- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
Using the technique as described ab
Using the technique as described above, the aforementioned ไมโครแอลจี
of the จีนัส ยูกลีนา were identified from the later-described results in
30 EXAMPLES as ยูกลีนา gracilis and named ยูกลีนา gracilis strain EOD-1.
The ยูกลีนา gracilis strain EOD-1 has been internationally deposited
in Patent Organism Depositary, National Institute of Technology and
Evaluation (NITE-IPOD: 2-5-8-120 Kazusakamatari, Kisarazu, Chiba
292-0818 Japan) on June 28, 2013 (Original date of deposit: March 25, 2013) as 5 Accession No. FERM BP-11530 under the provisions of the Budapest Treaty.
[0023]
As has been described above, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา have chloroplasts in their cells, and therefore can grow by photosynthesis. That is, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา are photoautotrophs.
10 Further, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา can grow also by using
organic nutrients such as glucose as their nutrients. That is, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา are also heterotrophs.
In this way, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา can grow only by
photoautotrophy, can grow only by heterotrophy, or can grow by concurrent 15 photoautotrophy and heterotrophy.
[0024]
The mutant strain is produced, for example, by applying a common
mutation process, adaptation by subculture, or natural mutation.
The mutation process can be performed using common mutagens. 20 Examples of the mutagens include drugs having mutagenic activity and
ultraviolet rays. Examples of the drugs having mutagenic activity include nucleotide base analogs such as streptomycin, ofloxacin, ethyl methane
sulfonate, and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine, and bromouracil, and acridines.
25 [0025]
Next, an embodiment of the วิธีเพื่อผลิต โพลีแซคคาไรด์ according to the การประดิษฐ์นี้ is described.
[0026]
According to the วิธีเพื่อผลิต โพลีแซคคาไรด์ of this
30 embodiment, at least โพลีแซคคาไรด์ are produced by culturing the ไมโครแอลจี
of the จีนัส ยูกลีนา.
The วิธีเพื่อผลิต โพลีแซคคาไรด์ of this embodiment has an effect of enabling โพลีแซคคาไรด์ to be sufficiently obtained.
[0027]
Specifically, the วิธีเพื่อผลิต โพลีแซคคาไรด์ of this
5 embodiment includes a culture step of culturing the ไมโครแอลจี of the จีนัส
ยูกลีนา in a บรอธ containing at least water.
[0028]
The บรอธ preferably contains water and nutrients that promote the growth of the ไมโครแอลจี.
10 [0029]
Examples of the nutrients include inorganic nutrients and organic nutrients.
[0030]
Examples of the inorganic nutrients include nitrogen-containing
15 inสารประกอบอินทรีย์s and phosphorus-containing inสารประกอบอินทรีย์s.
Further, examples of the inorganic nutrients include potassium ion, iron ion,
manganese ion, cobalt ion, zinc ion, copper ion, molybdenum ion, and nickel ion.
The concentration of the inorganic nutrients in the บรอธ is generally about a concentration that is commonly known.
20 [0031]
Examples of the organic nutrients include monosaccharides such as
glucose and fructose, vitamins such as vitamins B6 and B12, amino acids such as arginine, aspartic acid, glutamic acid, glycine, and histidine, organic acids such as malic acid, citric acid, succinic acid, and acetic acid, and alcohols such as
25 ethanol.
[0032]
Examples of the composition of the บรอธ to be employed include the
composition of "AF-6 อาหารเพาะเลี้ยง", the composition of "Cramer-Myers
อาหารเพาะเลี้ยง", the composition of "Hutner อาหารเพาะเลี้ยง", which will be 30 described below, or a composition similar to these compositions.
In the culture step, the บรอธ preferably contains 15 to 30 g/L of glucose as a carbon source. Further, the บรอธ preferably contains yeast ไลเซต (which will be described below). Further, the บรอธ preferably has the composition of the AF6 อาหารเพาะเลี้ยง.
5 [0034]
The culture step can be carried out, for example, in a bath containing a mixture of the aforementioned บรอธ and the ไมโครแอลจี.
[0035]
In the culture step, photosynthesis of the ไมโครแอลจี can be caused by 10 irradiating the ไมโครแอลจี with light. That is, in the culture step,
photoautotrophic culture can be performed.
When the ไมโครแอลจี are irradiated with light in the culture step, the
ไมโครแอลจี introduce carbon dioxide into their cells by photosynthesis, and can
grow while producing at least โพลีแซคคาไรด์ such as พาราไมลัม. Further, 15 the ไมโครแอลจี can grow while producing proteins and secondary metabolites
such as ไลปิด, pigments, and vitamins.
[0036]
The light with which the ไมโครแอลจี are irradiated in the culture step is
not specifically limited as long as it causes photosynthesis of the ไมโครแอลจี. 20 As the light, natural light from the sun or artificial light such as illumination is,
for example, employed.
[0037]
The intensity of the light irradiation in the photoautotrophic culture
step is not specifically limited, but is generally 50 innol/m2•s to 200 pmol/m2•s.
25 [0038]
In the culture step, a period during which the ไมโครแอลจี are irradiated with light and a period during which the ไมโครแอลจี are not irradiated with light can be alternately repeated.
That is, a period during which photoautotrophic culture is performed 30 and a period during which photoautotrophic culture is not performed can be
alternately repeated in the culture step.
[0039]
The period of the light irradiation in the culture step is generally 8
hours to 15 hours, which is equivalent to daytime during which sunlight shines.
Further, the period of dark conditions during which the light irradiation is not 5 performed for inhibiting the photosynthesis of the ไมโครแอลจี is generally 9
hours to 16 hours, which is equivalent to night-time during which sunlight does
not shine. These periods can be changed depending on the situation or the
purpose.
The dark conditions in which the light irradiation is not performed are 10 the conditions in which the photosynthetic photon flux density (PPFD) is 50
pmol/m2•s or less.
