The pTet2-GWPT plasmid (Fig. 1), a retrovirus vector plasmid
designed to express the green fluorescent protein (GFP) gene under
the control of the tetracycline promoter, was constructed by modification of the pGWRT plasmid described previously[11]. The TREtight fragment, a modified version of the tetracycline response
element (TRE) sequence, was derived from pTRE-Tight (Clontech,
Palo Alto, CA). TheGFPgene from pEGFP-N1 was purchased from
Clontech. The mouse phosphoglycerate kinase (PGK) promoter
(509 bp) for the expression of the rtTA2
s
M2 transactivator[8,12]
was prepared by PCR. At the 30
end of the GFP sequence, the woodchuck hepatitis virus post-transcriptional regulatory element
(WPRE)[9,10]was introduced to increaseGFPexpression
The pTet2-GWPT plasmid (Fig. 1), a retrovirus vector plasmiddesigned to express the green fluorescent protein (GFP) gene underthe control of the tetracycline promoter, was constructed by modification of the pGWRT plasmid described previously[11]. The TREtight fragment, a modified version of the tetracycline responseelement (TRE) sequence, was derived from pTRE-Tight (Clontech,Palo Alto, CA). TheGFPgene from pEGFP-N1 was purchased fromClontech. The mouse phosphoglycerate kinase (PGK) promoter(509 bp) for the expression of the rtTA2sM2 transactivator[8,12]was prepared by PCR. At the 30end of the GFP sequence, the woodchuck hepatitis virus post-transcriptional regulatory element(WPRE)[9,10]was introduced to increaseGFPexpression
การแปล กรุณารอสักครู่..
พลาสมิด pTet2-GWPT (รูปที่ 1)., พลาสมิด retrovirus เวกเตอร์
ที่ออกแบบมาเพื่อแสดงความโปรตีนเรืองแสงสีเขียว (GFP) ยีนภายใต้
การควบคุมของผู้ก่อการยาที่ถูกสร้างขึ้นโดยการปรับเปลี่ยนของพลาสมิด pGWRT อธิบายไว้ก่อนหน้า [11] ส่วน TREtight, รุ่นล่าสุดของการตอบสนอง tetracycline
องค์ประกอบ (TRE) ลำดับที่ได้รับจาก pTRE แน่น (Clontech,
พาโลอัลโต) TheGFPgene จาก pEGFP-N1 ซื้อจาก
Clontech ไคเนส phosphoglycerate เมาส์ (PGK) ผู้ก่อการ
(509 bp) สำหรับการแสดงออกของ rtTA2
s
M2 transactivator [8,12]
ถูกจัดทำขึ้นโดยวิธี PCR ตอนที่ 30
ตอนท้ายของลำดับ GFP, ไวรัสตับอักเสบ WOODCHUCK องค์ประกอบการกำกับดูแลหลังการถอดรหัส
(WPRE) [9,10] ได้รับการแนะนำให้รู้จักกับ increaseGFPexpression
การแปล กรุณารอสักครู่..
การ ptet2 gwpt พลาสมิด ( รูปที่ 1 ) เป็น plasmid เวกเตอร์รีโทรไวรัส
ออกแบบมาเพื่อแสดงออกโปรตีนเรืองแสงสีเขียว ( GFP ) ยีนภายใต้
การควบคุมของ tetracycline promoter , ถูกสร้างขึ้นโดยการปรับเปลี่ยนของ pgwrt พลาสมิดที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 11 ] การ tretight ชิ้น , รุ่นการแก้ไขของ tetracycline ตอบสนอง
องค์ประกอบ ( Tre ) ลำดับได้มาจาก ptre คับ ( clontech
, พาโลอัลโต , แคลิฟอร์เนีย )thegfpgene จาก pegfp-n1 ซื้อมาจาก
clontech . เมาส์ phosphoglycerate ไคเนส ( PGK ) โปรโมเตอร์
( 509 BP ) สำหรับการแสดงออกของ rtta2
s
[ ]
8 M2 transactivator เตรียมโดย PCR ที่ 30
สิ้นสุดของ GFP ลําดับ , ไวรัสตับอักเสบ Woodchuck โพสต์ลององค์ประกอบกฎระเบียบ
( wpre ) [ 9,10 ] แนะนำ increasegfpexpression
การแปล กรุณารอสักครู่..