Ostrea angasi Sowerby (55 to 80 mm)

Ostrea angasi Sowerby (55 to 80 mm) were collected from Port
Lincoln, South Australia, in July 1993, and were held in aquarium
tanks with aerated circulating sea water at 17 °C, where they were
fed a mixture of the unicellular algae Isochrysis galbana, Tetraselmis
suecica and Pavlova lutheri. Oysters began to produce detectable
shell growth within a few days of collection, and continued
to grow in the aquaria for 6 mo.
After treatment for 10 h with 0.004% colchicine in ®ltered sea
water, gill tissue was dissected and immersed in distilled water for
30 min. This material was ®xed in three changes of 3:1 ethanol and
acetic acid for at least 30 min each. The freshly ®xed gills were then
transferred into 1:1 ethanol and acetic acid. Thirty minutes later
they were cut into 0.5 cm pieces, smeared on clean microscope
slides, and air-dried. For conventional karyotype studies, slides
were stained with 10% Giemsa solution (Sigma Chemical Co.) for
20 min, rinsed in tap-water and allowed to dry. Suitable mitotic
metaphases were photographed with a high numerical aperture,
100 ´ objective, on an Olympus BH-2 microscope using Kodak
Technical Pan Film. Chromosome arm lengths were measured in
11 well-spread metaphase plates with a calibrated ocular micrometer.
For comparisons of chromosome pairs within and between
species, chromosomes were arranged in the order suggested by
Thiriot-Quievreux (1984) for Ostrea edulis, with centromere positions
described according to the nomenclature of Levan et al.
(1964). Slides used for constitutive heterochromatin (C-band)
studies were stained with the modi®ed ASG method of Summer
(1972): aged slides (at least 10 d old) were treated in 0.2 N HCl for
1 h, washed with distilled water, and then incubated in a 0.3 M
barium hydroxide solution for between 30 s and 1 min at room
temperature. These slides were then washed again with distilled
water, immersed in 2x SSC (0.3 M sodium chloride, 0.03 M sodium
citrate) for 45 min at 60 °C, and stained in 5% Giemsa solution for
1 h. For nucleolus organiser regions studies, slides were stained
according to the method described by Howell and Black (1980).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Angasi Ostrea Sowerby (55-80 mm) ได้รวบรวมจากพอร์ตลินคอล์น ออสเตรเลียใต้ ในเดือน 1993 กรกฎาคม และจัดให้มีขึ้นในถัง มีอากาศหมุนเวียนน้ำทะเลที่ 17 ° C ที่พวกเขาป้อนส่วนผสมของสาหร่าย unicellular Isochrysis galbana, Tetraselmissuecica และ Pavlova lutheri หอยนางรมเริ่มผลิตสามารถตรวจสอบได้เปลือกเติบโตภายในไม่กี่วันของคอลเลกชัน และอย่างต่อเนื่องเติบโตในอควาเรียสำหรับหม้อ 6หลังจากรักษา h 10 กับ 0.004% โคลชิซีนใน ® ซี lteredน้ำ เนื้อเยื่อเหงือก dissected และแช่อยู่ในน้ำกลั่น30 นาที วัสดุนี้ถูก ® xed ในสามการเปลี่ยนแปลงของเอทานอล 3:1 และกรดอะซิติกสำหรับอย่างน้อย 30 นาทีในแต่ละ สด ® xed gills ได้แล้วโอนเป็นกรดอะซิติกและเอทานอล 1:1 30 นาทีภายหลังพวกเขาถูกตัดเป็นชิ้น 0.5 cm ป้ายบนกล้องจุลทรรศน์สะอาดภาพนิ่ง และ air-dried สำหรับการศึกษา karyotype ปกติ ภาพนิ่งสี มี 10% Giemsa โซลูชัน (ซิกเคมี จำกัด) สำหรับ20 นาที rinsed ในน้ำประปา และได้รับอนุญาตให้แห้ง เหมาะ mitoticmetaphases ได้ถ่ายรูปกับความสูงตัวเลขรูรับแสงวัตถุประสงค์ 100 ´ ในกล้องจุลทรรศน์โอลิมปัส BH-2 การใช้โกดักหนังแพนด้านเทคนิค มีวัดความยาวของแขนโครโมโซมในmetaphase ห้องอยู่ปากซอย 11 แผ่นกับไมโครมิเตอร์เป็นแนว calibratedสำหรับการเปรียบเทียบโครโมโซมคู่ภายใน และระหว่างสปีชีส์ chromosomes ถูกจัดตามลำดับแนะนำThiriot-Quievreux (1984) สำหรับ Ostrea edulis กับ centromere ตำแหน่งอธิบายตามระบบการตั้งชื่อของ Levan et al(1964) ภาพนิ่งที่ใช้สำหรับขึ้น heterochromatin (C-วง)ศึกษามีสีกับ modi ® ed วิธี ASG ของฤดูร้อน(1972): ภาพนิ่งอายุ (น้อย 10 d ที่เก่า) ได้รับการรักษาใน 0.2 N HCl สำหรับ1 h ล้าง ด้วยน้ำกลั่น และ incubated แล้ว ใน 0.3 Mแบเรียมไฮดรอกไซด์โซลูชั่นสำหรับระหว่าง s และนาที 1 ห้อง 30อุณหภูมิ ภาพนิ่งเหล่านี้ถูกแล้วล้างอีกครั้งด้วยกลั่นน้ำ สัมผัส 2 SSC x (0.3 M โซเดียมคลอไรด์ โซเดียม 0.03 Mซิเตรต) สำหรับ 45 นาทีที่ 60 ° C และสีใน 5% Giemsa โซลูชั่น1 h นิวคลีโอลัสสมในภูมิภาคศึกษา ภาพนิ่งมีสีตามวิธีการอธิบายไว้ โดย Howell และสีดำ (1980)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Ostrea angasi โซ (55-80 มิลลิเมตร)
ที่ถูกเก็บรวบรวมจากพอร์ตลินคอล์นใต้ของประเทศออสเตรเลียในเดือนกรกฎาคม1993
และถูกจัดขึ้นในพิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำถังที่มีน้ำทะเลไหลเวียนของอากาศที่17
องศาเซลเซียสที่พวกเขาถูกเลี้ยงด้วยส่วนผสมของสาหร่ายเซลล์เดียวIsochrysis galbana , Tetraselmis
suecica และ Pavlova lutheri หอยนางรมเริ่มผลิตตรวจพบการเจริญเติบโตของเปลือกภายในไม่กี่วันของการเก็บและยังคงเติบโตในตู้เป็นเวลา6 เดือน. หลังจากการรักษาเป็นเวลา 10 ชั่วโมงกับ 0.004% colchicine ในทะเล®lteredน้ำเนื้อเยื่อเหงือกถูกชำแหละและแช่อยู่ในน้ำกลั่น30 นาที วัสดุนี้ถูก®xedในสามการเปลี่ยนแปลงของ 3: 1 เอทานอลและกรดอะซิติกเป็นเวลาอย่างน้อย 30 นาทีในแต่ละ เหงือก®xedสดใหม่จากนั้นก็ย้ายไปอยู่ที่ 1: 1 เอทานอลและกรดอะซิติก สามสิบนาทีต่อมาพวกเขาถูกตัดเป็น 0.5 ซม. ชิ้นป้ายบนกล้องจุลทรรศน์สะอาดภาพนิ่งและอากาศแห้ง สำหรับการศึกษา karyotype ธรรมดาภาพนิ่งถูกย้อมด้วยสี10% วิธีการแก้ปัญหา Giemsa (Sigma เคมี จำกัด ) เป็นเวลา20 นาทีล้างในน้ำประปาและได้รับอนุญาตให้แห้ง ทิคส์เหมาะmetaphases ถูกถ่ายภาพที่มีแสงตัวเลขสูง100 'วัตถุประสงค์ในโอลิมปักล้องจุลทรรศน์ BH-2 โดยใช้ Kodak ภาพยนตร์แพนทางเทคนิค ความยาวแขนโครโมโซมอยู่ในวัด11 แผ่น metaphase