A simple and rapid method for analysis of the immunological effects of beta-glycans in mangrove crab (Scylla serrata) was established. Haemocytes were isolated from haemolymph and stained with 20 g/mL 3, 3-dihexyloxacarbocyanine (DiOC6) a fluorescent and lipophilic dye dissolved in Hanks’ balance salt solution at 4C for 10 min. After staining, flow cytometry was used to detect the changes in percentages of haemocytic populations. Flow cytometry parameters, FL-1 (green fluorescence; log) versus SSC (side scatter; linear), identified three haemocytic subpopulations, including hyalinocytes, semi-granulocytes, and granulocytes. FL-1 vs. SSC dot-plot of DiOC6-stained haemocytes displayed three cell subpopulations including hyalinocytes, semi-granulocytes, and granulocytes. Furthermore, cell proliferation and phenoloxidase (PO) activity were also assessed after stimulation by beta-glycans. There was no significant difference in cell proliferation between the control and laminarin- or zymosan-treated groups. However, the PO activity of the zymosan-treated group was significantly higher than that of the control and laminarin-treated groups in serum and intra-haemocytic components.
Key words: 3, 3-dihexyloxacarbocyanine, flow cytometer, haemocyte, mangrove crab, phenoloxidase.
และง่ายวิธีที่รวดเร็วในการวิเคราะห์ผลทางภูมิคุ้มกันวิทยาของเบต้า glycans ในปูแสม ( ปูทะเล ) ได้ก่อตั้งขึ้น ชนิดที่แยกได้จากเลือดและเปื้อนกับ 20 g / ml 3 , 3-dihexyloxacarbocyanine ( dioc6 ) เรืองแสงและลิโพฟิลิกย้อมละลายแฮงค์ ' สมดุลเกลือที่ 4 C 10 นาทีหลังจากการย้อมสี( การใช้ตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงในค่าร้อยละของประชากร haemocytic . พารามิเตอร์การไหล ( fl-1 , ( สีเขียวเรืองแสง ; เข้าสู่ระบบ ) เมื่อเทียบกับ SSC ( กระจาย ; ด้านเชิงเส้น ) ระบุ สามสอง haemocytic hyalinocytes , รวมทั้ง , และกรานูโลไซต์กึ่งกรานูโลไซต์ . fl-1 กับ SSC จุดพล็อต dioc6 ย้อมเม็ดเลือดเซลล์รวมทั้ง hyalinocytes แสดงสามสอง ,กรานูโลไซต์ กึ่ง และกรานูโลไซต์ . นอกจากนี้ การขยายตัวของเซลล์และฟีนอลออกซิเดส ( PO ) กิจกรรมยังประเมินหลังจากกระตุ้นด้วยเบต้า glycans . ไม่มีความแตกต่างระหว่างกลุ่มควบคุมและเซลล์ proliferation ลามินาริน - หรือ zymosan รักษากลุ่ม อย่างไรก็ตามกิจกรรมโปของ zymosan กลุ่มสูงกว่าของกลุ่มควบคุมและกลุ่มลามินารินในซีรั่ม และส่วนประกอบภายใน haemocytic .
คำสำคัญ : 3 , 3-dihexyloxacarbocyanine การใช้โมโน haemocyte , ป่าชายเลน , ปู , ฟีนอลออกซิเดส .
การแปล กรุณารอสักครู่..
