2.6. Saccharification of pretreated

2.6. Saccharification of pretreated corn stover
The enzymatic saccharification of the biologically pretreated
corn stover was performed by shaking slowly (100 rpm) at 45
C for
72 h after diluting the pretreated material to 2% (w/v) solid level
with 50 mM citrate-phosphate buffer, pH 5.0 and adding a filter
sterilized enzyme cocktail of 3 commercial enzyme preparations.
The enzyme cocktail contained 50 mL Celluclast, 5 mL Novozyme 188
and 50 mL Fiberzyme per g of corn stover. After enzymatic hydrolysis,
the residual solids were separated from the liquid by centrifugation
(12,000 g; 10 min) before using the liquid portion as
enzymatically saccharified corn stover hydrolyzate. The cocktail of
commercial enzyme preparations used for enzymatic saccharifi-
cation contained small quantities of glucose. For simplification
purpose, the quantity of glucose present in the enzyme cocktail was
subtracted from the measured glucose in each case.
2.7. Ethanol production from glucose and xylose
The seed cultures of all 26 white-rot fungal strains were prepared
as described above and the cell concentration was adjusted to
1 mg/mL for each case. For semi-aerobic fermentation, 40 mL of the
liquid medium (1 g NH4NO3, 0.8 g KH2PO4, 0.2 g Na2HPO4, 0.5 g
MgSO4, 7H2O and 2 g yeast extract per L, pH 6.0) was used in 50 mL
Erlenmeyer flask. The medium containing either 1% (w/v) glucose
or 1% (w/v) xylose was inoculated with 4 mL of the seed culture and
incubated at 130 rpm and 28
C for 3 days. For aerobic fermentation,
10 mL of the same liquid medium was used in 50 mL Erlenmeyer
flask. The medium containing either 1% (w/v) glucose or 1%
(w/v) xylose was inoculated with 1 mL of the seed culture and
incubated at 250 rpm and 28
C for 3 days. Samples were taken at
periodic intervals for analysis of substrate utilization and ethanol
production by HPLC.
2.8. Analytical procedures
The composition of corn stover with respect to cellulose,
hemicellulose, lignin and ash contents was determined using the
standard laboratory analytical procedures for biomass analysis
provided by National Renewable Energy Laboratory (NREL),
Golden, CO, USA (Sluiter et al., 2008a, b). Each analysis was performed
in duplicate. Moisture content was determined using a
30 B.C. Saha et al. / International Biodeterioration & Biodegradation 109 (2016) 29e35
moisture analyzer (Mark 2, Sartorius Mechatronics Corp., Bohemia,
NY, USA). Sugars, ethanol, furfural, and hydroxymethyl furfural
(HMF) were analyzed by HPLC (Saha and Bothast, 1999). The separation
system consisted of a fully integrated solvent delivery system
(LC-20AD Prominence, Shimadzu America, Inc., Columbia, MD,
USA) equipped with an SIL-20AC autosampler, RID-10A refractive
index detector, a SDP-20A UV detector, a CTO-10AS VP column
heater and a computer software based integration system (LC solutions
1.23 SP1, Shimadzu). Two ion moderated partition chromatography
columns (Aminex HPX-87P with De-ashing and CarboP
micro-guard cartridges, Aminex HPX 87H with Cation H microguard
cartridge) were used. The Aminex HPX-87P column was
maintained at 85
C, and the sugars, furfural and HMF were eluted
with Milli-Q filtered water at a flow rate of 0.6 mL/min. The Aminex
HPX-87H column was maintained at 65
C, and the sugars and
ethanol were eluted with 10 mM HNO3 prepared using Milli-Q
filtered water at a flow rate of 0.6 mL/min. Peaks were detected
by refractive index or UV absorption (277 nm) and were identified
and quantified by comparison to retention times of authentic
standards (glucose, xylose, arabinose, galactose, ethanol, furfural
and HMF). The yield of total sugars was calculated by the procedure
provided by NREL (Sluiter et al., 2008a).