ดีการแพร่กระจายด้วยไมโครเมตรตาสอบเทียบ. สำหรับการเปรียบเทียบของโครโมโซมคู่ภายในและระหว่างชนิดโครโมโซมถูกจัดให้อยู่ในลำดับที่แนะนำโดยThiriot-Quievreux (1984) สำหรับ edulis Ostrea ด้วยตำแหน่ง centromere อธิบาย ตามศัพท์ของ Levan et al,. (1964) ภาพนิ่งที่ใช้สำหรับเป็นส่วนประกอบ heterochromatin (C-Band) การศึกษามีการย้อมด้วยวิธี ASG modi®edฤดูร้อน(1972): อายุภาพนิ่ง (อย่างน้อย 10 d เก่า) ได้รับการรักษาใน 0.2 N HCl สำหรับ1 ชั่วโมงล้างด้วยน้ำกลั่น และบ่มแล้วใน 0.3 M แก้ปัญหาแบเรียมไฮดรอกไซสำหรับระหว่างวันที่ 30 และ 1 นาที ณ ห้องอุณหภูมิ ภาพนิ่งเหล่านี้ถูกล้างแล้วอีกครั้งกับกลั่นน้ำแช่อยู่ใน 2x SSC (0.3 M โซเดียมคลอไรด์ 0.03 M โซเดียมซิเตรต) เป็นเวลา 45 นาทีที่ 60 องศาเซลเซียสและสีใน 5% วิธีการแก้ปัญหา Giemsa สำหรับ1 ชั่วโมง สำหรับพื้นที่จัด nucleolus ศึกษาสไลด์มีการย้อมตามวิธีการอธิบายโดยธรรมด๊าธรรมดาและสีดำ(1980)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ostrea angasi มอสโคว์ ( 55 80 มม. ) โดยใช้ข้อมูลจากพอร์ต
ลินคอล์น , ออสเตรเลียใต้ในเดือนกรกฎาคม 1993 และถูกจัดขึ้นในถังพิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำ
ใช้หมุนเวียนน้ำทะเลที่ 17 ° C , ที่พวกเขา
อาหารส่วนผสมของสาหร่ายเซลล์เดียว isochrysis ตัวอ่อนหอยที่เลี้ยงด้วยเตตร้าเซลมีส
suecica , และ lutheri มือ . หอยเชลล์ได้เริ่มการผลิตการเจริญเติบโต
ภายในไม่กี่วันของคอลเลกชัน และยังคง
เติบโตในวาเรีย 6 โม
หลังจากรักษา 10 H สารน้ำใน® ltered ทะเล
น้ำเนื้อเยื่อเหงือกถูกผ่า และแช่ในน้ำกลั่น
30 นาที วัสดุนี้® xed สามการเปลี่ยนแปลงของเอทานอลและ
3 กรดเป็นเวลาอย่างน้อย 30 นาทีในแต่ละ สด® xed เหงือกแล้ว
โอนเข้ามา 1 : 1 เอทานอลและกรดอะซิติก สามสิบนาทีต่อมา พวกเขาถูกตัดออก
0ชิ้น 5 เซนติเมตร ป้ายบนสไลด์กล้องจุลทรรศน์
สะอาด และอากาศแห้ง การศึกษาคาริโอไทป์ธรรมดาภาพนิ่ง
ถูกย้อมด้วยสีจิมซาโซลูชั่น 10% ( Sigma Chemical Co . )
20 นาทีล้างด้วยน้ำประปา และได้รับอนุญาตให้แห้ง metaphases mitotic
เหมาะได้ถ่ายภาพที่มีตัวเลขสูง รูรับแสง
100 ใหม่วัตถุประสงค์บนโอลิมปัส bh-2 กล้องจุลทรรศน์ที่ใช้ฟิล์ม Kodak แพนเทค

วัดความยาวแขนโครโมโซมในโครโมโซม
อืมกระจายจานกับขนาดคูลาร์ไมโครมิเตอร์ .
สำหรับการเปรียบเทียบโครโมโซมคู่ภายในและระหว่าง
ชนิดโครโมโซมถูกจัดเรียงในลำดับที่แนะนำ
thiriot quievreux ( 1984 ) สำหรับ ostrea ชินี กับตำแหน่งเซนโตรเมียร์
อธิบายตามระบบการตั้งชื่อของ 4
( et al . 1964 )ภาพนิ่งที่ใช้รธน. สปีชีส์ ( ลูกค้า )
ศึกษาที่เปื้อนโมดิ®เอ็ด ASG วิธีการฤดูร้อน
( 1972 ) : อายุภาพนิ่ง ( อย่างน้อย 10 D เก่า ) ได้รับการรักษาใน 0.2 N HCl สำหรับ
1 H , การล้างด้วยน้ำกลั่น แล้วบ่มใน 0.3 M
แบเรียมโซดาไฟแก้ปัญหาระหว่าง 30 และ 1 นาทีที่อุณหภูมิห้อง

ภาพนิ่งเหล่านี้ แล้วล้างอีกครั้งด้วยน้ำกลั่น
,กับ 2x SSC ( 0.3 M โซเดียมคลอไรด์ , โซเดียมซิเตรต 0.03 m
) สำหรับ 45 นาทีที่ 60 ° C และเลอะ 5% จิมซาโซลูชั่นสำหรับ
1 H . สำหรับนิวคลีโอลัสมีภูมิภาคศึกษา , ภาพนิ่งใช้ย้อม
ตามวิธีการที่อธิบายโดย Howell และสีดำ ( 1980 )