2.2. Microbiological analysis and p

2.2. Microbiological analysis and preliminary physiological characterization of isolates
Twenty five grams of each sample were homogenized with 225 mL of sterile tryptone water (Oxoid, Basingstoke, UK) in a Masticator Classic (IUL Instruments, Barcelona, Spain) blender for 2 min at room temper- ature. Serial decimal dilutions were made in sterile tryptone water and in duplicate. Samples of appropriate dilutions were poured (1 mL) or spread (0.1 mL) onto total count and selective agar plates. The following microbiological analyses were performed: total viable counts and psychrotrophic bacteria were determined on Standard Plate Count Agar (SPCA) (Oxoid) and incubated at 30 °C for 48 h and 7 °C for 10 days, respectively; halotolerant bacteria were determined on Standard Plate Count Agar + 7.5% NaCl incubated at 37 °C for 48 h; lactic acid bacteria were determined on the Man, Rogosa, Sharpe (MRS) agar (Oxoid) incubated at 30 °C for 48 h; Enterobacteriaceae counts were determined on Violet Red Bile Glucose Agar (VRBGA) (Oxoid) incubated at 37 °C for 24 h; yeasts and molds were determined on Yeast and Mould Agar (Oxoid) incubated at 25 °C for 5 days; staphylococci were plated on Baird Parker Agar Base (Oxoid) supplied with an egg yolk tellurite emulsion (Oxoid), and coliforms were determined on Violet Red Agar (VRBA) (Oxoid) incubated at 37 °C for 24 h. After incubation, plates with 30–300 colonies were counted. Microbiological data were transformed into logarithms of the number of colony forming units (cfu)/g.
From each piece (limbs and ribs) and each manufacturing process (salting time and olive oil and paprika covering), five colonies from the media M17, PCA + 7.5% NaCl, MRS and Baird Parker of the highest dilution that yielded growth were randomly selected and isolated. The isolates from MRS agar were purified by four alternate subcultures in MRS agar and MRS broth (Oxoid). Isolates from SPCA agar + 7.5% NaCl were purified in Brain Heart Infusion (BHI) agar and BHI broth (Oxoid). Isolates from M17 agar and from Baird Parker agar were purified in Nutrient agar Nutrient broth (Oxoid). The purified isolates were afterwards maintained at −80 °C using 20% of glycerol as a cryoprotector agent. All the isolates were preliminary characterized by Gram reaction and catalase activity according to the methods and criteria of Sharpe (1979) and Kandler and Weiss (1986)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2 การทางจุลชีววิทยาการวิเคราะห์และจำแนกสรีรวิทยาเบื้องต้นของแยกยี่สิบห้ากรัมของแต่ละอย่างถูก homogenized เป็นกลุ่มกับ 225 mL น้ำฆ่าเชื้อ tryptone (Oxoid, Basingstoke, UK) ในเบลนเดอร์ Masticator Classic (เครื่องมือ IUL บาร์เซโลนา สเปน) ในนาทีที่ 2 ที่ห้องอารมณ์ ature Dilutions ลำดับทศนิยมขึ้นน้ำฆ่าเชื้อ tryptone และสำเนา ตัวอย่างที่เหมาะสม dilutions ได้ poured (1 mL) หรือแพร่กระจาย (0.1 มล.) จำนวนรวมและ agar เลือกแผ่น ดำเนินการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาต่อไปนี้: นับรวมได้และแบคทีเรีย psychrotrophic ถูกกำหนดบนมาตรฐานจานนับ Agar (SPCA) (Oxoid) และ incubated ที่ 30 ° C 48 h และ 7 ° C 10 วัน ตามลำดับ แบคทีเรียทนเกลือเพื่อใช้ถูกกำหนดจำนวนแผ่นมาตรฐาน Agar + 7.5% NaCl incubated ที่ 37 ° C สำหรับ 48 h แบคทีเรียกรดแลกติกถูกกำหนดบนคน Rogosa, agar Sharpe (นาง) (Oxoid) incubated ที่ 30 ° C สำหรับ 48 h นับ Enterobacteriaceae ถูกกำหนดบนม่วงแดงน้ำดีกลูโคส Agar (VRBGA) (Oxoid) incubated ที่ 37 ° C ใน 24 h yeasts และแม่พิมพ์ถูกกำหนดในยีสต์และ Agar แม่พิมพ์ (Oxoid) incubated 5 วัน ที่ 25 ° C มีชุบ staphylococci บน Baird คเกอร์ Agar ฐาน (Oxoid) ให้มาพร้อมกับมีไข่แดง tellurite อิมัลชัน (Oxoid), และกำจัดถูกกำหนดบนม่วงแดง Agar (VRBA) (Oxoid) incubated ที่ 37 ° C ใน 24 ชม หลังจากบ่ม แผ่นกับอาณานิคม 30 – 300 นับได้ ข้อมูลทางจุลชีววิทยาได้เปลี่ยนเป็นลอการิทึมของจำนวนโคโลนี (cfu) หน่วยขึ้นรูป / gจากแต่ละชิ้น (แขนขาและซี่โครง) และการผลิตแต่ละกระบวนการ (มารีซอลทิงเวลา และน้ำมันมะกอก และนำพริกขี้หนู), อาณานิคมห้าจากสื่อ M17, PCA + 7.5% NaCl นาง Baird คเกอร์ของเจือจางสูงสุดที่ให้ผลเจริญเติบโตถูกสุ่มเลือก และแยกต่างหาก แยกจาก MRS agar ได้บริสุทธิ์ โดย subcultures อื่นสี่ MRS agar และนางซุป (Oxoid) แยก จาก SPCA agar + 7.5% NaCl ที่บริสุทธิ์ในสมองหัวใจคอนกรีต (BHI) agar และซุป BHI (Oxoid) แยก จาก M17 agar และพาร์ คเกอร์ Baird agar ที่บริสุทธิ์ใน agar ธาตุอาหารธาตุอาหารซุป (Oxoid) แยกบริสุทธิ์ได้ภายหลังรักษาที่ −80 ° C ใช้ 20% ของกลีเซอรเป็นตัวแทน cryoprotector ทั้งหมดแยกได้เบื้องต้นโดยปฏิกิริยากรัมและ catalase กิจกรรมตามวิธีการและเงื่อนไขของ Sharpe (1979) และ Kandler และมีร์ (1986)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาและลักษณะทางสรีรวิทยาเบื้องต้นของการแยก
ยี่สิบห้ากรัมของแต่ละตัวอย่างถูกหดหาย 225 มิลลิลิตรน้ำ tryptone หมัน (Oxoid เบซิงสหราชอาณาจักร) ใน Masticator คลาสสิก (IUL เครื่องดนตรี, บาร์เซโลนา, สเปน) เครื่องปั่นสำหรับ 2 นาทีที่ห้อง temper- ature เจือจางทศนิยมอนุกรมที่ถูกสร้างขึ้นในน้ำ tryptone ผ่านการฆ่าเชื้อและในที่ซ้ำกัน ตัวอย่างของการเจือจางที่เหมาะสมถูกเท (1 มิลลิลิตร) หรือการแพร่กระจาย (0.1 มิลลิลิตร) ลงนับรวมและแผ่นวุ้นเลือก การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาได้ดำเนินการดังต่อไปนี้: จำนวนจุลินทรีย์ทั้งหมดและแบคทีเรีย psychrotrophic ได้รับการพิจารณาในมาตรฐานจานนับวุ้น (SPCA) (Oxoid) และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมงและ 7 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 วันตามลำดับ แบคทีเรียทนเค็มได้รับการพิจารณาในมาตรฐานจานนับวุ้น + 7.5% NaCl บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง; แบคทีเรียกรดแลคติกที่ได้รับการพิจารณาในชาย Rogosa ชาร์ป (MRS) วุ้น (Oxoid) บ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง; นับ Enterobacteriaceae ได้รับการพิจารณาในสีม่วงแดงน้ำดีกลูโคสวุ้น (VRBGA) (Oxoid) บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง; ยีสต์และราได้รับการพิจารณาในยีสต์และแม่พิมพ์วุ้น (Oxoid) บ่มที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 วัน; เชื้อถูกชุบในบาร์ดปาร์กเกอร์วุ้นฐาน (Oxoid) ที่มาพร้อมกับอิมัลชัน tellurite ไข่แดง (Oxoid) และโคลิฟอร์มได้รับการพิจารณาในสีม่วงแดงวุ้น (Vrba) (Oxoid) บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง หลังจากการบ่มแผ่นกับ 30-300 อาณานิคมนับ ข้อมูลทางจุลชีววิทยาถูกเปลี่ยนเป็นลอการิทึมของจำนวนของอาณานิคมสร้างหน่วย (โคโลนี) / g.
