Using the technique as described above, the aforementioned ไมโครแอลจี
of the จีนัส ยูกลีนา were identified from the later-described results in
30 EXAMPLES as ยูกลีนา gracilis and named ยูกลีนา gracilis strain EOD-1.
The ยูกลีนา gracilis strain EOD-1 has been internationally deposited
in Patent Organism Depositary, National Institute of Technology and
Evaluation (NITE-IPOD: 2-5-8-120 Kazusakamatari, Kisarazu, Chiba
292-0818 Japan) on June 28, 2013 (Original date of deposit: March 25, 2013) as 5 Accession No. FERM BP-11530 under the provisions of the Budapest Treaty.
[0023]
As has been described above, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา have chloroplasts in their cells, and therefore can grow by photosynthesis. That is, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา are photoautotrophs.
10 Further, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา can grow also by using
organic nutrients such as glucose as their nutrients. That is, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา are also heterotrophs.
In this way, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา can grow only by
photoautotrophy, can grow only by heterotrophy, or can grow by concurrent 15 photoautotrophy and heterotrophy.
[0024]
The mutant strain is produced, for example, by applying a common
mutation process, adaptation by subculture, or natural mutation.
The mutation process can be performed using common mutagens. 20 Examples of the mutagens include drugs having mutagenic activity and
ultraviolet rays. Examples of the drugs having mutagenic activity include nucleotide base analogs such as streptomycin, ofloxacin, ethyl methane
sulfonate, and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine, and bromouracil, and acridines.
25 [0025]
Next, an embodiment of the วิธีเพื่อผลิต โพลีแซคคาไรด์ according to the การประดิษฐ์นี้ is described.
[0026]
According to the วิธีเพื่อผลิต โพลีแซคคาไรด์ of this
30 embodiment, at least โพลีแซคคาไรด์ are produced by culturing the ไมโครแอลจี
of the จีนัส ยูกลีนา.
The วิธีเพื่อผลิต โพลีแซคคาไรด์ of this embodiment has an effect of enabling โพลีแซคคาไรด์ to be sufficiently obtained.
[0027]
Specifically, the วิธีเพื่อผลิต โพลีแซคคาไรด์ of this
5 embodiment includes a culture step of culturing the ไมโครแอลจี of the จีนัส
ยูกลีนา in a บรอธ containing at least water.
[0028]
The บรอธ preferably contains water and nutrients that promote the growth of the ไมโครแอลจี.
10 [0029]
Examples of the nutrients include inorganic nutrients and organic nutrients.
[0030]
Examples of the inorganic nutrients include nitrogen-containing
15 inสารประกอบอินทรีย์s and phosphorus-containing inสารประกอบอินทรีย์s.
Further, examples of the inorganic nutrients include potassium ion, iron ion,
manganese ion, cobalt ion, zinc ion, copper ion, molybdenum ion, and nickel ion.
The concentration of the inorganic nutrients in the บรอธ is generally about a concentration that is commonly known.
20 [0031]
Examples of the organic nutrients include monosaccharides such as
glucose and fructose, vitamins such as vitamins B6 and B12, amino acids such as arginine, aspartic acid, glutamic acid, glycine, and histidine, organic acids such as malic acid, citric acid, succinic acid, and acetic acid, and alcohols such as
25 ethanol.
[0032]
Examples of the composition of the บรอธ to be employed include the
composition of "AF-6 อาหารเพาะเลี้ยง", the composition of "Cramer-Myers
อาหารเพาะเลี้ยง", the composition of "Hutner อาหารเพาะเลี้ยง", which will be 30 described below, or a composition similar to these compositions.
In the culture step, the บรอธ preferably contains 15 to 30 g/L of glucose as a carbon source. Further, the บรอธ preferably contains yeast ไลเซต (which will be described below). Further, the บรอธ preferably has the composition of the AF6 อาหารเพาะเลี้ยง.
5 [0034]
The culture step can be carried out, for example, in a bath containing a mixture of the aforementioned บรอธ and the ไมโครแอลจี.
[0035]
In the culture step, photosynthesis of the ไมโครแอลจี can be caused by 10 irradiating the ไมโครแอลจี with light. That is, in the culture step,
photoautotrophic culture can be performed.
When the ไมโครแอลจี are irradiated with light in the culture step, the
ไมโครแอลจี introduce carbon dioxide into their cells by photosynthesis, and can
grow while producing at least โพลีแซคคาไรด์ such as พาราไมลัม. Further, 15 the ไมโครแอลจี can grow while producing proteins and secondary metabolites
such as ไลปิด, pigments, and vitamins.
[0036]
The light with which the ไมโครแอลจี are irradiated in the culture step is
not specifically limited as long as it causes photosynthesis of the ไมโครแอลจี. 20 As the light, natural light from the sun or artificial light such as illumination is,
for example, employed.
[0037]
The intensity of the light irradiation in the photoautotrophic culture
step is not specifically limited, but is generally 50 innol/m2•s to 200 pmol/m2•s.
25 [0038]
In the culture step, a period during which the ไมโครแอลจี are irradiated with light and a period during which the ไมโครแอลจี are not irradiated with light can be alternately repeated.
That is, a period during which photoautotrophic culture is performed 30 and a period during which photoautotrophic culture is not performed can be
alternately repeated in the culture step.
[0039]
The period of the light irradiation in the culture step is generally 8
hours to 15 hours, which is equivalent to daytime during which sunlight shines.
Further, the period of dark conditions during which the light irradiation is not 5 performed for inhibiting the photosynthesis of the ไมโครแอลจี is generally 9
hours to 16 hours, which is equivalent to night-time during which sunlight does
not shine. These periods can be changed depending on the situation or the
purpose.
The dark conditions in which the light irradiation is not performed are 10 the conditions in which the photosynthetic photon flux density (PPFD) is 50
pmol/m2•s or less.
[0040]
Meanwhile, heterotrophic culture in which the ไมโครแอลจี are cultured
in the presence of the organic nutrients included in the aforementioned
15 nutrients can be carried out in the culture step. When the ไมโครแอลจี are
cultured in the presence of the organic nutrients in the culture step, the
ไมโครแอลจี introduce the organic nutrients into their cells, and can grow while
producing at least โพลีแซคคาไรด์ such as พาราไมลัม.
[0041]
20 That is, at least one of photoautotrophic culture and heterotrophic
culture can be performed in the culture step.
It is preferable that both of the photoautotrophic culture and
heterotrophic culture be performed in the culture step at the same time, in that
the growth of the ไมโครแอลจี can be further promoted. That is, it is preferable 25 that photoheterotrophic culture be performed in the culture step.
[0042]
It is preferable to employ, as the organic nutrients used in the
heterotrophic culture and photoheterotrophic culture, alcohols such as ethanol,
monosaccharides such as glucose and fructose, or wastes containing these
30 components that can be used by the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา, for
example. Further, it is preferable that yeast or yeast ไลเซต (hereinafter,
referred to also as yeast extract) be used in combination as the organic
nutrients, in that the growth of the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา can be more reliably promoted.
การใช้เทคนิคตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ไมโครแอลจีดังกล่าว ของจีนัสยูกลีนาได้ระบุจากผลภายหลังได้อธิบายไว้ใน ตัวอย่าง 30 ยูกลีนาจระเข้และจระเข้ยูกลีนาตั้งชื่อสายพันธุ์ EOD-1 สายพันธุ์จระเข้ยูกลีนา EOD-1 ได้รับฝากไว้ในต่างประเทศ ในสิทธิบัตรสิ่งมีชีวิต Depositary สถาบันเทคโนโลยี และ ประเมิน (ไนท์ IPOD: 2-5-8-120 Kazusakamatari, Kisarazu ชิบะ 292-0818 ญี่ปุ่น) บน 28 มิถุนายน 2013 (ฝากต้นฉบับวัน: 25 มีนาคม 2013) เป็นหมายเลขทะเบียน 5 FERM BP-11530 ภายใต้บทบัญญัติของสนธิสัญญาบูดาเปส [0023]มีการอธิบายไว้ข้างต้น ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนามี chloroplasts ในเซลล์ และดังนั้นจึง สามารถเจริญเติบโต โดยการสังเคราะห์ด้วยแสง นั่นคือ ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาได้ photoautotrophsต่อ 10 ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาสามารถเจริญเติบโตยังโดยสารอาหารอินทรีย์เช่นน้ำตาลกลูโคสเป็นสารอาหารของพวกเขา นั่นคือ ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาได้ยัง heterotrophsด้วยวิธีนี้ ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาสามารถเจริญเติบโตโดยเฉพาะ photoautotrophy สามารถขยายเฉพาะ heterotrophy หรือสามารถขยาย 15 พร้อมกัน photoautotrophy และ heterotrophy[0024]สายพันธุ์กลายพันธุ์ผลิต เช่น โดยใช้ร่วมกับ กระบวนการกลายพันธุ์ ปรับวัฒนธรรม หรือการกลายพันธุ์ตามธรรมชาติ การกลายพันธุ์สามารถทำได้โดยใช้ mutagens ทั่วไป ตัวอย่าง 20 ของ mutagens นี้ได้แก่ยาเสพติดที่มีกิจกรรม mutagenic และรังสีอัลตราไวโอเลต ตัวอย่างของยาเสพติดมีกิจกรรม mutagenic ได้แก่นิวคลีโอไทด์ analogs พื้นฐานเช่น streptomycin, ofloxacin มีเทนเอทิล sulfonate, N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine และ bromouracil และ acridines ด้วย25 [0025]ถัดไป การลื่นโพลีแซคคาไรด์วิธีเพื่อผลิตตามการประดิษฐ์นี้ได้อธิบายไว้[0026]ตามโพลีแซคคาไรด์วิธีเพื่อผลิตนี้30 ลื่น น้อยผลิต โดย culturing ไมโครแอลจีโพลีแซคคาไรด์ของยูกลีนาจีนัสโพลีแซคคาไรด์วิธีเพื่อผลิตของลื่นนี้มีผลกระทบของการเปิดใช้งานโพลีแซคคาไรด์ที่ได้รับเพียงพอ [0027]โดยเฉพาะ โพลีแซคคาไรด์วิธีเพื่อผลิตนี้ขั้นวัฒนธรรม culturing ไมโครแอลจีของจีนัสมีลื่น 5ยูกลีนาในบรอธที่ประกอบด้วยน้ำน้อย[0028]The บรอธ preferably contains water and nutrients that promote the growth of the ไมโครแอลจี.10 [0029]Examples of the nutrients include inorganic nutrients and organic nutrients.