2.9. Statistical analysis
All experiments were performed in triplicate. Data were statistically
analyzed by using SigmaPlot® 12 (Systat Software, Inc., San
Jose, CA, USA). Mean values were presented with standard deviations.
A single factor ANOVA was conducted on each measured
variable to test for significant differences between species
(p < 0.05). Following this, a Tukey's HSD (honest significant difference)
means comparison was run to determine which species
were significantly different from each other as well as which were
significantly better or worse than control experiments. Reported
values are the means and standard deviations from ANOVA. Letters
next to each mean value indicate differences.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6. saccharification ของ stover ข้าวโพด pretreatedSaccharification เอนไซม์ของ pretreated ชีวภาพทำข้าวโพด stover โดยสั่นช้า (100 รอบต่อนาที) ที่ 45 องศาสำหรับ72 ชม.หลังจากเจือจางวัสดุระดับแข็ง 2% (w/v) ที่ pretreatedบัฟเฟอร์ฟอสเฟตซิเตรต 50 มม. ค่า pH 5.0 และเพิ่มตัวกรองค็อกเทลเอนไซม์ผ่านการฆ่าเชื้อการเตรียมเอนไซม์ทางการค้า 3 การเอนไซม์ค็อกเทลอยู่ 50 mL Celluclast, 5 มล. Novozyme 188และ 50 mL Fiberzyme ต่อกรัมข้าวโพด stover หลังจากสลายเอนไซม์ของของแข็งที่เหลือถูกแยกออกจากของเหลว โดยการหมุนเหวี่ยง(12,000 g; 10 นาที) ก่อนที่จะใช้ส่วนที่เป็นของเหลวenzymatically saccharified hydrolyzate stover ข้าวโพด ค็อกเทลการเตรียมเอนไซม์ทางการค้าที่ใช้สำหรับเอนไซม์ saccharifi-ไอออนประกอบด้วยขนาดเล็กปริมาณของกลูโคส สำหรับเข้าใจง่ายวัตถุประสงค์ ปริมาณของน้ำตาลกลูโคสที่มีอยู่ในเอนไซม์ค็อกเทลหักออกจากกลูโคสวัดในแต่ละกรณี2.7. เอทานอลผลิตจากกลูโคสและสารวัฒนธรรมเมล็ดของสายพันธุ์เชื้อราขาวเน่าที่ 26 ทั้งหมดเตรียมไว้ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น และความเข้มข้นของเซลล์เปลี่ยนไป1 mg/mL สำหรับแต่ละกรณี สำหรับแอโรบิกกึ่งหมัก 40 มล.ของการเหลว (1 g NH4NO3, 0.8 กรัม KH2PO4, Na2HPO4, 0.2 กรัม 0.5 กรัมMgSO4, 7H2O และ 2 กรัมสารสกัดยีสต์ต่อ L ค่า pH 6.0) ใช้ในขนาด 50 มล.Erlenmeyer หนาว สื่อที่ประกอบด้วยทั้งกลูโคส 1% (w/v)หรือ 1% (w/v) สารถูก inoculated กับ 4 mL ของเมล็ด และได้รับการกกที่ 130 รอบต่อนาทีและ 28 C 3 วัน สำหรับหมักแอโรบิกใช้ในขนาด 50 มล. Erlenmeyer 10 มล.ของเหลวเดียวกันหนาวนี้ สื่อที่ประกอบด้วยกลูโคส 1% (w/v) หรือ 1%(w/v) สารถูก inoculated กับ 1 มิลลิลิตรของเมล็ด และได้รับการกกที่ 250 รอบต่อนาทีและ 28 C 3 วัน ตัวอย่างที่ถ่ายที่ระยะ ๆ เพื่อวิเคราะห์การใช้ประโยชน์พื้นผิวและเอทานอลผลิต โดย HPLC2.8 การวิเคราะห์ขั้นตอนองค์ประกอบของข้าวโพด stover เกี่ยวกับเซลลูโลสกำหนดเนื้อหา hemicellulose ลิกนิ นและเถ้าโดยใช้การขั้นตอนวิเคราะห์ห้องปฏิบัติการมาตรฐานสำหรับการวิเคราะห์ของชีวมวลให้โดยชาติทดแทนพลังงานห้องปฏิบัติการ (NREL),โกลเด้น CO สหรัฐอเมริกา (Sluiter et al. 2008a, b) ดำเนินการวิเคราะห์แต่ละในรายการซ้ำ กำหนดความชื้นโดยใช้การ30 ก่อนนั้นบริษัทสหร้อยเอ็ดนานาชาติ Biodeterioration และย่อยสลายทางชีวภาพ 109 29e35 (2016)เครื่องวิเคราะห์ความชื้น (เครื่องหมาย 2 บริษัทซาร์โทเรียสคคา Corp. โบฮีเมียนิวยอร์ก สหรัฐอเมริกา) น้ำตาล เอทานอล furfural และ hydroxymethyl furfural(HMF) ได้วิเคราะห์ ด้วย HPLC (สหและ Bothast, 1999) การแยกระบบประกอบด้วยระบบการจัดส่งตัวทำละลายที่ครบวงจร(LC 20AD โดดเด่น อเมริกา Shimadzu, Inc. โคลัมเบีย MDประเทศสหรัฐอเมริกาพร้อมกับการสามารถ 20AC ภาษาศาสตร์ RID 10A หักเหดัชนีตรวจจับ เครื่องตรวจจับ UV SDP 20A คอลัมน์ VP CTO 10ASฮีตเตอร์และซอฟต์แวร์คอมพิวเตอร์ที่ใช้ระบบรวม (LC โซลูชัน1.23 SP1, Shimadzu) สองไอออน chromatography พาร์ติชันที่มีควบคุมคอลัมน์ (Aminex HPX - 87P De ashing และ CarboPไมโคร-รักษาตลับหมึก Aminex HPX 87H กับ H ไอออน microguardตลับหมึก) ใช้ มีคอลัมน์ Aminex HPX - 87Pรักษาที่ 85 C และน้ำตาล furfural และ HMF ถูก elutedกับหนึ่ง-Q กรองน้ำอัตราการไหล 0.6 mL/นาที Aminex การคอลัมน์ HPX - 87H ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 65 C และน้ำตาล และเอทานอลถูก eluted กับ 10 มม. HNO3 ปรุงหนึ่ง-Qกรองน้ำที่อัตราการไหลเครื่องพบยอดขั้นต่ำ 0.6 มล.ดัชนีหักเหของแสงการดูดซึมรังสี UV (277 nm) และระบุและวัด โดยเปรียบเทียบกับเวลาเก็บรักษาของแท้มาตรฐาน (กลูโคส สาร arabinose กาแล็กโทส เอทานอล furfuralและ HMF) ผลผลิตของน้ำตาลรวมคำนวณตามกระบวนการนี้โดย NREL (Sluiter et al. 2008a)2.9. สถิติวิเคราะห์ดำเนินการทดลองทั้งหมดลข้อ ข้อมูลทางสถิติได้วิเคราะห์ โดยใช้ SigmaPlot ® 12 (San Systat ซอฟต์แวร์ Inc.Jose, CA สหรัฐอเมริกา) หมายถึงค่าที่แสดง ด้วยค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานปัจจัย ANOVA ดำเนินแต่ละวัดตัวแปรในการทดสอบความแตกต่างที่สำคัญระหว่างสายพันธุ์(p < 0.05) ต่อไปนี้ Tukey ของ HSD (ความแตกต่างสำคัญซื่อสัตย์)เปรียบเทียบวิธีรันการตรวจสอบชนิดแตกต่างจากกันเช่นเดียวกับอย่างมีนัยสำคัญที่ดีกว่า หรือแย่กว่าการทดลองควบคุม รายงานค่าพาหนะและค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานจาก ANOVA ได้ ตัวอักษรติดหมายความว่าแต่ละค่าบ่งชี้ความแตกต่างกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 saccharification ของซากถั่วลิสงข้าวโพดปรับสภาพ
saccharification ของเอนไซม์ปรับสภาพทางชีวภาพ
ซังข้าวโพดที่ได้ดำเนินการโดยการเขย่าช้า (100 รอบต่อนาที) ที่ 45? C เป็นเวลา
72 ชั่วโมงหลังจากเจือจางวัสดุปรับสภาพถึง 2% (w / v) ระดับของแข็ง
ที่มีขนาด 50 มม citrate- ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH 5.0 และการเพิ่มตัวกรอง
ฆ่าเชื้อค๊อกเทลเอนไซม์ 3 เตรียมเอนไซม์เชิงพาณิชย์.