[0040]
Meanwhile, heterotrophic culture in which the ไมโครแอลจี are cultured
in the presence of the organic nutrients included in the aforementioned
15 nutrients can be carried out in the culture step. When the ไมโครแอลจี are
cultured in the presence of the organic nutrients in the culture step, the
ไมโครแอลจี introduce the organic nutrients into their cells, and can grow while
producing at least โพลีแซคคาไรด์ such as พาราไมลัม.
[0041]
20 That is, at least one of photoautotrophic culture and heterotrophic
culture can be performed in the culture step.
It is preferable that both of the photoautotrophic culture and
heterotrophic culture be performed in the culture step at the same time, in that
the growth of the ไมโครแอลจี can be further promoted. That is, it is preferable 25 that photoheterotrophic culture be performed in the culture step.
[0042]
It is preferable to employ, as the organic nutrients used in the
heterotrophic culture and photoheterotrophic culture, alcohols such as ethanol,
monosaccharides such as glucose and fructose, or wastes containing these
30 components that can be used by the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา, for
example. Further, it is preferable that yeast or yeast ไลเซต (hereinafter,
referred to also as yeast extract) be used in combination as the organic
nutrients, in that the growth of the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา can be more reliably promoted.
of the จีนัส ยูกลีนา were identified from the later-described results in
30 EXAMPLES as ยูกลีนา gracilis and named ยูกลีนา gracilis strain EOD-1.
The ยูกลีนา gracilis strain EOD-1 has been internationally deposited
in Patent Organism Depositary, National Institute of Technology and
Evaluation (NITE-IPOD: 2-5-8-120 Kazusakamatari, Kisarazu, Chiba
292-0818 Japan) on June 28, 2013 (Original date of deposit: March 25, 2013) as 5 Accession No. FERM BP-11530 under the provisions of the Budapest Treaty.
[0023]
As has been described above, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา have chloroplasts in their cells, and therefore can grow by photosynthesis. That is, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา are photoautotrophs.
10 Further, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา can grow also by using
organic nutrients such as glucose as their nutrients. That is, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา are also heterotrophs.
In this way, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา can grow only by
photoautotrophy, can grow only by heterotrophy, or can grow by concurrent 15 photoautotrophy and heterotrophy.
[0024]
The mutant strain is produced, for example, by applying a common
mutation process, adaptation by subculture, or natural mutation.
The mutation process can be performed using common mutagens. 20 Examples of the mutagens include drugs having mutagenic activity and
ultraviolet rays. Examples of the drugs having mutagenic activity include nucleotide base analogs such as streptomycin, ofloxacin, ethyl methane
sulfonate, and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine, and bromouracil, and acridines.
25 [0025]
Next, an embodiment of the วิธีเพื่อผลิต โพลีแซคคาไรด์ according to the การประดิษฐ์นี้ is described.
[0026]
According to the วิธีเพื่อผลิต โพลีแซคคาไรด์ of this
30 embodiment, at least โพลีแซคคาไรด์ are produced by culturing the ไมโครแอลจี
of the จีนัส ยูกลีนา.
The วิธีเพื่อผลิต โพลีแซคคาไรด์ of this embodiment has an effect of enabling โพลีแซคคาไรด์ to be sufficiently obtained.
[0027]
Specifically, the วิธีเพื่อผลิต โพลีแซคคาไรด์ of this
5 embodiment includes a culture step of culturing the ไมโครแอลจี of the จีนัส
ยูกลีนา in a บรอธ containing at least water.
[0028]
The บรอธ preferably contains water and nutrients that promote the growth of the ไมโครแอลจี.
10 [0029]
Examples of the nutrients include inorganic nutrients and organic nutrients.
[0030]
Examples of the inorganic nutrients include nitrogen-containing
15 inสารประกอบอินทรีย์s and phosphorus-containing inสารประกอบอินทรีย์s.
Further, examples of the inorganic nutrients include potassium ion, iron ion,
manganese ion, cobalt ion, zinc ion, copper ion, molybdenum ion, and nickel ion.
The concentration of the inorganic nutrients in the บรอธ is generally about a concentration that is commonly known.
20 [0031]
Examples of the organic nutrients include monosaccharides such as
glucose and fructose, vitamins such as vitamins B6 and B12, amino acids such as arginine, aspartic acid, glutamic acid, glycine, and histidine, organic acids such as malic acid, citric acid, succinic acid, and acetic acid, and alcohols such as
25 ethanol.
[0032]
Examples of the composition of the บรอธ to be employed include the
composition of "AF-6 อาหารเพาะเลี้ยง", the composition of "Cramer-Myers
อาหารเพาะเลี้ยง", the composition of "Hutner อาหารเพาะเลี้ยง", which will be 30 described below, or a composition similar to these compositions.
In the culture step, the บรอธ preferably contains 15 to 30 g/L of glucose as a carbon source. Further, the บรอธ preferably contains yeast ไลเซต (which will be described below). Further, the บรอธ preferably has the composition of the AF6 อาหารเพาะเลี้ยง.
5 [0034]
The culture step can be carried out, for example, in a bath containing a mixture of the aforementioned บรอธ and the ไมโครแอลจี.
[0035]
In the culture step, photosynthesis of the ไมโครแอลจี can be caused by 10 irradiating the ไมโครแอลจี with light. That is, in the culture step,
photoautotrophic culture can be performed.
When the ไมโครแอลจี are irradiated with light in the culture step, the
ไมโครแอลจี introduce carbon dioxide into their cells by photosynthesis, and can
grow while producing at least โพลีแซคคาไรด์ such as พาราไมลัม. Further, 15 the ไมโครแอลจี can grow while producing proteins and secondary metabolites
such as ไลปิด, pigments, and vitamins.
[0036]
The light with which the ไมโครแอลจี are irradiated in the culture step is
not specifically limited as long as it causes photosynthesis of the ไมโครแอลจี. 20 As the light, natural light from the sun or artificial light such as illumination is,
for example, employed.
[0037]
The intensity of the light irradiation in the photoautotrophic culture
step is not specifically limited, but is generally 50 innol/m2•s to 200 pmol/m2•s.
