In this paper, the aromatic chemica

In this paper, the aromatic chemical composition of wild V.
pompona ssp. grandiflora fruits, over three and a half to nine
months of development, is reported. The quantification was based
on High-Performance Liquid Chromatography with Diode Array
Detection (HPLC-DAD) methodology. Liquid chromatography electrospray
ionisation mass spectrometry (LC–ESI-MS) was used to
assist in the identification of all compounds. This is the first comprehensive
chemical investigation of V. pompona fruits at different
stages of development as well as the first analytical study dedicated
to a biologically characterised wild Amazonian Peruvian Vanilla
species.
2. Materials and methods
2.1. Plant material and chemicals
Flowers of V. pompona ssp. grandiflora (Lindl.) Soto-Arenas were
hand pollinated in October 2008 at selected wetland ecosystems of
Madre de Dios, Peru. For a description of field research methods
and the habitats, see Householder et al. (2010). Fruits were harvested
during months three and half to nine after pollination. Herbarium
voucher specimens (MC366, MC684, MC599, MC660,
MC296, PM865 and JJ2671) were collected in duplicate sets and
deposited at the San Marcos Herbarium in Lima, Peru, and at the
BRIT Herbarium in Fort Worth, Texas. Specimens were identified
by the late neotropical orchid experts E.A. Christenson and Miguel
Soto-Arenas (Householder et al., 2010). Details of these collections
are posted in the Atrium Biodiversity Information System, programmed
and managed at BRIT (http://atrium.andesamazon.org).
The standard compounds vanillin, vanillyl alcohol, vanillic acid,
4-hydroxybenzyl alcohol, 4-hydroxybenzaldehyde, 4-hydroxybenzoic
acid, and anisyl alcohol, as well as Viscozyme (V2010, lot #
085K1587) and Celluclast (C2730, lot # 074K1156), were purchased
from Sigma–Aldrich. Glucovanillin was obtained from
Chromadex. Methanol (HPLC-grade) and ethanol (99.9%) were purchased
from J.T. Baker, Co. The water used was Milli-Q-purified.
The studies were performed with three individual fruits per month,
except for month nine, in which six fruits were considered.
2.2. Humidity determination
Upon arrival to the laboratory, no more than two days after harvest,
the fruits were frozen in liquid nitrogen and immediately
lyophilized (LABCONCO, Freeze Dry System/Freezone 4.5) for 3–
5 days. Humidity is expressed as percentages [(wwet  wdry/
wwet)  100].
2.3. Vanilla sample preparation
Individual lyophilized fruits were ground to a fine powder using
an electric grinder (Sigma–Aldrich, model Z278181). Two grams of
the ground material was Soxhlet-extracted with 48% aqueous EtOH
(200 ml) for 24 h (Voisine, Carmichael, Chalier, Cormier, & Morin,