ค๊อกเทลเอนไซม์ที่มีอยู่ 50 มล Celluclast 5 มล Novozyme 188
และ 50 มล Fiberzyme ต่อกรัมของซังข้าวโพด หลังจากที่ย่อยโปรตีนใน
ของแข็งที่เหลือถูกแยกออกจากของเหลวโดยการหมุนเหวี่ยง
(12,000 กรัม 10 นาที) ก่อนที่จะใช้ส่วนที่เป็นของเหลว
saccharified เอนไซม์ซังข้าวโพดไฮโดรไล ค๊อกเทลของ
การเตรียมเอนไซม์ทางการค้าที่ใช้สำหรับเอนไซม์ saccharifi-
ไอออนที่มีขนาดเล็กปริมาณของน้ำตาลกลูโคส สำหรับความเรียบง่าย
วัตถุประสงค์ปริมาณกลูโคสในปัจจุบันค็อกเทลเอนไซม์ที่ถูก
หักออกจากวัดน้ำตาลกลูโคสในแต่ละกรณี.
2.7 เอทานอลจากการผลิตกลูโคสและไซโลส
เมล็ดวัฒนธรรมทั้งหมด 26 สายพันธุ์ของเชื้อราสีขาวเน่าได้จัดทำขึ้น
ตามที่อธิบายไว้ข้างต้นและความเข้มข้นของเซลล์ได้รับการปรับให้
1 mg / ml สำหรับแต่ละกรณี สำหรับการหมักกึ่งแอโรบิก 40 มลของ
อาหารเหลว (1 กรัม NH4NO3 0.8 กรัม KH2PO4 0.2 กรัม Na2HPO4, 0.5 กรัม
MgSO4, 7H2O และ g สารสกัดจากยีสต์ 2 ต่อลิตรค่า pH 6.0) ถูกนำมาใช้ใน 50 มล
Erlenmeyer ขวด สื่อที่มีทั้งแบบ 1% (w / v) กลูโคส
หรือ 1% (w / v) ไซโลถูกเชื้อด้วย 4 มิลลิลิตรของวัฒนธรรมเมล็ดและ
บ่มที่ 130 รอบต่อนาทีและ 28 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 วัน สำหรับการหมักแอโรบิก
10 มลอาหารเหลวเดียวกันถูกใช้ใน 50 มล Erlenmeyer
ขวด สื่อที่มีทั้งแบบ 1% (w / v) กลูโคสหรือ 1%
(w / v) ไซโลถูกเชื้อด้วย 1 มิลลิลิตรของวัฒนธรรมเมล็ดและ
บ่มที่ 250 รอบต่อนาทีและ 28 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 วัน ตัวอย่างที่ถูกนำมาใน
ช่วงระยะสำหรับการวิเคราะห์การใช้สารตั้งต้นและเอทานอล
ที่ผลิตโดยวิธี HPLC.