25 [0038]
In the culture step, a period during which the ไมโครแอลจี are irradiated with light and a period during which the ไมโครแอลจี are not irradiated with light can be alternately repeated.
That is, a period during which photoautotrophic culture is performed 30 and a period during which photoautotrophic culture is not performed can be
alternately repeated in the culture step.
[0039]
The period of the light irradiation in the culture step is generally 8
hours to 15 hours, which is equivalent to daytime during which sunlight shines.
Further, the period of dark conditions during which the light irradiation is not 5 performed for inhibiting the photosynthesis of the ไมโครแอลจี is generally 9
hours to 16 hours, which is equivalent to night-time during which sunlight does
not shine. These periods can be changed depending on the situation or the
purpose.
The dark conditions in which the light irradiation is not performed are 10 the conditions in which the photosynthetic photon flux density (PPFD) is 50
pmol/m2•s or less.
[0040]
Meanwhile, heterotrophic culture in which the ไมโครแอลจี are cultured
in the presence of the organic nutrients included in the aforementioned
15 nutrients can be carried out in the culture step. When the ไมโครแอลจี are
cultured in the presence of the organic nutrients in the culture step, the
ไมโครแอลจี introduce the organic nutrients into their cells, and can grow while
producing at least โพลีแซคคาไรด์ such as พาราไมลัม.
[0041]
20 That is, at least one of photoautotrophic culture and heterotrophic
culture can be performed in the culture step.
It is preferable that both of the photoautotrophic culture and
heterotrophic culture be performed in the culture step at the same time, in that
the growth of the ไมโครแอลจี can be further promoted. That is, it is preferable 25 that photoheterotrophic culture be performed in the culture step.
[0042]
It is preferable to employ, as the organic nutrients used in the
heterotrophic culture and photoheterotrophic culture, alcohols such as ethanol,
monosaccharides such as glucose and fructose, or wastes containing these
30 components that can be used by the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา, for
example. Further, it is preferable that yeast or yeast ไลเซต (hereinafter,
referred to also as yeast extract) be used in combination as the organic
nutrients, in that the growth of the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา can be more reliably promoted.
0/5000
การใช้เทคนิคตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ไมโครแอลจีดังกล่าว ของจีนัสยูกลีนาได้ระบุจากผลภายหลังได้อธิบายไว้ใน ตัวอย่าง 30 ยูกลีนาจระเข้และจระเข้ยูกลีนาตั้งชื่อสายพันธุ์ EOD-1 สายพันธุ์จระเข้ยูกลีนา EOD-1 ได้รับฝากไว้ในต่างประเทศ ในสิทธิบัตรสิ่งมีชีวิต Depositary สถาบันเทคโนโลยี และ ประเมิน (ไนท์ IPOD: 2-5-8-120 Kazusakamatari, Kisarazu ชิบะ 292-0818 ญี่ปุ่น) บน 28 มิถุนายน 2013 (ฝากต้นฉบับวัน: 25 มีนาคม 2013) เป็นหมายเลขทะเบียน 5 FERM BP-11530 ภายใต้บทบัญญัติของสนธิสัญญาบูดาเปส [0023]มีการอธิบายไว้ข้างต้น ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนามี chloroplasts ในเซลล์ และดังนั้นจึง สามารถเจริญเติบโต โดยการสังเคราะห์ด้วยแสง นั่นคือ ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาได้ photoautotrophsต่อ 10 ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาสามารถเจริญเติบโตยังโดยสารอาหารอินทรีย์เช่นน้ำตาลกลูโคสเป็นสารอาหารของพวกเขา นั่นคือ ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาได้ยัง heterotrophsด้วยวิธีนี้ ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาสามารถเจริญเติบโตโดยเฉพาะ photoautotrophy สามารถขยายเฉพาะ heterotrophy หรือสามารถขยาย 15 พร้อมกัน photoautotrophy และ heterotrophy[0024]สายพันธุ์กลายพันธุ์ผลิต เช่น โดยใช้ร่วมกับ กระบวนการกลายพันธุ์ ปรับวัฒนธรรม หรือการกลายพันธุ์ตามธรรมชาติ การกลายพันธุ์สามารถทำได้โดยใช้ mutagens ทั่วไป ตัวอย่าง 20 ของ mutagens นี้ได้แก่ยาเสพติดที่มีกิจกรรม mutagenic และรังสีอัลตราไวโอเลต ตัวอย่างของยาเสพติดมีกิจกรรม mutagenic ได้แก่นิวคลีโอไทด์ analogs พื้นฐานเช่น streptomycin, ofloxacin มีเทนเอทิล sulfonate, N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine และ bromouracil และ acridines ด้วย25 [0025]ถัดไป การลื่นโพลีแซคคาไรด์วิธีเพื่อผลิตตามการประดิษฐ์นี้ได้อธิบายไว้[0026]ตามโพลีแซคคาไรด์วิธีเพื่อผลิตนี้30 ลื่น น้อยผลิต โดย culturing ไมโครแอลจีโพลีแซคคาไรด์ของยูกลีนาจีนัสโพลีแซคคาไรด์วิธีเพื่อผลิตของลื่นนี้มีผลกระทบของการเปิดใช้งานโพลีแซคคาไรด์ที่ได้รับเพียงพอ [0027]โดยเฉพาะ โพลีแซคคาไรด์วิธีเพื่อผลิตนี้ขั้นวัฒนธรรม culturing ไมโครแอลจีของจีนัสมีลื่น 5ยูกลีนาในบรอธที่ประกอบด้วยน้ำน้อย[0028]The บรอธ preferably contains water and nutrients that promote the growth of the ไมโครแอลจี.10 [0029]Examples of the nutrients include inorganic nutrients and organic nutrients.[0030]Examples of the inorganic nutrients include nitrogen-containing15 inสารประกอบอินทรีย์s and phosphorus-containing inสารประกอบอินทรีย์s.Further, examples of the inorganic nutrients include potassium ion, iron ion,manganese ion, cobalt ion, zinc ion, copper ion, molybdenum ion, and nickel ion. The concentration of the inorganic nutrients in the บรอธ is generally about a concentration that is commonly known.20 [0031]Examples of the organic nutrients include monosaccharides such asglucose and fructose, vitamins such as vitamins B6 and B12, amino acids such as arginine, aspartic acid, glutamic acid, glycine, and histidine, organic acids such as malic acid, citric acid, succinic acid, and acetic acid, and alcohols such as25 ethanol.