In mammalian spermiogenesis, sperm

In mammalian spermiogenesis, sperm mature during epididymal transit to get fertility. The pig sharing many
physiological similarities with humans is considered a promising animal model in medicine. We examined
the expression profiles of proteins from boar epididymal caput, corpus, and cauda sperm by two-dimensional
gel electrophoresis and peptide mass fingerprinting. Our results indicated that protein disulfide isomerase-
P5 (PDI-P5) human homolog was down-regulated from the epididymal corpus to cauda sperm, in contrast to
the constant expression of protein disulfide isomerase A3 (PDIA3) human homolog. To examine the
functions of PDIA3 and PDI-P5, we cloned and sequenced cDNAs of pig PDIA3 and PDI-P5 protein precursors.
Each recombinant pig mature PDIA3 and PDI-P5 expressed in Escherichia coli showed thiol-dependent
disulfide reductase activities in insulin turbidity assay. Although PDIA3 showed chaperone activity to
promote oxidative refolding of reduced denatured lysozyme, PDI-P5 exhibited anti-chaperone activity to
inhibit oxidative refolding of lysozyme at an equimolar ratio. SDS-PAGE and Western blotting analysis
suggested that disulfide cross-linked and non-productively folded lysozyme was responsible for the antichaperone
activity of PDI-P5. These results provide a molecular basis and insights into the physiological roles
of PDIA3 and PDI-P5 in sperm maturation and fertilization.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ใน mammalian spermiogenesis อสุจิเติบโตในระหว่างขนส่ง epididymal จะอุดมสมบูรณ์ หมูที่ใช้ร่วมกันหลายสรีรวิทยาความคล้ายคลึงกับมนุษย์ถือเป็นแบบสัตว์สัญญาในยา เราตรวจสอบส่วนกำหนดค่านิพจน์ของโปรตีนจากหมู epididymal caput คอร์พัสคริ และ cauda สเปิร์มโดยสองเจ electrophoresis และเพปไทด์ลายพิมพ์จำนวนมาก ผลของเราระบุว่า โปรตีนไดซัลไฟด์ไอโซเมอเรส-P5 homolog มนุษย์ (PDI-P5) ถูกลงควบคุมจากคอร์พัสคริ epididymal เพื่อ cauda สเปิร์ม ในทางตรงกันข้ามกับค่าคงที่นิพจน์ของโปรตีนไอโซเมอเรสไดซัลไฟด์ A3 (PDIA3) มนุษย์ homolog กัน การตรวจสอบการฟังก์ชัน PDIA3 และ PDI P5 เราโคลน และ cDNAs ตามลำดับของหมู PDIA3 และ PDI P5 precursors โปรตีนหมูแต่ละ recombinant ผู้ใหญ่ PDIA3 และแสดงใน Escherichia coli ที่พบขึ้นอยู่กับ thiol P5 PDIกิจกรรม reductase ไดซัลไฟด์ในการวิเคราะห์ความขุ่นของอินซูลิน แม้ว่า PDIA3 พบกิจกรรม chaperoneส่งเสริม refolding lysozyme denatured ลด oxidative, PDI P5 จัดแสดงกิจกรรม chaperone ป้องกันยับยั้ง refolding oxidative ของ lysozyme ที่มีอัตราส่วน equimolar หน้า SDS และเวสเทิร์น blotting วิธีการวิเคราะห์แนะนำไดซัลไฟด์ที่ cross-linked และพับไม่บันเทิงทั้ง lysozyme เป็นชอบที่ antichaperoneกิจกรรมของ PDI P5 ผลลัพธ์เหล่านี้มีพื้นฐานระดับโมเลกุลและลึกด้านสรีรวิทยาPDIA3 และ PDI-P5 ในพ่อแม่สเปิร์มและการปฏิสนธิ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ใน spermiogenesis เลี้ยงลูกด้วยนม, สเปิร์มเป็นผู้ใหญ่ในระหว่างการขนส่ง epididymal ที่จะได้รับความอุดมสมบูรณ์