2.8 การวิเคราะห์
องค์ประกอบของซังข้าวโพดที่เกี่ยวกับเซลลูโลส
เฮมิเซลลูโลสลิกนินและเถ้าเนื้อหาถูกกำหนดโดยใช้
การวิเคราะห์ทางห้องปฏิบัติการมาตรฐานสำหรับการวิเคราะห์ชีวมวล
ให้โดยพลังงานทดแทนแห่งชาติทดลอง (NREL),
โกลเด้น, CO, สหรัฐอเมริกา (Sluiter et al., 2008a b) แต่ละวิเคราะห์ได้ดำเนินการ
ในที่ซ้ำกัน ความชื้นถูกกำหนดโดยใช้
30 ปีก่อนคริสตกาลเครือสหพัฒน์, et al / Biodeterioration และการสลายตัวทางชีวภาพ 109 (2016) 29e35
วิเคราะห์ความชื้น (2 มาร์ค, Sartorius Mechatronics คอร์ป, โบฮีเมีย,
นิวยอร์ก, สหรัฐอเมริกา) น้ำตาลเอทานอลเฟอร์ฟูรัลและ hydroxymethyl เฟอร์ฟูรัล
(HMF) ได้รับการวิเคราะห์โดยวิธี HPLC (เครือสหพัฒน์และ Bothast, 1999) การแยก
ระบบประกอบด้วยระบบการจัดส่งแบบครบวงจรตัวทำละลาย
(LC-20AD ชื่อเสียง Shimadzu America, Inc, โคลัมเบีย, MD,
USA) พร้อมกับ autosampler SIL-20AC กำจัด-10A หักเห
ตรวจจับดัชนีตรวจจับ SDP-20A รังสียูวี เป็น CTO-10AS คอลัมน์ VP
ทำความร้อนและซอฟแวร์คอมพิวเตอร์ระบบบูรณาการ (โซลูชัน LC
1.23 SP1, Shimadzu) สองไอออนโครมาโตพอสมควรพาร์ทิชัน
คอลัมน์ (Aminex HPX-87P กับ De-ashing และ CarboP
ตลับไมโครยาม Aminex HPX 87H กับ microguard ไอออนบวก H
ตลับ) ถูกนำมาใช้ คอลัมน์ Aminex HPX-87P ถูก
เก็บรักษาไว้ที่ 85 องศาเซลเซียสและน้ำตาล, เฟอร์ฟูรัลและ HMF ถูกชะ
กับ Milli-Q กรองน้ำที่อัตราการไหล 0.6 มิลลิลิตร / นาที Aminex
คอลัมน์ HPX-87H ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 65 องศาเซลเซียสและน้ำตาลและ
เอทานอลที่ถูกชะ 10 มิลลิ HNO3 เตรียมใช้ Milli-Q
กรองน้ำที่อัตราการไหล 0.6 มิลลิลิตร / นาที ยอดเขาที่ถูกตรวจพบ
โดยดัชนีหักเหหรือการดูดซึมรังสียูวี (277 นาโนเมตร) และมีการระบุ
และวัดโดยการเปรียบเทียบกับการเก็บรักษาเท่าของแท้
มาตรฐาน (กลูโคส, ไซโลส, อราบิโน, กาแลคเอทานอลเฟอร์ฟูรัล
และ HMF) อัตราผลตอบแทนของน้ำตาลรวมที่คำนวณได้จากขั้นตอนการ
ให้บริการโดย NREL (Sluiter et al., 2008a).
2.9 การวิเคราะห์สถิติ
การทดลองทั้งหมดถูกดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า ข้อมูลทางสถิติ
วิเคราะห์โดยใช้SigmaPlot® 12 (ซิสแตท Software, Inc, San
Jose, CA, USA) ค่าเฉลี่ยถูกนำเสนอด้วยค่าเบี่ยงเบนมาตรฐาน.
ปัจจัยเดียว ANOVA ได้ดำเนินการในแต่ละวัด
ตัวแปรในการทดสอบสำหรับความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างเผ่าพันธุ์
(p <0.05) ต่อไปนี้ของ Tukey HSD (ซื่อสัตย์แตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ)
หมายถึงการเปรียบเทียบกำลังวิ่งเพื่อตรวจสอบว่าสายพันธุ์ที่
มีความหมายแตกต่างจากคนอื่น ๆ รวมทั้งที่มี
อย่างมีนัยสำคัญที่ดีกว่าหรือเลวร้ายยิ่งกว่าการทดลองควบคุม รายงาน
ค่าเป็นวิธีการและค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานจากการวิเคราะห์ความแปรปรวน ตัวอักษร
ติดกันหมายถึงค่าบ่งบอกถึงความแตกต่าง