AnalysisMeasurement of low molecula

Analysis
Measurement of low molecular weight organic
compounds
The concentrations of citrate and malate in the treatment
medium were measured using the enzymatic method of
Mollering (1985). For malate, 0.1mL of sample was
incubated with 1.0mL of buffer (0.1M 3-amino-1-
propanol, pH 10) and 0.2mL of 27mM NAD. The
reaction mixture was pre-incubated to obtain a stable
absorbance at 340nm (A340) before the addition of 5 mL
of malate dehydrogenase (1000UmL1, Oriental Yeast,
Japan). The increase in A340 values due to the production
of NADH was measured using a spectrophotometer (UV
mini 1240, Shimadzu, Japan); any increase in NADH
concentration is directly proportional to the amount of
malic acid in the sample. For citrate, 0.2mL of sample
was incubated with 1.0mL of buffer (0.5M glycylglycine-
NaOH), 0.1mL of 10mM NADH and 20 mL
of 600UmL1 malate dehydrogenase containing
1200UmL1 lactate dehydrogenase. Once a stable
absorbance reading was obtained, 20 mL of citrate lyase
(40UmL1, Oriental Yeast, Japan) was added to the
reaction mixture and a decrease in absorbance at A340
was observed due to oxidation of NADH. The decrease
in the NADH concentration was directly proportional to
the amount of citric acid in the sample. Al in the samples
did not interfere with the malic and citric acid assays
because the concentrations of these two acids, tested
separately by adding known amounts of these acids to
the mixture, were similar regardless of the presence of Al.
The concentration of oxalate in the medium was
analyzed using an ion chromatograph (DX-300IC 500S,
Dionex, Sunnyvale, CA) equipped with a guard column
[IonPac AG4A-SC (450 mM)] and an analysis column
[IonPac AS4-SC (4250 mM)] (Ma and Miyasaka
1998).
The concentrations of catechins and caffeine in the
media were determined by HPLC (SCL-10Avp,
Shimadzu, Japan) according to the method of
Goto et al. (1996), using a standard containing
(þ)-catechin (C), gallocatechin (GC), epigallocatechin
(EGC), epigallocatechin gallate (EGCg), epicatechin
(EC), gallocatechin gallate (GCg), epicatechin gallate
(ECg), catechin gallate (Cg), gallic acid (GA), quercetin
and caffeine.
Measurement of Al content in plant materials
The amount of Al in the shoots and roots of tea seedlings
was determined using an atomic absorption spectrometer
with a graphite furnace (Spectra AA with Zeeman
correction, Varian, Australia) after digestion with
HNO3 : HClO4 (1 : 1 v/v).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การวิเคราะห์วัดน้ำหนักโมเลกุลต่ำอินทรีย์สารประกอบความเข้มข้นของซิเตรตและมาลาในการบำบัดรักษากลางถูกวัดโดยใช้วิธีการเอนไซม์ในระบบMollering (1985) ในมาลาเต 0.1 มล.ของตัวอย่างได้incubated กับ 1.0mL บัฟเฟอร์ (0.1M 3-อะมิโน - 1 -อย่างไร propanol ค่า pH 10) และ 0.2 mL 27 มม.และ ที่ส่วนผสมของปฏิกิริยาเป็น incubated ก่อนรับเป็นคอกabsorbance ที่ 340nm (A340) ก่อนการเพิ่ม 5 mLของมาลา dehydrogenase (1000UmL 1 โอเรียนทัลยีสต์ญี่ปุ่น) การเพิ่มขึ้นของค่า A340 เนื่องจากการผลิตของ NADH ถูกวัดโดยใช้เครื่องทดสอบกรดด่าง (UVมินิ 1240, Shimadzu ญี่ปุ่น); มีการเพิ่มใน NADHความเข้มข้นเป็นสัดส่วนโดยตรงกับจำนวนกรด malic ในตัวอย่าง สำหรับซิเตรต 0.2 มล.ของตัวอย่างมี incubated กับ 1.0mL บัฟเฟอร์ (0.5M glycylglycine-NaOH), 0.1 mL ของ NADH 10 มม.