[0032]Examples of the composition of the บรอธ to be employed include the composition of "AF-6 อาหารเพาะเลี้ยง", the composition of "Cramer-Myers อาหารเพาะเลี้ยง", the composition of "Hutner อาหารเพาะเลี้ยง", which will be 30 described below, or a composition similar to these compositions. In the culture step, the บรอธ preferably contains 15 to 30 g/L of glucose as a carbon source. Further, the บรอธ preferably contains yeast ไลเซต (which will be described below). Further, the บรอธ preferably has the composition of the AF6 อาหารเพาะเลี้ยง.5 [0034]The culture step can be carried out, for example, in a bath containing a mixture of the aforementioned บรอธ and the ไมโครแอลจี. [0035]In the culture step, photosynthesis of the ไมโครแอลจี can be caused by 10 irradiating the ไมโครแอลจี with light. That is, in the culture step, photoautotrophic culture can be performed.When the ไมโครแอลจี are irradiated with light in the culture step, the ไมโครแอลจี introduce carbon dioxide into their cells by photosynthesis, and can grow while producing at least โพลีแซคคาไรด์ such as พาราไมลัม. Further, 15 the ไมโครแอลจี can grow while producing proteins and secondary metabolites such as ไลปิด, pigments, and vitamins.[0036]The light with which the ไมโครแอลจี are irradiated in the culture step is not specifically limited as long as it causes photosynthesis of the ไมโครแอลจี. 20 As the light, natural light from the sun or artificial light such as illumination is, for example, employed.
[0037]
The intensity of the light irradiation in the photoautotrophic culture
step is not specifically limited, but is generally 50 innol/m2•s to 200 pmol/m2•s.
25 [0038]
In the culture step, a period during which the ไมโครแอลจี are irradiated with light and a period during which the ไมโครแอลจี are not irradiated with light can be alternately repeated.
That is, a period during which photoautotrophic culture is performed 30 and a period during which photoautotrophic culture is not performed can be
alternately repeated in the culture step.
[0039]
The period of the light irradiation in the culture step is generally 8
hours to 15 hours, which is equivalent to daytime during which sunlight shines.
Further, the period of dark conditions during which the light irradiation is not 5 performed for inhibiting the photosynthesis of the ไมโครแอลจี is generally 9
hours to 16 hours, which is equivalent to night-time during which sunlight does
not shine. These periods can be changed depending on the situation or the
purpose.
The dark conditions in which the light irradiation is not performed are 10 the conditions in which the photosynthetic photon flux density (PPFD) is 50
pmol/m2•s or less.
[0040]
Meanwhile, heterotrophic culture in which the ไมโครแอลจี are cultured
in the presence of the organic nutrients included in the aforementioned
15 nutrients can be carried out in the culture step. When the ไมโครแอลจี are
cultured in the presence of the organic nutrients in the culture step, the
ไมโครแอลจี introduce the organic nutrients into their cells, and can grow while
producing at least โพลีแซคคาไรด์ such as พาราไมลัม.
[0041]
20 That is, at least one of photoautotrophic culture and heterotrophic
culture can be performed in the culture step.
It is preferable that both of the photoautotrophic culture and
heterotrophic culture be performed in the culture step at the same time, in that
the growth of the ไมโครแอลจี can be further promoted. That is, it is preferable 25 that photoheterotrophic culture be performed in the culture step.
[0042]
It is preferable to employ, as the organic nutrients used in the
heterotrophic culture and photoheterotrophic culture, alcohols such as ethanol,
monosaccharides such as glucose and fructose, or wastes containing these
30 components that can be used by the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา, for
example. Further, it is preferable that yeast or yeast ไลเซต (hereinafter,
referred to also as yeast extract) be used in combination as the organic
nutrients, in that the growth of the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา can be more reliably promoted.
[0037]
The intensity of the light irradiation in the photoautotrophic culture
step is not specifically limited, but is generally 50 innol/m2•s to 200 pmol/m2•s.
25 [0038]
In the culture step, a period during which the ไมโครแอลจี are irradiated with light and a period during which the ไมโครแอลจี are not irradiated with light can be alternately repeated.
That is, a period during which photoautotrophic culture is performed 30 and a period during which photoautotrophic culture is not performed can be
alternately repeated in the culture step.
[0039]
The period of the light irradiation in the culture step is generally 8
hours to 15 hours, which is equivalent to daytime during which sunlight shines.
Further, the period of dark conditions during which the light irradiation is not 5 performed for inhibiting the photosynthesis of the ไมโครแอลจี is generally 9
hours to 16 hours, which is equivalent to night-time during which sunlight does
not shine. These periods can be changed depending on the situation or the
purpose.
The dark conditions in which the light irradiation is not performed are 10 the conditions in which the photosynthetic photon flux density (PPFD) is 50
pmol/m2•s or less.
[0040]
Meanwhile, heterotrophic culture in which the ไมโครแอลจี are cultured
in the presence of the organic nutrients included in the aforementioned
15 nutrients can be carried out in the culture step. When the ไมโครแอลจี are
cultured in the presence of the organic nutrients in the culture step, the
ไมโครแอลจี introduce the organic nutrients into their cells, and can grow while
producing at least โพลีแซคคาไรด์ such as พาราไมลัม.
[0041]
20 That is, at least one of photoautotrophic culture and heterotrophic
culture can be performed in the culture step.
It is preferable that both of the photoautotrophic culture and
heterotrophic culture be performed in the culture step at the same time, in that
the growth of the ไมโครแอลจี can be further promoted. That is, it is preferable 25 that photoheterotrophic culture be performed in the culture step.
