2.5. Determination of homogeneity of polysaccharides and their molecular weight (Mw)
The determination of the homogeneity and molar mass (Mw) of the fractions were performed on a Waters high-performance size-exclusion chromatography (HPSEC) apparatus coupled to adifferential refractometer (RI) and a Wyatt Technology Dawn-F Multi-Angle Laser Light Scattering (MALLS) detector. The eluent was 0.1 M NaNO3, containing 0.5 g
L−1 NaN3. The polysaccharides solutions were filtered through a membrane with 0.22 m diameter pores (Millipore). The specific refractive index increment (dn/dc) was determined using a Waters 2410 detector, the samples being dissolved in the eluent, five increasing concentrations, ranging from0.2 to 1.0 mg mL−1 being used to determine the slope of the increment.
2.6. Methylation analysis of ˇ-glucan
Per-O-methylation of the isolated polysaccharide (10 mg) was carried out using NaOH-Me2SO-MeI (Ciucanu & Kerek, 1984). The process, after isolation of the products by neutralization (HOAc),dialysis, and evaporation was repeated, and the methylation wasfound to be complete. The per-O-methylated derivatives were hydrolyzed with 45% (v/v) . formic acid (1 mL) for 15 h at 100 ◦C,followed by NaB2H4 reduction and acetylation as in item 2.4, to givea mixture of partially O-methylated alditol acetates, which was anayzed by GC–MS using a DB-225 capillary column (30 m × 0.25 mm i.d.) programmed from 50 to 215 ◦C at 40 ◦C min−1, then hold, and identified from m/z profiles of their positive ions, by comparison with standards, the results being expressed as a relative percentage of each component.
2.5 การกำหนด homogeneity polysaccharides และของน้ำหนักโมเลกุล (Mw)กำหนด homogeneity และมวลสบ (Mw) ของเศษส่วนได้ดำเนินการในน้ำควบคู่ประสิทธิภาพสูงขนาดแยก chromatography (HPSEC) เครื่อง refractometer adifferential (RI) และจับ Wyatt เทคโนโลยีรุ่งอรุณ-F หลายมุมเลเซอร์แสง Scattering (ห้าง) Eluent เป็น 0.1 M NaNO3 ประกอบด้วย 0.5 g L−1 NaN3 โซลูชั่น polysaccharides มี filtered ผ่านเมมเบรนมีรูขุมขนขนาด 0.22 ม. (มาก) เพิ่มค่าดรรชนีหักเหของ specific (dn/dc) ได้กำหนดใช้เป็นเครื่องตรวจจับน้ำ 2410 ตัวอย่างการละลายใน eluent, five เพิ่มความเข้มข้น ตั้งแต่ from0.2 ถึง mL−1 1.0 มิลลิกรัมถูกใช้เพื่อกำหนดความชันของการเพิ่มขึ้น2.6 การปรับวิเคราะห์ˇ-glucanต่อ-O-ปรับของ polysaccharide แยก (10 มิลลิกรัม) ถูกนำออกใช้ NaOH-Me2SO-เหมย (Ciucanu & Kerek, 1984) กระบวนการ หลังแยกผลิตภัณฑ์จากปฏิกิริยาสะเทิน (HOAc), หน่วย และระเหยถูกซ้ำ และ wasfound ปรับให้สมบูรณ์ อนุพันธ์ต่อ-O-methylated ถูก hydrolyzed 45% (v/v) กรด (1 มล.) สำหรับ 15 h ที่ 100 ◦C ตาม NaB2H4 ลดและ acetylation ในสินค้า 2.4, givea ส่วนผสมของ alditol บางส่วน O methylated acetates ซึ่ง anayzed โดย GC – MS ใช้คอลัมน์เส้นเลือดฝอย DB-225 (30 m × 0.25 มม.ประชาชน) โปรแกรมจาก 50 ◦C 215 ◦C min−1, 40 แล้วค้าง และ identified จาก profiles m/z ของพวกเขากันไป, by comparison with มาตรฐาน ผลลัพธ์จะแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์สัมพัทธ์ของแต่ละส่วน
การแปล กรุณารอสักครู่..