และ 20 mL600UmL มาลา 1 dehydrogenase บรรจุ1200UmL 1 lactate dehydrogenase คอกครั้งอ่าน absorbance กล่าว 20 mL ของ lyase ซิเตรต(40UmL 1 โอเรียนทัลยีสต์ ญี่ปุ่น) ถูกเพิ่มไปส่วนผสมของปฏิกิริยาและการลดลงใน absorbance ที่ A340สังเกตได้จากออกซิเดชันของ NADH ลดลงใน NADH ความเข้มข้นเป็นสัดส่วนโดยตรงกับจำนวนกรดซิตริกในตัวอย่าง อัลในตัวอย่างไม่สามารถรบกวน assays malic และกรดซิตริกเนื่องจากความเข้มข้นของกรดเหล่านี้สอง ทดสอบแยก โดยการเพิ่มจำนวนกรดเหล่านี้จะรู้จักส่วนผสม ถูกเหมือนกันว่าของอัลมีความเข้มข้นของออกซาเลตในสื่อวิเคราะห์โดยใช้การ chromatograph ไอออน (DX-300IC 500SDionex, Sunnyvale, CA) พร้อมคอลัมน์ยาม[IonPac AG4A SC (4 มม. 50)] และมีคอลัมน์การวิเคราะห์[IonPac AS4-SC (4 มม. 250)] (Ma และ Miyasaka1998)ความเข้มข้นของ catechins และคาเฟอีนในการสื่อถูกกำหนด โดย HPLC (SCL-10AvpShimadzu ญี่ปุ่น) ตามวิธีของไปร้อยเอ็ด al. (1996), โดยใช้มาตรฐานประกอบด้วย(þ) -สารสกัดจาก (C), gallocatechin (GC), epigallocatechin(EGC), epigallocatechin gallate (EGCg), epicatechin(EC), gallocatechin gallate (GCg), epicatechin gallate(ECg), สารสกัดจาก gallate (Cg), กรด gallic (GA) quercetinและคาเฟอีนวัดอัลเนื้อหาวัสดุโรงงานจำนวนอัลยอดและรากของกล้าไม้ชากำหนดโดยใช้สเปกโตรมิเตอร์ดูดกลืนโดยอะตอมมีเตาเผาแกรไฟต์ (แรมสเป็คตรา AA Zeemanการแก้ไข แล้วแต่กำหนด ออสเตรเลีย) หลังจากย่อยอาหารด้วยHNO3: HClO4 (1:1 v/v)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การวิเคราะห์
การวัดน้ำหนักโมเลกุลต่ำอินทรีย์
สารที่
ความเข้มข้นของซิเตรตและมาเลตในการรักษา
กลางถูกวัดโดยใช้วิธีการของเอนไซม์ของ
Mollering (1985) สำหรับ malate, 0.1ml ของกลุ่มตัวอย่างได้รับการ
บ่มกับ 1.0ml ของบัฟเฟอร์ (0.1M 3 อะมิโน 1-
โพรพานพีเอช 10) 0.2ml และ 27 มม NAD
ผสมปฏิกิริยาถูกบ่มก่อนที่จะได้รับมีเสถียรภาพ
ดูดกลืนแสงที่ 340nm (A340) ก่อนนอกจากนี้จาก 5 มิลลิลิตร
ของ malate dehydrogenase (1000UmL? 1, ยีสต์ตะวันออก,
ญี่ปุ่น) การเพิ่มขึ้นของค่า A340 เนื่องจากการผลิต
ของ NADH ถูกวัดโดยใช้สเปก (UV
มินิ 1240, Shimadzu, ญี่ปุ่น); เพิ่มขึ้นใน NADH
เข้มข้นเป็นสัดส่วนโดยตรงกับปริมาณของ
กรดในตัวอย่าง สำหรับซิเตรต, 0.2ml ของกลุ่มตัวอย่าง
ถูกบ่มกับ 1.0ml ของบัฟเฟอร์ (0.5M glycylglycine-
NaOH) 0.1ml 10 มม NADH และ 20 มิลลิลิตร
ของ 600UmL 1 malate dehydrogenase มี
1200UmL 1 นม dehydrogenase เมื่อมีความมั่นคง
ในการอ่านการดูดกลืนแสงที่ได้รับ, 20 มลไอเลซิเตรต
(40UmL? 1, ยีสต์ตะวันออก, ญี่ปุ่น) ได้ถูกเพิ่มเข้าไป
ผสมปฏิกิริยาและการลดลงของการดูดกลืนแสงที่ A340
ก็สังเกตเห็นเนื่องจากการเกิดออกซิเดชันของ NADH ลดลง
ในความเข้มข้น NADH เป็นสัดส่วนโดยตรงกับ
ปริมาณของกรดซิตริกในตัวอย่าง อัลในตัวอย่าง
ไม่ได้ยุ่งเกี่ยวกับการตรวจกรดซิตริกและ
เพราะความเข้มข้นของทั้งสองกรดทดสอบ
แยกโดยการเพิ่มจำนวนเงินที่เป็นที่รู้จักกันของกรดเหล่านี้เพื่อ
ผสม, มีความคล้ายคลึงกันโดยไม่คำนึงถึงการปรากฏตัวของอัล.
ความเข้มข้นของออกซาเลตใน ขนาดกลางได้รับการ
วิเคราะห์โดยใช้ Chromatograph ไอออน (DX-300IC 500S,
Dionex, ซันนีเวล, แคลิฟอร์เนีย) พร้อมกับคอลัมน์ยาม
[IonPac AG4A-SC (4? 50 มิลลิเมตร)] และคอลัมน์วิเคราะห์
[IonPac AS4-SC (4? 250 มิลลิเมตร )] (Ma และ Miyasaka
1998).
ความเข้มข้นของ catechins และคาเฟอีนใน
สื่อที่ถูกกำหนดโดยวิธี HPLC (SCL- 10Avp,
Shimadzu, ญี่ปุ่น) ตามวิธีการของ
ก่อนและคณะ (1996) โดยใช้มาตรฐานที่มี
(ไทย) -catechin (C), gallocatechin (GC) epigallocatechin
(EGC), สาร epigallocatechin gallate (EGCg), epicatechin
(EU), gallocatechin gallate (GCg), epicatechin gallate
(ECG) catechin gallate (Cg), กรดแกลลิ (GA) quercetin
และคาเฟอีน.
วัดของเนื้อหาอัลในวัสดุพืช
ปริมาณของอัลในใบและรากของต้นกล้าชา
ถูกกำหนดโดยใช้สเปกโตรมิเตอร์ดูดซึมอะตอม
กับเตากราไฟท์ (Spectra AA กับ Zeeman
แก้ไข Varian, ออสเตรเลีย) หลังจากการย่อยด้วย
HNO3: HClO4 (1: 1 v / v)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวัดการวิเคราะห์น้ำหนักโมเลกุลต่ำ