[0042]
It is preferable to employ, as the organic nutrients used in the
heterotrophic culture and photoheterotrophic culture, alcohols such as ethanol,
monosaccharides such as glucose and fructose, or wastes containing these
30 components that can be used by the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา, for
example. Further, it is preferable that yeast or yeast ไลเซต (hereinafter,
referred to also as yeast extract) be used in combination as the organic
nutrients, in that the growth of the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา can be more reliably promoted.
การแปล กรุณารอสักครู่..
การใช้เทคนิคตามที่อธิบายไว้ข้างต้นดังกล่าวไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาถูกระบุว่าจากผลการภายหลังที่อธิบายไว้ใน
30 ตัวอย่างเป็นยูกลีนา gracilis และตั้งชื่อยูกลีนา gracilis ความเครียด EOD-1. ยูกลีนา gracilis ความเครียด EOD-1 ได้รับการฝากในระดับสากลในการฝากออสิทธิบัตรสถาบันเทคโนโลยีแห่งชาติและการประเมินผล(NITE-IPOD: 2-5-8-120 Kazusakamatari, Kisarazu ชิบะ292-0818 ญี่ปุ่น) 28 มิถุนายน 2013 (วันที่ ของเงินฝาก:. 25 มีนาคม 2013) เป็น 5 เลข FERM BP-11530 ภายใต้บทบัญญัติของสนธิสัญญาบูดาเปสต์[0023] ในฐานะที่ได้รับการอธิบายข้างต้นไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนามีคลอโรพลาในเซลล์ของพวกเขา และดังนั้นจึงสามารถเจริญเติบโตได้โดยการสังเคราะห์แสง นั่นคือไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาเป็น photoautotrophs. 10 นอกจากนี้ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนายังสามารถเจริญเติบโตได้โดยการใช้สารอาหารอินทรีย์เช่นน้ำตาลกลูโคสเป็นสารอาหารของพวกเขา นั่นคือไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนานอกจากนี้ยังมี heterotrophs. ในวิธีนี้ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาสามารถเจริญเติบโตได้โดยเฉพาะphotoautotrophy สามารถเจริญเติบโตโดยเฉพาะ heterotrophy หรือสามารถเจริญเติบโตได้โดยพร้อมกัน 15 photoautotrophy และ heterotrophy. [0024] สายพันธุ์ที่กลายพันธุ์ที่ผลิตตัวอย่างเช่นโดยการใช้ร่วมกันขั้นตอนการกลายพันธุ์ของการปรับตัวโดยวัฒนธรรมหรือการกลายพันธุ์ตามธรรมชาติ. ขั้นตอนการกลายพันธุ์ที่สามารถดำเนินการโดยใช้สารก่อกลายพันธุ์ที่พบบ่อย 20 ตัวอย่างของการก่อกลายพันธุ์รวมถึงยาเสพติดที่มีกิจกรรมการก่อกลายพันธุ์และรังสีอัลตราไวโอเลต ตัวอย่างของยาเสพติดที่มีกิจกรรมรวมถึงการก่อกลายพันธุ์ analogs ฐานเบื่อหน่ายเช่น streptomycin, Ofloxacin มีเทนเอทิลซัลโฟเนตและN-methyl-n 'ไนโตร-N-nitrosoguanidine และ bromouracil และเฮ. 25 [0025] ถัดไปศูนย์รวมของ วิธีเพื่อผลิตโพลีแซคคาไรด์ตามการประดิษฐ์นี้มีการอธิบายไว้. [0026] ตามที่วิธีเพื่อผลิตโพลีแซคคาไรด์นี้ศูนย์รวม 30 อย่างน้อยโพลีแซคคาไรด์ มีการผลิตโดยการเพาะเลี้ยงไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนา. วิธีเพื่อผลิตโพลีแซคคาไรด์ของศูนย์รวมนี้มีผลกระทบของการเปิดใช้โพลีแซคคาไรด์ที่จะได้รับอย่างเพียงพอ. [0027] โดยเฉพาะวิธีเพื่อผลิตโพลีแซคคาไรด์นี้ศูนย์รวม 5 รวมถึงขั้นตอนที่วัฒนธรรมของการเพาะเลี้ยงไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาในบรอธ ที่มีน้ำอย่างน้อย. [0028] บรอ ธ โดยเฉพาะอย่างยิ่งมีน้ำและสารอาหารที่ส่งเสริมการเจริญเติบโตของไมโครแอลจีได้. 10 [0029] ตัวอย่างของสารอาหารที่ประกอบด้วยสารอาหารนินทรีย์และสารอาหารอินทรีย์. [0030] ตัวอย่างของสารอาหารที่นินทรีย์ ได้แก่ ไนโตรเจนที่มี15 ในสารประกอบอินทรีย์และ ฟอสฟอรัสที่มีในสารประกอบอินทรีย์ s. นอกจากนี้ตัวอย่างของสารอาหารที่อนินทรีรวมถึงโพแทสเซียมไอออนไอออนเหล็กไอออนแมงกานีสไอออนโคบอลต์ไอออนสังกะสีไอออนทองแดงไอออนโมลิบดีนัมและไอออนนิกเกิล. ความเข้มข้นของสารอาหารที่นินทรีย์ในการบ รอ ธ โดยทั่วไปเกี่ยวกับความเข้มข้นที่เป็นที่รู้จักกันทั่วไป. 20 [0031] ตัวอย่างของสารอาหารอินทรีย์รวม monosaccharides เช่นกลูโคสและฟรุกโตส, วิตามินเช่นวิตามินบี 6 และบี 12 กรดอะมิโนเช่นอาร์จินีน, กรด aspartic กรดกลูตามิก, glycine และฮิสติดีน, กรดอินทรีย์เช่นกรดมาลิกกรดซิตริกกรดซัคและกรดอะซิติกและแอลกอฮอล์เช่น25 เอทานอล. [0032] ตัวอย่างขององค์ประกอบของบรอ ธ ที่จะใช้รวมถึงองค์ประกอบของ"AF- 6 อาหารเพาะเลี้ยง "องค์ประกอบของ" แครมเมอ-Myers อาหารเพาะเลี้ยง "องค์ประกอบของ" Hutner อาหารเพาะเลี้ยง "ซึ่งจะมี 30 อธิบายไว้ด้านล่างหรือองค์ประกอบคล้ายกับองค์ประกอบเหล่านี้. ในขั้นตอนการเพาะเลี้ยงที่บ รอ ธ โดยเฉพาะอย่างยิ่งมี 15 ถึง 30 กรัม / ลิตรของน้ำตาลกลูโคสเป็นแหล่งคาร์บอน นอกจากนี้บรอ ธ โดยเฉพาะอย่างยิ่งมียีสต์ไลเซต (ซึ่งจะมีการอธิบายไว้ด้านล่าง) นอกจากนี้บรอ ธ โดยเฉพาะอย่างยิ่งมีองค์ประกอบของ AF6 อาหารเพาะเลี้ยงได้. 