หมูที่ใช้ร่วมกันหลายลักษณะคล้ายคลึงกับมนุษย์สรีรวิทยาถือเป็นรูปแบบของสัตว์ที่มีแนวโน้มในการแพทย์ เราตรวจสอบรูปแบบการแสดงออกของโปรตีนจากหัวหมูป่า epididymal, คลังและสเปิร์ม cauda สองมิติข่าวคราวและเปปไทด์มวลพิมพ์ลายนิ้วมือ ผลของเราแสดงให้เห็นว่าซัลไฟด์โปรตีน isomerase- P5 (PDI-P5) homolog ของมนุษย์ถูกควบคุมลงจากคลัง epididymal เพื่อ cauda สเปิร์มในทางตรงกันข้ามกับการแสดงออกของโปรตีนคงที่ซัลไฟด์isomerase A3 (PDIA3) homolog ของมนุษย์ เพื่อตรวจสอบการทำงานของ PDIA3 และ PDI-P5 เราโคลนและ cDNAs ติดใจของ PDIA3 สุกรและสารตั้งต้นโปรตีน PDI-P5. แต่ละหมู recombinant PDIA3 ผู้ใหญ่และ PDI-P5 แสดงใน Escherichia coli แสดงให้เห็น thiol ขึ้นอยู่กับกิจกรรมreductase ซัลไฟด์ในการวิเคราะห์ความขุ่นอินซูลิน . แม้ว่า PDIA3 แสดงให้เห็นว่ากิจกรรมพี่เลี้ยงเพื่อส่งเสริมrefolding ออกซิเดชันของไลโซไซม์เอทิลแอลกอฮอล์ลดลง PDI-P5 แสดงฤทธิ์ต้านพี่เลี้ยงในการยับยั้งการเกิดออกซิเดชันของ refolding ไลโซไซม์ที่อัตราส่วน equimolar SDS-PAGE และการวิเคราะห์ซับตะวันตกบอกว่าซัลไฟด์เชื่อมโยงและไม่งอกงามพับไลโซไซม์เป็นผู้รับผิดชอบสำหรับantichaperone กิจกรรมของ PDI-P5 ผลลัพธ์เหล่านี้ให้พื้นฐานระดับโมเลกุลและข้อมูลเชิงลึกในบทบาททางสรีรวิทยาของ PDIA3 และ PDI-P5 ในการเจริญเติบโตและการให้ปุ๋ยสเปิร์ม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในเขต spermiogenesis อสุจิผู้ใหญ่ในระหว่างการขนส่งดันได้รับความอุดมสมบูรณ์ หมูแบ่งปันความคล้ายคลึงกันทางสรีรวิทยาหลาย
กับมนุษย์ก็ถือว่าเป็นสัตว์ทดลองในการเข้าถึงยา เราตรวจสอบ
การแสดงออกโปรไฟล์ของโปรตีนจากหมูป่าดันศีรษะ , คอร์ปัสและอสุจิอสุจิโดยวิธีเจล 2
เปปไทด์มวลและลายนิ้วมือเราพบว่าโปรตีนไดไอโซเมอเรส -
P5 ( pdi-p5 ) homolog มนุษย์ลงระเบียบจากคอร์ปัส ดันให้อสุจิอสุจิ ในทางตรงกันข้ามกับ
การแสดงออกคงที่ของโปรตีนซัลไฟด์จาก A3 ( pdia3 ) homolog มนุษย์ ตรวจสอบการทำงานของ pdia3 pdi-p5
และเราสามารถทำการ cdnas ของ pdia3 หมูและ pdi-p5 โปรตีนตั้งต้น .
แต่ละแบบผู้ใหญ่ pdia3 pdi-p5 หมูและแสดงออกในแบคทีเรีย Escherichia coli พบว่าขนาดและกิจกรรมในการทดสอบขึ้นอยู่กับ
ไดระดับอินซูลิน แม้ว่า pdia3 พบกิจกรรมพี่เลี้ยง

refolding ส่งเสริมออกซิเดชันลดใช้ไลโซไซม์ pdi-p5 จัดแสดงกิจกรรมต่อต้าน , พี่เลี้ยง

refolding ยับยั้งปฏิกิริยาออกซิเดชันของไลโซไซม์ในๆอัตราส่วนใช้เอนไซม์วิเคราะห์
Western blotting พบว่าไดเชื่อมโยงและไม่งอกงามพับไลโซไซม์เป็นผู้รับผิดชอบ antichaperone
กิจกรรมของ pdi-p5 . ผลลัพธ์เหล่านี้มีพื้นฐานระดับโมเลกุลและข้อมูลเชิงลึกในบทบาททางสรีรวิทยา
ของ pdia3 pdi-p5 ในการเจริญเติบโตและอสุจิ และการปฏิสนธิ .