กระต่ายนิวซีแลนด์และหนูตะเภาได้รับวัคซีนตามลำดับด้วย rCsa2 บริสุทธิ์เพื่อเตรียมความพร้อมฉีดโพลี แซนวิชแอนติบอดีสองวิธี ELISA ก่อตั้งขึ้นโดยการเลือกที่ดีที่สุดของการเจือจางฉีดเคลือบและการตรวจสอบการฉีด ความเข้มข้นที่แตกต่างกันของ rCsa2 และ supernatants วัฒนธรรมของ C. albicans เก็บที่จุดเวลาที่แตกต่างกันถูกนำมาใช้ในการประเมินความไวของการตรวจสอบ ความจำเพาะของแซนวิช ELISA ถูกประเมินโดยการตรวจสอบ supernatants วัฒนธรรมของอีกสาม Candida spp ห้า Aspergillus spp, Cryptococcus neoformans Penicillium marneffei และ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีการ : การ ppic9k-csa2 เวกเตอร์การแสดงออกแบบสร้างและแปลงเป็น pichia pastoris gs115 . การแสดงออกของโปรตีนรีคอมบิแนนท์ csa2 ขนาดใหญ่ ( rcsa2 ) คือการใช้เมทานอลและโปรตีนบริสุทธิ์ในระบบการแสดงออกหน้า pastoris . กระต่ายนิวซีแลนด์และหนูตะเภาตามลำดับที่ได้รับทำให้ rcsa2 เตรียมใช้แอนติ .ดับเบิ้ลแอนติบอดีแซนวิช ) ก่อตั้งขึ้นโดยการเลือกที่เหมาะสมของการชุบและการตรวจหาแอนติแอนติ . ระดับความเข้มข้นของ rcsa2 และวัฒนธรรมของ supernatants . าเก็บที่จุดเวลาที่แตกต่างกันถูกนำมาใช้เพื่อประเมินความไวของการตรวจหาความจำเพาะของแซนวิช ) ประเมินโดยการตรวจสอบวัฒนธรรม supernatants ของอีกสามคนซึ่งได้แก่ ห้า และ neoformans ล. , Penicillium และดีเอ็นเอ .