5 [0034] ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงสามารถดำเนินการได้ยกตัวอย่างเช่นในห้องอาบน้ำที่มีส่วนผสมของบดังกล่าวรอ ธ และไมโครแอลจี . [0035] ในขั้นตอนที่วัฒนธรรมการสังเคราะห์แสงของไมโครแอลจีสามารถเกิดจากรังสี 10 ไมโครแอลจีที่มีแสง นั่นคือในขั้นตอนที่วัฒนธรรมวัฒนธรรม photoautotrophic สามารถดำเนินการ. เมื่อไมโครแอลจีได้รับการฉายรังสีที่มีแสงในขั้นตอนที่วัฒนธรรมที่ไมโครแอลจีแนะนำก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์เข้าสู่เซลล์ของพวกเขาโดยการสังเคราะห์และสามารถเจริญเติบโตได้ในขณะที่การผลิตอย่างน้อยโพลีแซคคาไรด์เช่นพาราไมลัม นอกจากนี้ 15 ไมโครแอลจีสามารถเจริญเติบโตได้ในขณะที่การผลิตโปรตีนและสารทุติยภูมิเช่นไลปิดสีและวิตามิน. [0036] แสงกับที่ไมโครแอลจีได้รับการฉายรังสีในขั้นตอนการเพาะเลี้ยงจะไม่ได้ จำกัด อยู่เฉพาะเป็นเวลานาน ในขณะที่มันทำให้เกิดการสังเคราะห์แสงของไมโครแอลจี 20 ในฐานะที่เป็นแสงแสงธรรมชาติจากแสงแดดหรือแสงเทียมเช่นไฟส่องสว่างคือตัวอย่างเช่นการจ้างงาน. [0037] ความรุนแรงของการฉายรังสีแสงในวัฒนธรรม photoautotrophic ขั้นตอนที่ไม่ได้ จำกัด อยู่เฉพาะ แต่โดยทั่วไป 50 innol / m2 • s 200 pmol / m2 • s. 25 [0038] ในขั้นตอนที่วัฒนธรรมระยะเวลาระหว่างที่ไมโครแอลจีได้รับการฉายรังสีด้วยแสงและระยะเวลาที่ไมโครแอลจีจะไม่ได้รับการฉายรังสีด้วยแสงสามารถทำซ้ำสลับ . นั่นคือช่วงที่วัฒนธรรม photoautotrophic จะดำเนินการวันที่ 30 และช่วงที่วัฒนธรรม photoautotrophic จะไม่ดำเนินการสามารถเป็นซ้ำสลับกันในขั้นตอนที่วัฒนธรรม. [0039] ระยะเวลาของการฉายรังสีแสงในขั้นตอนการเพาะเลี้ยงโดยทั่วไป 8 ชั่วโมง 15 ชั่วโมงซึ่งเทียบเท่ากับเวลากลางวันระหว่างที่แสงแดดส่อง. นอกจากนี้ระยะเวลาของการที่มืดในระหว่างที่มีการฉายแสงไม่ได้เป็น 5 ดำเนินการในการยับยั้งการสังเคราะห์แสงของไมโครแอลจีโดยทั่วไป 9 ชั่วโมงถึง 16 ชั่วโมงซึ่งเทียบเท่า เพื่อคืนช่วงเวลาที่แสงแดดไม่ได้ส่องแสง ช่วงเวลาเหล่านี้สามารถเปลี่ยนแปลงได้ขึ้นอยู่กับสถานการณ์หรือวัตถุประสงค์. เงื่อนไขเข้มที่ฉายแสงจะไม่ได้ดำเนินการ 10 เงื่อนไขในการที่ความหนาแน่นของของเหลวโฟสังเคราะห์ (PPFD) เป็น 50 pmol / m2 • s หรือน้อยกว่า. [0040 ] ในขณะเดียวกันวัฒนธรรม heterotrophic ที่ไมโครแอลจีมีการเพาะเลี้ยงในการปรากฏตัวของสารอาหารอินทรีย์ที่รวมอยู่ในดังกล่าว15 สารอาหารที่สามารถดำเนินการในขั้นตอนที่วัฒนธรรม เมื่อไมโครแอลจีมีการเพาะเลี้ยงในการปรากฏตัวของสารอาหารอินทรีย์ในขั้นตอนที่วัฒนธรรมที่ไมโครแอลจีแนะนำสารอาหารอินทรีย์เข้าสู่เซลล์ของพวกเขาและสามารถเจริญเติบโตได้ในขณะที่การผลิตอย่างน้อยโพลีแซคคาไรด์เช่นพาราไมลัม. [0041] 20 นั่นคืออย่างน้อยหนึ่งของวัฒนธรรม photoautotrophic และ heterotrophic วัฒนธรรมสามารถดำเนินการในขั้นตอนที่วัฒนธรรม. เป็นที่นิยมทั้งของวัฒนธรรม photoautotrophic และวัฒนธรรมheterotrophic จะดำเนินการในขั้นตอนที่วัฒนธรรมในเวลาเดียวกัน ในการที่การเจริญเติบโตของไมโครแอลจีสามารถส่งเสริมต่อไป นั่นคือมันเป็นที่นิยม 25 ว่าวัฒนธรรม photoheterotrophic จะดำเนินการในขั้นตอนที่วัฒนธรรม. [0042] เป็นที่นิยมที่จะจ้างงานเป็นสารอาหารอินทรีย์ที่ใช้ในการเพาะเลี้ยง heterotrophic และวัฒนธรรม photoheterotrophic แอลกอฮอล์เช่นเอทานอล monosaccharides เช่นกลูโคสและฟรุกโตส หรือของเสียเหล่านี้มี30 ชิ้นส่วนที่สามารถนำมาใช้โดยไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาสำหรับตัวอย่างเช่น ต่อไปก็เป็นที่นิยมที่ยีสต์หรือยีสต์ไลเซต (ต่อไปนี้, จะเรียกว่าเป็นสารสกัดจากยีสต์) ถูกนำมาใช้ในการรวมกันเป็นอินทรีย์สารอาหารในการเจริญเติบโตของไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาอาจจะน่าเชื่อถือมากขึ้นการเลื่อนตำแหน่ง
การแปล กรุณารอสักครู่..