[0030]Examples of the inorganic nutrients include nitrogen-containing15 inสารประกอบอินทรีย์s and phosphorus-containing inสารประกอบอินทรีย์s.Further, examples of the inorganic nutrients include potassium ion, iron ion,manganese ion, cobalt ion, zinc ion, copper ion, molybdenum ion, and nickel ion. The concentration of the inorganic nutrients in the บรอธ is generally about a concentration that is commonly known.20 [0031]Examples of the organic nutrients include monosaccharides such asglucose and fructose, vitamins such as vitamins B6 and B12, amino acids such as arginine, aspartic acid, glutamic acid, glycine, and histidine, organic acids such as malic acid, citric acid, succinic acid, and acetic acid, and alcohols such as25 ethanol.[0032]Examples of the composition of the บรอธ to be employed include the composition of "AF-6 อาหารเพาะเลี้ยง", the composition of "Cramer-Myers อาหารเพาะเลี้ยง", the composition of "Hutner อาหารเพาะเลี้ยง", which will be 30 described below, or a composition similar to these compositions. In the culture step, the บรอธ preferably contains 15 to 30 g/L of glucose as a carbon source. Further, the บรอธ preferably contains yeast ไลเซต (which will be described below). Further, the บรอธ preferably has the composition of the AF6 อาหารเพาะเลี้ยง.5 [0034]The culture step can be carried out, for example, in a bath containing a mixture of the aforementioned บรอธ and the ไมโครแอลจี. [0035]In the culture step, photosynthesis of the ไมโครแอลจี can be caused by 10 irradiating the ไมโครแอลจี with light. That is, in the culture step, photoautotrophic culture can be performed.When the ไมโครแอลจี are irradiated with light in the culture step, the ไมโครแอลจี introduce carbon dioxide into their cells by photosynthesis, and can grow while producing at least โพลีแซคคาไรด์ such as พาราไมลัม. Further, 15 the ไมโครแอลจี can grow while producing proteins and secondary metabolites such as ไลปิด, pigments, and vitamins.[0036]The light with which the ไมโครแอลจี are irradiated in the culture step is not specifically limited as long as it causes photosynthesis of the ไมโครแอลจี. 20 As the light, natural light from the sun or artificial light such as illumination is, for example, employed.
[0037]
The intensity of the light irradiation in the photoautotrophic culture
step is not specifically limited, but is generally 50 innol/m2•s to 200 pmol/m2•s.
25 [0038]
In the culture step, a period during which the ไมโครแอลจี are irradiated with light and a period during which the ไมโครแอลจี are not irradiated with light can be alternately repeated.
That is, a period during which photoautotrophic culture is performed 30 and a period during which photoautotrophic culture is not performed can be
alternately repeated in the culture step.
[0039]
The period of the light irradiation in the culture step is generally 8
hours to 15 hours, which is equivalent to daytime during which sunlight shines.
Further, the period of dark conditions during which the light irradiation is not 5 performed for inhibiting the photosynthesis of the ไมโครแอลจี is generally 9
hours to 16 hours, which is equivalent to night-time during which sunlight does
not shine. These periods can be changed depending on the situation or the
purpose.
The dark conditions in which the light irradiation is not performed are 10 the conditions in which the photosynthetic photon flux density (PPFD) is 50
pmol/m2•s or less.
[0040]
Meanwhile, heterotrophic culture in which the ไมโครแอลจี are cultured
in the presence of the organic nutrients included in the aforementioned
15 nutrients can be carried out in the culture step. When the ไมโครแอลจี are
cultured in the presence of the organic nutrients in the culture step, the
ไมโครแอลจี introduce the organic nutrients into their cells, and can grow while
producing at least โพลีแซคคาไรด์ such as พาราไมลัม.
[0041]
20 That is, at least one of photoautotrophic culture and heterotrophic
culture can be performed in the culture step.
It is preferable that both of the photoautotrophic culture and
heterotrophic culture be performed in the culture step at the same time, in that
the growth of the ไมโครแอลจี can be further promoted. That is, it is preferable 25 that photoheterotrophic culture be performed in the culture step.
[0042]
It is preferable to employ, as the organic nutrients used in the
heterotrophic culture and photoheterotrophic culture, alcohols such as ethanol,
monosaccharides such as glucose and fructose, or wastes containing these
30 components that can be used by the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา, for
example. Further, it is preferable that yeast or yeast ไลเซต (hereinafter,
referred to also as yeast extract) be used in combination as the organic
nutrients, in that the growth of the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา can be more reliably promoted.
การแปล กรุณารอสักครู่..