ความเข้มข้นของอินทรีย์สารซิเตรตและ malate ) ในการรักษา
ถูกวัดโดยใช้เอนไซม์ของ
mollering ( 1985 ) สำหรับ Malate 0.1ml , ตัวอย่างถูกบ่มกับ 1.0ml ของบัฟเฟอร์ (
-
0.1m 3-amino-1 โพรพานอล , pH 10 ) และ 0.2ml ของ NAD 27mm .
ปฏิกิริยาผสมก่อนบ่มให้ได้มั่นคง
การดูดกลืนแสงที่ 340nm ( a340 ) ก่อนที่จะเพิ่ม 5 ml
ของ malate dehydrogenase ( 1000uml  1 ตะวันออกยีสต์
ญี่ปุ่น ) เพิ่มค่า a340 เนื่องจากการผลิต
ของ NADH คือการวัดโดยใช้เครื่อง UV
มินิ 1240 Shimadzu ญี่ปุ่น , ) ; เพิ่มความเข้มข้นในการใด ๆที่เป็น
เป็นสัดส่วนโดยตรงกับปริมาณของ
กรดมาลิกในตัวอย่าง สำหรับซิเตรต 0.2ml ตัวอย่าง
ถูกบ่มกับ 10ml ของบัฟเฟอร์ ( 0.5 glycylglycine -
NaOH ) 0.1ml ของ NADH และ 10mm 20 ml
ของ 600uml  1 malate dehydrogenase lactate dehydrogenase 
1200uml ประกอบด้วย 1 . เมื่ออ่านค่ามั่นคง
ได้ 20 ml ของซิเตรท ไลเ
( 40uml  1 , ยีสต์ , ตะวันออกญี่ปุ่น ) ถูกเพิ่มไปยัง
ปฏิกิริยาผสมและการลดลงของค่าการดูดกลืนแสงที่ a340
) เนื่องจากการเกิดออกซิเดชันของ NADH . โดย
ในความเข้มข้นของการเป็นสัดส่วนโดยตรงกับปริมาณของกรดซิตริก
ในตัวอย่าง ลในเลือด
ไม่ได้ยุ่งกับมาลิค และกรดซิตริก )
เพราะความเข้มข้นของกรดทั้งสองนี้ ทดสอบโดยการเพิ่มปริมาณของ
แยกที่เรียกว่ากรดเหล่านี้

ผสม มีลักษณะคล้ายคลึงกันไม่ว่าสถานะของอัล
ปริมาณออกซาเลตปานกลางคือ
วิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้โครมาโตกราฟ ( dx-300ic 480
DIONEX , Sunnyvale , CA ) พร้อมการ์ดคอลัมน์
[ ionpac ag4a-sc ( 4  50 มม. ) ] และการวิเคราะห์คอลัมน์
[ ionpac as4-sc ( 4  250 มม. ) ] ( MA และมิยาซากะ

2541 ) ความเข้มข้นของ catechins และคาเฟอีนใน
สื่อวิเคราะห์โดย HPLC ( scl-10avp
, Shimadzu ญี่ปุ่น ) ตามวิธีการของ
Goto et al . ( 1996 ) ที่ใช้เป็นมาตรฐานที่มี
( þ ) - catechin ( C ) , gallocatechin ( GC )
( egc ) , epigallocatechin gallate ( EGCG ) , แคเทชิน
( EC ) , gallocatechin แกลเลต ( gcg ) , แคเทชินแกลเลต
( ECG ) , แคทิชินแกลเลต ( CG ) เพิ่มขึ้น ( GA ) quercetin

วัดและคาเฟอีน อัล เนื้อหาในวัสดุพืช
ปริมาณของอัลในยอดและรากของต้นกล้าชา
ตั้งใจใช้อะตอมดูดกลืนสเปคโตรมิเตอร์
กับ กราไฟท์ เตา ( Spectra AA กับ Zeeman
แก้ไข , เครื่อง , ออสเตรเลีย ) หลังจากการย่อยด้วย
กรดดินประสิว : hclo4 ( 1 : 1 v / v )