โดยใช้เทคนิคที่อธิบายไว้ข้างต้นดังกล่าวไมโครแอลจี
ของจีนัสยูกลีนาถูกระบุจากอธิบายในภายหลังในผล
30 ตัวอย่างเป็นยูกลีนา glandulifera และชื่อยูกลีนา glandulifera eod-1 สายพันธุ์
ยูกลีนา glandulifera เมื่อย eod-1 ได้รับสิทธิบัตรสิ่งมีชีวิต ซึ่งในต่างประเทศฝาก
,สถาบันเทคโนโลยีและการประเมินผล ( nite-ipod
: 2-5-8-120 kazusakamatari Kisarazu , ชิบะ ,
292-0818 ญี่ปุ่น ) วันที่ 28 มิถุนายน 2556 ( ฉบับวันที่ฝากเงิน : 25 มีนาคม 2556 ) เป็น 5 ชนิดไม่ มี bp-11530 ภายใต้บทบัญญัติของสนธิสัญญากรุงบูดาเปส
[ ]
0023 ตามที่ได้รับการอธิบายข้างต้น ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนามีคลอโรพลาสต์ในเซลล์ของพวกเขาและดังนั้นจึงสามารถเติบโตได้โดยการสังเคราะห์แสง นั่นคือ ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาเป็น photoautotrophs .
10 เพิ่มเติม ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาสามารถเติบโตได้โดยใช้
รังอินทรีย์เช่นกลูโคส เป็นสารอาหารของพวกเขา นั่นคือ ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนายัง heterotrophs .
ในวิธีนี้การไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาสามารถเจริญเติบโตโดยเฉพาะ
photoautotrophy สามารถเติบโตเท่านั้น โดย heterotrophy หรือสามารถเติบโตพร้อมกัน 15 และ photoautotrophy heterotrophy .
[ ]
0024 สายพันธุ์กลายที่ผลิต เช่น การใช้กระบวนการของการปรับตัวโดยทั่วไป
วัฒนธรรมย่อย หรือการกลายพันธุ์ตามธรรมชาติ
กระบวนการกลายพันธุ์สามารถดําเนินการต่างทั่วไป20 ตัวอย่างของต่าง ได้แก่ ยาที่มีฤทธิ์ก่อกลายพันธุ์และ
รังสีอัลตราไวโอเลต . ตัวอย่างของยาที่มีฤทธิ์ก่อกลายพันธุ์ซึ่งประกอบด้วยนิวคลีโอไทด์เบสเช่น streptomycin ออฟลอกซาซินเอทิลมีเทนซัลโฟเนต
, , , และ n-methyl-n ' - nitro-N-nitrosoguanidine และ bromouracil และผักหวาน .
[ ]
0025 25 ถัดไปกลุ่มก้อนของวิธีเพื่อผลิตโพลีแซคคาไรด์ตามการการประดิษฐ์นี้อธิบาย .
[ ]
0026 ไปตามวิธีเพื่อผลิตโพลีแซคคาไรด์นี้
30 รวมอย่างน้อยโพลีแซคคาไรด์ผลิตโดยการเพาะเลี้ยงไมโครแอลจี
ของจีนัสยูกลีนา .การวิธีเพื่อผลิตโพลีแซคคาไรด์ของตนมีผลช่วยให้โพลีแซคคาไรด์จะเพียงพอได้ 0027
[ ]
โดยเฉพาะ วิธีเพื่อผลิตโพลีแซคคาไรด์นี้
5 รวม รวมถึงวัฒนธรรม ขั้นตอนของการเพาะเลี้ยงไมโครแอลจีของจีนัส
ยูกลีนาในบรอธที่มีอย่างน้อยน้ำ
.[ 0028 ]
บรอธควรประกอบด้วยน้ำและสารอาหารที่ส่งเสริมการเจริญเติบโตของไมโครแอลจี .
[ ]
0029 10 ตัวอย่างของสารอาหารที่ประกอบด้วยสารอาหารอนินทรีย์และอินทรีย์สารอาหาร 0030
[ ]
ตัวอย่างของสารอาหารอนินทรีย์ ได้แก่ nitrogen-containing
15 ในสารประกอบอินทรีย์และฟอสฟอรัส ที่มีในสารประกอบอินทรีย์ S .
เพิ่มเติมตัวอย่างของสารอาหารอนินทรีย์ ได้แก่โพแทสเซียมไอออนไอออนเหล็ก
แมงกานีสไอออนโคบอลต์ไอออนของสังกะสีไอออน , ไอออนทองแดงและนิกเกิลโมลิบดีนัม , ไอออน , ไอออน
ความเข้มข้นของสารอาหารอนินทรีย์ในบรอธทั่วไปเกี่ยวกับระดับที่รู้จักกันทั่วไป .