1992). The ethanol was removed by vacuum evaporation
(150 mBar, 40 C) and the aqueous, turbid solution was taken to
50 ml in a volumetric flask. Hydrolysis of the glucosides was
achieved by incubating 10 ml of the extract with 150 ll of Viscozyme
and 300 ll of Celluclast at 45 C for 8 h (Inkubator 1000/Unimax
1010, Heildolph Instr.). Ethanol (4.5 ml) was added and the
process continued for 1 h to yield the hydrolyzed fraction. The
non-hydrolyzed portion followed the same procedure except for
the enzyme addition. The volume of both samples was adjusted
to 15 ml prior to HPLC analysis. The experiments were performed
in duplicate. The vanilla extract was passed through a 25 mm PTFE
Fig. 1.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในเอกสารนี้ องค์ประกอบทางเคมีหอมของป่า Vpompona ssp. ซากผลไม้ กว่าสามครึ่งถึงเก้ามีรายงานเดือนพัฒนา การนับขึ้นบน Chromatography เหลวประสิทธิภาพสูงด้วยไดโอดอาร์เรย์วิธีการตรวจสอบ (HPLC-DAD) วิธีพ่นละอองไฟฟ้า chromatography ของเหลวionisation โตรเมทรี (LC – ESI-MS) ถูกใช้ในการช่วยในรหัสของสารทั้งหมด นี่คือครบวงจรแรกตรวจสอบเคมีของ V. pompona ผลไม้ที่แตกต่างกันขั้นตอนของการพัฒนารวมทั้งศึกษาวิเคราะห์แรกทุ่มเทการชิ้น characterised ป่าแอมะซอนเปรูวานิลลาสายพันธ์2. วัสดุและวิธีการ2.1 การปลูกวัสดุและเคมีภัณฑ์ดอกไม้ของ V. pompona ssp. ซาก (Lindl) โซโตสถานมือ pollinated ในเดือน 2008 ตุลาคมในระบบนิเวศพื้นที่ชุ่มน้ำที่เลือกของMadre de Dios เปรู สำหรับคำอธิบายของเขตข้อมูลวิธีการวิจัยและอยู่อาศัย ดูคฤหัสถ์ร้อยเอ็ด al. (2010) มีการเก็บเกี่ยวผลไม้ในช่วงเดือนสามและครึ่งถึงเก้าหลัง pollination หอพรรณไม้ใบสำคัญไว้เป็นตัวอย่าง (MC366, MC684, MC599, MC660MC296, PM865 และ JJ2671) ได้รวบรวมไว้ในชุดซ้ำ และฝากที่หอพรรณไม้ San Marcos ในลิมา เปรู และในการอุโมงค์ที่หอพรรณไม้ในฟอร์ตเวิร์ธ เท็กซัส ระบุไว้เป็นตัวอย่างโดยปลาย neotropical กล้วยไม้ผู้เชี่ยวชาญ E.A. Christenson และ Miguelโซโตสถาน (คฤหัสถ์ร้อยเอ็ด al., 2010) รายละเอียดชุดโพสต์ในเอเทรียมความหลากหลายทางชีวภาพระบบฐานข้อมูล โปรแกรมและมีการจัดการที่อุโมงค์ (http://atrium.andesamazon.org)มาตรฐานสารวานิลลิน vanillyl แอลกอฮอล์ กรด vanillicแอลกอฮอล์ 4 hydroxybenzyl, 4 hydroxybenzaldehyde, 4-hydroxybenzoicกรด และแอลกอฮอล์ anisyl รวมทั้ง Viscozyme (V2010 ล็อต#085 K 1587) และ Celluclast (C2730 ล็อต 1156 #074 K), ซื้อจากซิก-Aldrich Glucovanillin ได้รับจากChromadex ซื้อเมทานอล (HPLC เกรด) และเอทานอล (99.9%)จาก J.T. เบเกอร์ จำกัด น้ำที่ใช้ได้ที่-Q-บริสุทธิ์ดำเนินการศึกษากับผลไม้แต่ละสามต่อเดือนยกเว้นเดือนเก้า ที่ 6 ผลไม้ถูกพิจารณา2.2. กำหนดความชื้นเมื่อมาถึงห้องปฏิบัติการ ไม่เกิน 2 วันหลังการเก็บเกี่ยวผลไม้ถูกแช่แข็ง ในไนโตรเจนเหลว และทันทีlyophilized (LABCONCO ตรึง ระบบ/Freezone 4.5 แห้ง) สำหรับ 3 –5 วัน แสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ความชื้น [(wwet wdry/wwet) 100]2.3. ตัวอย่างวานิลลาLyophilized ผลไม้แต่ละจะใช้เป็นผงดีเครื่องบดการไฟฟ้า (ซิก-Aldrich รุ่น Z278181) สองกรัมของวัสดุพื้นถูกสกัด Soxhlet 48% EtOH อควี(200 มล.) สำหรับ 24 h (Voisine, Carmichael, Chalier, Cormier และโม ริน1992) เอทานอลถูกเอาออก โดยการระเหยสุญญากาศ(150 mBar, 40 C) และโซลูชัน turbid อควีถูกนำไป50 มลในหนาว volumetric ไฮโตรไลซ์ glucosides ถูกโดย incubating 10 ml ของสารสกัดด้วย 150 จะ Viscozymeและ 300 จะ Celluclast ที่ C 45 สำหรับ 8 h (Inkubator 1000/Unimax1010, Heildolph Instr.) เพิ่มเอทานอล (4.5 ml) และกระบวนการอย่างต่อเนื่องสำหรับ 1 h ให้เศษ hydrolyzed ที่ส่วนที่ไม่ใช่ hydrolyzed ตามกระบวนการเดียวกันยกเว้นนอกจากนี้เอนไซม์ ปริมาตรของตัวอย่างทั้งสองถูกปรับปรุงไป 15 มล.ก่อนวิเคราะห์ HPLC ดำเนินการทดลองในซ้ำ สารสกัดวานิลลาที่ผ่าน 25 มม. PTFEFig. 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในบทความนี้องค์ประกอบทางเคมีที่มีกลิ่นหอมของป่าวี
เอสเอส pompona ผลไม้ grandiflora กว่าสามและครึ่งถึงเก้า
เดือนของการพัฒนาจะมีการรายงาน ปริมาณมีพื้นฐานอยู่
บนโครมาโตของเหลวประสิทธิภาพสูงกับอาร์เรย์ไดโอด
ตรวจจับ (HPLC-DAD) วิธีการ ของเหลว chromatography electrospray
Ionisation มวลสาร (LC-ESI-MS) ถูกนำมาใช้เพื่อ
ช่วยในการระบุตัวตนของสารทั้งหมด นี้เป็นครั้งแรกที่ครอบคลุม
การตรวจสอบทางเคมีของโวลต์ผลไม้ที่แตกต่างกัน pompona
ขั้นตอนของการพัฒนาเช่นเดียวกับการศึกษาวิเคราะห์ครั้งแรกที่อุทิศตน
เพื่อความโดดเด่นทางชีวภาพในป่าอเมซอนของเปรูวานิลลา
ชนิด.
2 วัสดุและวิธีการ
2.1 วัสดุจากพืชและสารเคมี
ดอกไม้ของวีเอสเอส pompona grandiflora (Lindl.) Soto-Arenas ถูก
มือเรณูในเดือนตุลาคม 2008 ในระบบนิเวศพื้นที่ชุ่มน้ำที่เลือกของ
Madre de Dios, เปรู สำหรับรายละเอียดของวิธีการวิจัยภาคสนาม
และที่อยู่อาศัยให้ดูเจ้าของบ้าน et al, (2010) ผลไม้ที่เก็บเกี่ยว
ในช่วงเดือนสามและครึ่งหนึ่งถึงเก้าหลังจากการผสมเกสร สมุนไพร
ตัวอย่างบัตรกำนัล (MC366, MC684, MC599, MC660,
MC296, PM865 และ JJ2671) ถูกเก็บไว้ในชุดที่ซ้ำกันและ
นำไปฝากไว้ที่หอพรรณไม้ซานมาร์คอสในกรุงลิมาเปรูและที่
บริตสมุนไพรในฟอร์ตเวิร์ ธ เท็กซัส ชิ้นงานที่ถูกระบุ
โดยสายผู้เชี่ยวชาญด้านกล้วยไม้ neotropical EA Christenson และมิเกล
Soto-Arenas (เจ้าของบ้าน et al., 2010) รายละเอียดของคอลเลกชันเหล่านี้
จะถูกโพสต์ในเอเทรียมความหลากหลายทางชีวภาพระบบสารสนเทศโปรแกรม
และการบริหารจัดการที่บริต (http://atrium.andesamazon.org).
สารมาตรฐาน vanillin, vanillyl แอลกอฮอล์กรด vanillic,
เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ 4 hydroxybenzyl 4 hydroxybenzaldehyde, 4 hydroxybenzoic
กรดและเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ anisyl เช่นเดียวกับ Viscozyme (V2010 มาก #
085K1587) และ Celluclast (C2730 มาก # 074K1156) ที่ซื้อมา
จาก Sigma-Aldrich Glucovanillin ที่ได้รับจาก
ChromaDex เมทานอล (HPLC เกรด) และเอทานอล (99.9%) ที่ซื้อมา
จากเจเบเกอร์ จำกัด น้ำที่ใช้เป็นพัน-Q บริสุทธิ์.
