3% dried skimmed milk in 0.01 mol L

3% dried skimmed milk in 0.01 mol L−1 phosphate buffered saline (PBS, pH 7.4) (250 μL/well) was added into the wells and incubated for 30 min at 37 °C. Diluted mAb was added into the wells and incubated for 1 h at 37 °C. Goat anti-mouse IgG conjugated with AP or HRP with suitable dilution was added and incubated for another 1 h at 37 °C. The AP conjugate was detected with p-nitrophenyl phosphate substrate at 1 mg mL−1 in 10% diethanolamine buffer (pH 9.8), while the HRP conjugate was detected with TMB (3,3′,5,5′-tetramethylbenzidine) substrate. Each step was followed by four times washing with PBST (0.01 mol L−1 PBS containing 0.05% Tween-20, pH 7.4). The OD405 or OD450 were measured with a Microplate Reader Model 680 (BIO-RAD, Hercules, CA, USA). The sample was considered to be positive when its absorbance value was at least three times greater than the negative control.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3% แห้งนมขาดมันเนยใน 0.01 โมล L−1 ฟอสเฟต buffered น้ำเกลือ (PBS ค่า pH 7.4) (250 μL/ดี) ถูกเพิ่มเข้าไปในบ่อ และ incubated ใน 30 นาทีที่ 37 องศาเซลเซียส เพิ่มเข้าไปในบ่อแตกออกมาบ และ incubated สำหรับ h 1 ที่ 37 องศาเซลเซียส IgG กลวงกับ AP หรือ HRP เจือจางเหมาะกับเมาส์ป้องกันแพะเพิ่ม และ incubated สำหรับ h 1 อีกที่ 37 องศาเซลเซียส ค่าสังยุค AP พบกับพื้นผิวฟอสเฟต p nitrophenyl ที่ mL−1 1 มิลลิกรัมใน diethanolamine 10% บัฟเฟอร์ (pH 9.8), ในขณะ HRP ค่าสังยุคพบกับทหารไทย (3, 3′, 5, 5′-tetramethylbenzidine) พื้นผิว แต่ละขั้นตอนถูกตามล้างสี่เท่ากับ PBST (0.01 โมล L−1 PBS ประกอบด้วย 0.05% Tween-20 ค่า pH 7.4) OD405 หรือ OD450 ได้วัด ด้วยการ Microplate Reader รุ่น 680 (BIO RAD เฮอร์คิวลิส CA, USA) ตัวอย่างที่ถือเป็นค่าบวกเมื่อค่า absorbance ของน้อยสามครั้งมากกว่าควบคุมลบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3% แห้งนมพร่องมันเนยใน 0.01 mol L-1 น้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (พีบีเอสพีเอช 7.4) (250 ไมโครลิตร / ดี) ถูกเพิ่มเข้าไปในหลุมและบ่มเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิ 37 ° C ปรับลด mAb ถูกเพิ่มเข้าไปในหลุมและบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 ° C แพะ IgG ป้องกันเมาส์ผันกับ AP หรือ HRP กับการลดสัดส่วนที่เหมาะสมถูกเพิ่มเข้ามาและบ่มอีก 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ผัน AP ได้รับการตรวจพบสารตั้งต้นที่มีฟอสเฟต P-nitrophenyl ณ วันที่ 1 มก. mL-1 ใน 10% บัฟเฟอร์ Diethanolamine (pH 9.8) ในขณะที่ผัน HRP พบกับทหารไทย (3,3 ', 5,5'-Tetramethylbenzidine) สารตั้งต้น แต่ละขั้นตอนตามมาด้วยสี่ครั้งล้างด้วย PBST (0.01 mol L-1 พีบีเอสที่มี 0.05% Tween-20, ค่า pH 7.4) OD405 หรือ OD450 ถูกวัดด้วยเครื่องอ่านไมโครรุ่น 680 (BIO-RAD, Hercules, CA, USA) ตัวอย่างที่ได้รับการพิจารณาให้เป็นบวกเมื่อค่าการดูดกลืนแสงของมันคืออย่างน้อยสามครั้งยิ่งใหญ่กว่าการควบคุมเชิงลบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 แห้งนมใน 0.01 mol − 1 ลิตรฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( PBS ( pH 7.4 ) ( 250 μ L / ดี ) ถูกเพิ่มลงในบ่อบ่มเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิ 37 องศา ซึ่งถูกเพิ่มลงในบ่อ เมื่อบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 37 องศา แพะป้องกันเมาส์ IgG conjugated ด้วยอับ หรือ HRP กับการเพิ่มอุณหภูมิที่เหมาะสม และอีก 1 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 37 องศาAP ) ที่ตรวจพบด้วย p-nitrophenyl ฟอสเฟตตั้งต้นที่ 1 มิลลิกรัม ml − 1 ใน 10 % ไดเอทาโนลามีนบัฟเฟอร์ pH 9.8 ) ในขณะที่ HRP ) ที่ตรวจพบด้วย TMB ( 3 , 3 - 5 , 5 ’’ , tetramethylbenzidine ) สาร แต่ละขั้นตอนตามด้วยสี่ครั้ง ล้างด้วย pbst ( 0.01 โมล L − 1 ช่อง ที่มี tween-20 0.05 เปอร์เซ็นต์พีเอช 7.4 )การ od405 หรือ od450 วัดแบบอ่านพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยเป็น 680 ( Bio-rad , Hercules , CA , USA ) ตัวอย่างก็ถือว่าเป็นบวกเมื่อค่าการดูดกลืนแสงอย่างน้อยสามครั้งมากกว่าควบคุมลบ