[ ]
0031 20 ตัวอย่างของสารอาหารอินทรีย์ประกอบด้วยโมโนแซ็กคาไรด์เช่น
กลูโคสและฟรุคโตส
ของจีนัสยูกลีนาถูกระบุจากอธิบายในภายหลังในผล
30 ตัวอย่างเป็นยูกลีนา glandulifera และชื่อยูกลีนา glandulifera eod-1 สายพันธุ์
ยูกลีนา glandulifera เมื่อย eod-1 ได้รับสิทธิบัตรสิ่งมีชีวิต ซึ่งในต่างประเทศฝาก
,สถาบันเทคโนโลยีและการประเมินผล ( nite-ipod
: 2-5-8-120 kazusakamatari Kisarazu , ชิบะ ,
292-0818 ญี่ปุ่น ) วันที่ 28 มิถุนายน 2556 ( ฉบับวันที่ฝากเงิน : 25 มีนาคม 2556 ) เป็น 5 ชนิดไม่ มี bp-11530 ภายใต้บทบัญญัติของสนธิสัญญากรุงบูดาเปส
[ ]
0023 ตามที่ได้รับการอธิบายข้างต้น ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนามีคลอโรพลาสต์ในเซลล์ของพวกเขาและดังนั้นจึงสามารถเติบโตได้โดยการสังเคราะห์แสง นั่นคือ ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาเป็น photoautotrophs .
10 เพิ่มเติม ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาสามารถเติบโตได้โดยใช้
รังอินทรีย์เช่นกลูโคส เป็นสารอาหารของพวกเขา นั่นคือ ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนายัง heterotrophs .
ในวิธีนี้การไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาสามารถเจริญเติบโตโดยเฉพาะ
photoautotrophy สามารถเติบโตเท่านั้น โดย heterotrophy หรือสามารถเติบโตพร้อมกัน 15 และ photoautotrophy heterotrophy .
[ ]
0024 สายพันธุ์กลายที่ผลิต เช่น การใช้กระบวนการของการปรับตัวโดยทั่วไป
วัฒนธรรมย่อย หรือการกลายพันธุ์ตามธรรมชาติ
กระบวนการกลายพันธุ์สามารถดําเนินการต่างทั่วไป20 ตัวอย่างของต่าง ได้แก่ ยาที่มีฤทธิ์ก่อกลายพันธุ์และ
รังสีอัลตราไวโอเลต . ตัวอย่างของยาที่มีฤทธิ์ก่อกลายพันธุ์ซึ่งประกอบด้วยนิวคลีโอไทด์เบสเช่น streptomycin ออฟลอกซาซินเอทิลมีเทนซัลโฟเนต
, , , และ n-methyl-n ' - nitro-N-nitrosoguanidine และ bromouracil และผักหวาน .
[ ]
0025 25 ถัดไปกลุ่มก้อนของวิธีเพื่อผลิตโพลีแซคคาไรด์ตามการการประดิษฐ์นี้อธิบาย .
[ ]
0026 ไปตามวิธีเพื่อผลิตโพลีแซคคาไรด์นี้
30 รวมอย่างน้อยโพลีแซคคาไรด์ผลิตโดยการเพาะเลี้ยงไมโครแอลจี
ของจีนัสยูกลีนา .การวิธีเพื่อผลิตโพลีแซคคาไรด์ของตนมีผลช่วยให้โพลีแซคคาไรด์จะเพียงพอได้ 0027
[ ]
โดยเฉพาะ วิธีเพื่อผลิตโพลีแซคคาไรด์นี้
5 รวม รวมถึงวัฒนธรรม ขั้นตอนของการเพาะเลี้ยงไมโครแอลจีของจีนัส
ยูกลีนาในบรอธที่มีอย่างน้อยน้ำ
.[ 0028 ]
บรอธควรประกอบด้วยน้ำและสารอาหารที่ส่งเสริมการเจริญเติบโตของไมโครแอลจี .
[ ]
0029 10 ตัวอย่างของสารอาหารที่ประกอบด้วยสารอาหารอนินทรีย์และอินทรีย์สารอาหาร 0030
[ ]
ตัวอย่างของสารอาหารอนินทรีย์ ได้แก่ nitrogen-containing
15 ในสารประกอบอินทรีย์และฟอสฟอรัส ที่มีในสารประกอบอินทรีย์ S .
เพิ่มเติมตัวอย่างของสารอาหารอนินทรีย์ ได้แก่โพแทสเซียมไอออนไอออนเหล็ก
แมงกานีสไอออนโคบอลต์ไอออนของสังกะสีไอออน , ไอออนทองแดงและนิกเกิลโมลิบดีนัม , ไอออน , ไอออน
ความเข้มข้นของสารอาหารอนินทรีย์ในบรอธทั่วไปเกี่ยวกับระดับที่รู้จักกันทั่วไป .
[ ]
0031 20 ตัวอย่างของสารอาหารอินทรีย์ประกอบด้วยโมโนแซ็กคาไรด์เช่น
กลูโคสและฟรุคโตส
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- ฉันชอบเล่นเกม
- และข้อมูลจะถูกส่งต่อไปยังครื่องประมวลผลแ
- if someone confronts you over ideas or i
- แม้ในฉากนั้นจะไม่มีบทพูดเลยก็ตาม
- cerebral salt wasting
- ครอบครัวฉันมีความสุข
- จงเลือกคำที่มีความหมายแตกต่างกับคำอื่น
- ไม่เมาแต่ไม่เหมือนเดิม
- Your pictures are real? new pictures?
- จึงเป็นที่มาของคำว่า
- ไนท์
- Breaking bad idea this now and right now
- ชั่วโมงแรกของเช้านี้กรุณาวาง 08 จนกว่า5q
- cerebral salt wasting(
- inquiries
- of all copd cases are non-smoker
- นักศึกษา
- Eurolive has notified us about network i
- โดย
- Steaks, Beef 3-5 days 6-12 monthsChops,
- Age as rai
- They searched for about 30 minutes, but
- Breaking bad idea this now.
- They searched for about 30 minutes, but