การศึกษาได้รับการดำเนินการกับบุคคลที่สามผลไม้ต่อเดือน
ยกเว้นสำหรับเก้าเดือนที่หกผลไม้ ได้รับการพิจารณา.
2.2 ความมุ่งมั่นความชื้น
เมื่อมาถึงยังห้องปฏิบัติการไม่เกินสองวันหลังจากการเก็บเกี่ยว
ผลไม้ถูกแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวและทันทีที่
แห้ง (LABCONCO ระบบแห้งแช่แข็ง / Freezone 4.5) สำหรับ 3
5 วัน ความชื้นจะแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ [(wwet? wdry /
wwet) 100].
2.3 ตัวอย่างวานิลลาเตรียม
ผลไม้แห้งส่วนบุคคลมาบดให้เป็นผงละเอียดโดยใช้
เครื่องบดไฟฟ้า (Sigma-Aldrich รุ่น Z278181) สองกรัมของ
วัสดุพื้นดินที่ถูกวิธีการสกัดแบบ-สกัดด้วยน้ำ 48% EtOH
(200 มล.) เป็นเวลา 24 ชั่วโมง (Voisine, คาร์ไมเคิ Chalier ไมเออร์และโม,
1992) เอทานอลจะถูกลบออกโดยการระเหยสูญญากาศ
(150 mBar 40? C) และน้ำ, การแก้ปัญหาขุ่นถูกนำตัวไป
50 มล. ในขวดปริมาตร การย่อยสลายของ glucosides ก็
ทำได้โดยการบ่ม 10 มล. ของสารสกัดที่มี 150 LL ของ Viscozyme
และ 300 LL ของ Celluclast ที่ 45 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 8 ชั่วโมง (Inkubator 1000 / Unimax
1010 Heildolph Instr.) เอทานอล (4.5 มล.) ได้รับการเพิ่มและ
กระบวนการอย่างต่อเนื่องเป็นเวลา 1 ชั่วโมงเพื่อให้ส่วนไฮโดรไลซ์
ส่วนที่ไม่ใช่ไฮโดรไลซ์ตามขั้นตอนเดียวกันยกเว้น
นอกจากนี้เอนไซม์ ปริมาณของกลุ่มตัวอย่างทั้งสองมีการปรับ
ถึง 15 มล. ก่อนที่จะมีการวิเคราะห์ HPLC การทดลองได้ดำเนินการ
ในที่ซ้ำกัน วานิลลาก็ผ่านไปผ่าน 25 มม PTFE
รูป 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในกระดาษนี้ , หรือองค์ประกอบทางเคมีของ Wild V .
pompona ssp . ผลไม้ grandiflora มากกว่าสามและครึ่งเก้า
เดือนของการพัฒนา คือ รายงาน ส่วนปริมาณใช้
บนวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงกับ ไดโอด เรย์
ตรวจจับ ( hplc-dad ) ต่อไป วิธีพ่นละอองไฟฟ้า
ionisation liquid chromatography มวลสาร ( LC )

esi-ms ) ถูกใช้ช่วยในการจำแนกชนิดของสารประกอบทั้งหมด . นี้เป็นครั้งแรกที่ครอบคลุมการตรวจสอบทางเคมีของผลไม้ V

pompona ในระยะต่างๆของการพัฒนา ตลอดจนการศึกษาวิเคราะห์ก่อนทุ่มเทเพื่อลักษณะป่าอเมซอนได้

เปรูวานิลลาชนิด .