จากแต่ละชิ้น (แขนขาและซี่โครง) และแต่ละกระบวนการผลิต (เกลือเวลาและน้ำมันมะกอกและพริกขี้หนูครอบคลุม) ห้าอาณานิคมจากสื่อ M17, PCA + 7.5% NaCl, MRS และบาร์ดปาร์กเกอร์ของการลดสัดส่วนที่สูงที่สุดที่ให้ผลการเจริญเติบโตได้รับการคัดเลือกแบบสุ่มและโดดเดี่ยว ที่แยกจากอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS บริสุทธิ์โดยสี่วัฒนธรรมอื่นในอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS และน้ำซุป MRS (Oxoid) แยกจากวุ้น SPCA + 7.5% โซเดียมคลอไรด์บริสุทธิ์ในสมองหัวใจ Infusion (BHI) วุ้นและน้ำซุป BHI (Oxoid) แยกจาก M17 และวุ้นจากบาร์ดปาร์กเกอร์วุ้นบริสุทธิ์ในอาหารเลี้ยงเชื้อสารอาหารสารอาหารน้ำซุป (Oxoid) สายพันธุ์บริสุทธิ์หลังจากนั้นได้รับการดูแลที่ -80 องศาเซลเซียสโดยใช้ 20% ของกลีเซอรอลเป็นตัวแทน cryoprotector ไอโซเลททั้งหมดถูกเบื้องต้นโดดเด่นด้วยปฏิกิริยาแกรมและกิจกรรม catalase ตามวิธีการและหลักเกณฑ์ของชาร์ป (1979) และ Kandler และไวส์ (1986)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . จุลชีววิทยาและลักษณะทางสรีรวิทยาเบื้องต้นของการวิเคราะห์ไอโซเลต
ยี่สิบห้ากรัมแต่ละตัวอย่างถูกบดกับ 225 มิลลิลิตร น้ำหมันทริพโทน ( oxoid Basingstoke , สหราชอาณาจักร , คลาสสิก ( ) ในการเคี้ยว iul เครื่องมือ , บาร์เซโลนา , สเปน ) เครื่องปั่นสำหรับ 2 นาทีที่ห้องอารมณ์ - ตูเร . ทศนิยมซีเรียลเจือจางอยู่ในน้ำและฆ่าเชื้อทริพโทนในที่ซ้ำกันตัวอย่างของวิธีการที่เหมาะสมที่ถูกเท ( 1 มล. ) หรือกระจาย ( 0.1 มล. ) ลงบนแผ่นวุ้น นับรวมและเลือก ต่อไปนี้การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาจำนวน : นับได้ทั้งหมดและแบคทีเรียถูกกำหนดในมาตรฐานของไซโครโทรป ( จานนับ SPCA ) ( oxoid ) และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศา C เป็นเวลา 48 ชั่วโมงและ 7 ° C เป็นเวลา 10 วัน ตามลำดับแบคทีเรียทนเค็มเป็นมาตรฐานนับจานวุ้น 7.5 % NaCl บ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง ; แบคทีเรียกรดแลคติกเป็นในผู้ชาย rogosa ชาร์ป ( นาง ) , ( oxoid ) บ่มที่อุณหภูมิ 30 องศา C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง ; ผิดเพี้ยนนับคำนวณบนอาหารวุ้นตาล ม่วงแดง ( vrbga ) ( oxoid น้ำดี ) บ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ;ยีสต์และเชื้อราซึ่งในยีสต์และรา ( oxoid ) อุณหภูมิ 25 ° C เป็นเวลา 5 วัน และถูกชุบในแบร์ด ปาร์คเกอร์ การ์เบส ( oxoid ) ให้กับไข่แดง tellurite อิมัลชัน ( oxoid ) และโคลิฟอร์มเป็นสีม่วงแดงบนวุ้น ( vrba ) ( oxoid ) บ่มที่ 37 ° C สำหรับ 24 ชั่วโมง หลังจากบ่ม , จาน 30 – 300 โคโลนีเป็นนับข้อมูลจุลินทรีย์ถูกเปลี่ยนเป็นลอการิทึมของจำนวนหน่วยสร้างอาณานิคม ( CFU ) / g .
จากแต่ละชิ้น ( แขนและซี่โครง ) และกระบวนการผลิตแต่ละกระบวนการ ( การเวลาและน้ำมันมะกอกและพริกหยวกครอบคลุม ) , ห้าอาณานิคมจาก m17 สื่อ , PCA 7.5% และเกลือ คุณนายแบร์ดปาร์กเกอร์ของ dilution สูงสุดให้ผลการสุ่ม และแยกที่แยกได้จากนางวุ้นมีความบริสุทธิ์โดยสี่สลับ subcultures และนางวุ้นใน MRS broth ( oxoid ) ที่แยกได้จาก SPCA วุ้น 7.5% มีความบริสุทธิ์ในเกลือแช่หัวใจสมอง ( BHI ) และวุ้น BHI broth ( oxoid ) ที่แยกได้จาก m17 วุ้นและวุ้นจากแบรด ปาร์คเกอร์มีความบริสุทธิ์ในอาหารเลี้ยงเชื้อสารอาหาร nutrient broth ( oxoid )และไอโซเลทที่− 80 ° C หลังจากนั้นยังคงใช้ 20% ของกลีเซอรอล เป็นสาร cryoprotector . ทุกสายพันธุ์เป็นเบื้องต้นลักษณะปฏิกิริยากรัม และสามารถจัดกิจกรรมตามวิธีการและเกณฑ์ ชาร์ป ( 1979 ) และ kandler ไวส์ ( 1986 ) และ