Cell-based SOA radical scavenging a

Cell-based SOA radical scavenging assay

Monolayer MCF7 cells grown in 96-well plate were exposed to 0.625 U/L xanthine oxidase and 0.5 mM xanthine for 1 h in the presence of L. tigris extract from 2 to 125 µg/mL in series of double dilution. Reaction mixtures were then aspirated and cells were cultured in fresh growth medium for an additional 72 h prior to cell viability assessment by MTT assay. MTT solution (5 mg/mL in phosphate buffered saline, PBS) was added subsequently at 20 µL per well followed by additional incubation at 37 oC for 4 h until purple formazan crystals developed. Total solutions were aspirated and DMSO (200 μL per well) was added to dissolve the formazan. Absorbance at 570 nm was measured. Quercetin and rutin served as positive controls while PBS served as the negative control. The effects of L. tigris sclerotial extracts on the viability of MCF7 in relation to PBS was determined.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ใช้เซลล์ SOA รุนแรง scavenging assayเซลล์ MCF7 monolayer โตในจานดี 96 ถูกสัมผัสกับ 0.625 U/L xanthine oxidase และ xanthine 0.5 mM สำหรับ h 1 ในต่อหน้าของ L. tigris แยก 2 ไมโครกรัมเป็นเครื่อง 125 mL ในชุดคู่เจือจาง น้ำยาผสมปฏิกิริยาถูก aspirated แล้ว ทางเซลล์ได้อ่างในเชื้อสดสำหรับการ h 72 เพิ่มเติมก่อนเซลล์ชีวิตประเมิน โดย MTT assay โซลูชัน MTT (5 mg/mL ในน้ำเกลือฟอสเฟต buffered, PBS) ถูกเพิ่มในภายหลังที่ 20 µL ต่อตาม ด้วยเติมบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสสำหรับ 4 h จนผลึกสีม่วง formazan พัฒนาดีขึ้น โซลูชั่นรวมถูก aspirated และ DMSO (200 μL ต่อดี) เพิ่มการละลาย formazan Absorbance ที่ 570 nm ที่วัด Rutin และ quercetin เสิร์ฟเป็นบวกควบคุมขณะ PBS ผู้ทรงควบคุมลบ ผลของสารสกัดจาก sclerotial L. tigris ในชีวิตของ MCF7 เกี่ยวกับ PBS ที่ถูกกำหนด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เซลล์ที่ใช้ทดสอบต้านอนุมูล SOA monolayer เซลล์ MCF7 ปลูกในแผ่น 96 หลุมได้สัมผัสกับ 0.625 U / L เอนไซม์และ 0.5 มิลลิ xanthine เป็นเวลา 1 ชั่วโมงในการปรากฏตัวของลิตร tigris สารสกัดจาก 2-125 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรในชุดของ เจือจางคู่ ผสมปฏิกิริยาถูกสำลักแล้วและเซลล์เพาะเลี้ยงในอาหารที่สดใหม่สำหรับการเจริญเติบโตเพิ่มอีก 72 ชั่วโมงก่อนที่จะมีการประเมินความมีชีวิตเซลล์ด้วยวิธี MTT วิธีการแก้ปัญหา MTT (5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรในน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์พีบีเอส) ถูกเพิ่มเข้ามาในเวลาต่อมา 20 ไมโครลิตรต่อตามมาอย่างดีจากการบ่มเพิ่มเติมที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 ชั่วโมงจนผลึกสีม่วง formazan พัฒนา การแก้ปัญหาทั้งหมดได้รับการสำลักและ DMSO (200 ไมโครลิตรต่อกัน) ถูกเพิ่มเข้ามาในการละลาย formazan ดูดกลืนแสงที่ 570 นาโนเมตรวัด Quercetin และรูตินทำหน้าที่ควบคุมเป็นบวกในขณะที่พีบีเอสทำหน้าที่เป็นผู้ควบคุมเชิงลบ ผลกระทบของสารสกัดจากแอ tigris โครงสร้าง sclerotium ในศักยภาพของ MCF7 ในความสัมพันธ์กับพีบีเอสถูกกำหนด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เซลล์ตาม SOA เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาต่อ

อย่าง mcf7 เซลล์ที่ปลูกใน 96 ดีแผ่นตาก 0.625 U / L ของเอนไซม์และ 0.5 มม. แซนธีน เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ในการปรากฏตัวของ L . พิภาคสกัดจาก 2 µ 125 กรัมต่อมิลลิลิตร ในชุดของคู่เจือจาง ผสมปฏิกิริยาแล้วสูดลมหายใจเข้า และเซลล์เพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเชื้อ สดอีก 72 ชั่วโมงก่อนการประเมินความมีชีวิตของเซลล์โดย MTT assay พบMTT โซลูชั่น ( 5 มก. / มล. ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( PBS ) ถูกเพิ่มเข้ามาในภายหลังที่ 20 µผมต่อแล้วตามด้วยการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 ชั่วโมง เพิ่มเติม จนถึงสีม่วงเหลือเชื่อขึ้น โซลูชั่นทั้งหมดถูกลม DMSO ( 200 และμผมต่อด้วย ) ถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อละลายปฏิบัติการ . การดูดกลืนแสงที่ 570 nm เป็นวัดquercetin และรูตินทำหน้าที่ควบคุมบวกในขณะที่ PBS ทำหน้าที่ควบคุมลบ ผลของระยะ L เสือจาก ชีวิตของ mcf7 ในความสัมพันธ์กับ PBS ถูกกำหนดไว้