2 วัสดุและวิธีการ
2.1 . วัสดุพืชและสารเคมี
ดอกไม้ V . pompona ssp . grandiflora ( + + เอื้องสีตาล) โซโตโดยสิ้นเชิงถูก
มือผสมในเดือนตุลาคม 2008 ที่เลือกระบบนิเวศของพื้นที่ชุ่มน้ำ
Madre de Dios เปรู สำหรับคำอธิบายของเขตข้อมูลวิธีวิจัย
และที่อยู่อาศัย เห็นเจ้าของบ้าน et al . ( 2010 ) ผลเก็บเกี่ยวในช่วงเดือนสามและครึ่ง
9 หลังการผสมเกสร สมุนไพร
คูปองตัวอย่าง ( mc366 mc684 mc599 mc660 , , , ,
mc296 pm865 , และ jj2671 ) เก็บตัวและ
ชุดซ้ำกันฝากที่ซานมาร์คอสอย่างในลิมา , เปรู และที่
บริทสมุนไพรในฟอร์ตเวิร์ท , เท็กซัส ทำการระบุ
โดยสาย Neotropical กล้วยไม้ผู้เชี่ยวชาญ EA คริสตีสันและมิเกล
โซโตโดยสิ้นเชิง ( คฤหัสถ์ et al . , 2010 ) รายละเอียดของคอลเลกชัน
เหล่านี้ถูกโพสต์บนความหลากหลายทางชีวภาพข้อมูลระบบ , โปรแกรม
และการจัดการที่อังกฤษ ( http : / / ลาน andesamazon
. org )มาตรฐานสารวานิลลิน vanillyl , แอลกอฮอล์ , vanillic acid ,
4-hydroxybenzyl แอลกอฮอล์ 4-hydroxybenzaldehyde 4-hydroxybenzoic
anisyl , กรด และแอลกอฮอล์ รวมทั้ง viscozyme ( v2010 มาก#
085k1587 ) และ celluclast ( c2730 มาก# 074k1156 ) ซื้อ
จากซิกม่า – อัลดริช glucovanillin ได้จาก
chromadex . เมทานอล ( ป. 2 ) และเอทานอล ( 99.9% ) ซื้อ
จาก J.T . เบเกอร์บริษัทน้ำที่ใช้ศึกษาการ milli-q-purified .
3
แต่ละผลต่อเดือนยกเว้นเดือนเก้าในที่ 6 ผล พิจารณา
2.2 . ความชื้น ปริมาณ
เมื่อมาถึงห้องปฏิบัติการ ไม่เกิน 2 วัน หลังจากเก็บเกี่ยว
ผลไม้ถูกแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวและแห้งทันที
( แล็บคอนโก้ , แช่แข็งแห้ง / freezone 4.5 )
3 – 5 วันความชื้นจะแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ [ ( wwet  wdry /
wwet )  100 ] .
2.3 การเตรียมตัวอย่างโปรตีนวานิลลา
แต่ละผลไม้พื้นเพื่อผงละเอียดใช้เป็นเครื่องบดไฟฟ้า
( Sigma ) ดิช รุ่น z278181 ) สองกรัมของวัสดุพื้นดินถูก
1 สกัดด้วยสารละลายแอลกอฮอล์ 48 %
( 200 ml ) ตลอด 24 ชั่วโมง ( voisine คาร์ไมเคิล คอร์ , chalier &โมริน
, , , 1992 )เอทานอลจะถูกลบออกโดย
การระเหยสูญญากาศ ( 150 มิลลิบาร์ , 40  C ) และสารละลายขุ่น , โซลูชั่นถ่าย

50 ml ในขวดปริมาตร . การย่อยสลายของกลูโคไซด์เป็น
ความโดยการแช่สารสกัด 10 ml 150 จะ viscozyme
และ 300 จะ celluclast 45  C 8 H ( inkubator 1000 / Unimax
1010 , heildolph INSTR . ) เอทานอล ( 4.5 ml ) คือการเพิ่มและ
กระบวนการอย่างต่อเนื่องเป็นเวลา 1 ชั่วโมง เพื่อให้ผลผลิตไฮโดรไลซ์ เศษส่วน
ไม่ใช่ไฮโดรไลซ์ ส่วนตามขั้นตอนเดียวกันยกเว้น
เอนไซม์นอกจากนี้ ปริมาณของทั้งสองตัวอย่างปรับ
15 ml ก่อนการวิเคราะห์ปริมาณซูโครส ผลการทดลอง
ในที่ซ้ำกัน วานิลลาได้ผ่าน 25 มม. PTFE
รูปที่ 1