2.1.1. Shoot induction
Adventitious shoot formation directly from explants is definitely
a better approach than the callus method for clonal propagation of
plant species. Often callus produces abnormal plants while adventitious
shoots form uniform diploid individuals (Bhojwani and
Razdan, 1996). Primary regeneration studies in cyclamen focused
on the elimination of microbial contamination and then on vegetative
propagation. Different types of explants have been used
for shoot regeneration in cyclamen cultivars. Wainwright and
Harwood (1985) used aseptic seedlings for tissue culture. Hawkes
and Wainwright (1987) reported a method for adventitious leaf (i.e.,
shoot) induction with cotyledon, tuber, petiole and root explants
of aseptic seedlings on media containing both 6-benzyladenine
(BA; used synonymously throughout this review with BAP or
6-benzylaminopurine) and -naphthaleneacetic acid (NAA) in different
combinations. Cotyledon and tuber explants were most
capable of leaf regeneration compared with root and petiole
explants. Murasaki and Tsurushima (1988) used etiolated petioles
as explants and numerous adventitious shoots differentiated;
the authors were able to completely eliminate microbial contamination.
Schwenkel and Grunewaldt (1988) produced shoots from
peduncle explants. Dillen et al. (1996) investigated shoot induction
on long-term callus, which was obtained from leaf explants.
To obtain callus they cultured leaves on Murashige and Skoog
(1962) (MS) medium containing 2 mg l−1 NAA, 3.2–4 mg l−1 BA and
3.2–4 mg l−1 kinetin (Kin). Callus, which formed after 17 weeks,
was subcultured three times for a period of about 10 weeks after
callus was transferred to media with different PGRs (2 mg l−1 NAA,
4 mg l−1 BA and 4 mg l−1 Kin) and subcultured five times on this
medium. Each subculture lasted 6–7 weeks. The outer layer of callus
was brown and non-organogenic while yellowish callus was
highly organogenic. Organogenic tissue retained its organogenic
competence for at least two years through subcultures. Karam and
Al-Majathoub (2000b) studied wild C. persicum using mature tissue
(leaf disc, petiole, petal, and peduncle) cultured on MS medium
supplemented with BA or thidiazuron (TDZ). No shoots formed
on media with BA but in media containing TDZ, shoots formed,
although the success of the process depended significantly on
explant type, the best explant being the peduncle. Direct regeneration
was also possible from leaf explants originating from aseptic
seedlings on medium supplemented with NAA and TDZ in wild
cyclamen from Jordan (Karam and Al-Majathoub, 2000a). Moreover,
direct shoot regeneration was possible from tuber and leaf
explants excised from aseptic seedlings. The greatest percentage
shoot regeneration was from tuber sections cultured on medium
supplemented with BA or TDZ while petiole explants could not produce
shoots (Abu-Qaoud, 2004). In C. mirabile, shoots were obtained
from only tuber tissue when cultured on Bourgin and Nitsch (1967)
(BN) media containing indole-3-acetic acid (IAA) or NAA and Kin
(Yamaner and Erdag, 2008). More details regarding shoot induction
are shown in Table 1.
Micropropagation through callus induction in many cases
resulted in somaclonal variation. Adventitious shoots can obtain
directly from tissue without an intermediate callus phase. Thus, it
is a suitable means to mass produce true-to-type plants, although
the method is slow and laborious.
2.1.1 ยิงเหนี่ยวนำ
การก่อบังเอิญถ่ายได้โดยตรงจากชิ้นแน่นอน
วิธีการที่ดีกว่าวิธีแคลลัสเพื่อการเผยแผ่ clonal ของ
พันธุ์พืช แคลลัสมักจะผลิตพืชที่ผิดปกติในขณะที่บังเอิญ
หน่อบุคคลในรูปแบบซ้ำเครื่องแบบ (Bhojwani และ
Razdan, 1996) การฟื้นฟูการศึกษาประถม cyclamen ที่มุ่งเน้น
ในการกำจัดการปนเปื้อนของเชื้อจุลินทรีย์และจากนั้นในพืช
ขยายพันธุ์ ชนิดที่แตกต่างกันของชิ้นส่วนได้ถูกนำมาใช้
สำหรับการฟื้นฟูยิงพันธุ์ cyclamen โควต้าและ
ฮาร์วู้ด (1985) ใช้ต้นกล้าที่ปลอดเชื้อสำหรับการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ฮอว์ค
และเวนไรท์ (1987) รายงานวิธีการใบบังเอิญ (เช่น
ยิง) การเหนี่ยวนำที่มีใบเลี้ยง, หัว, ก้านใบและชิ้นส่วนราก
ของต้นกล้าปลอดเชื้อในสื่อที่มีทั้ง 6 benzyladenine
(BA; ใช้ synonymously ตลอดความคิดเห็นนี้กับ BAP หรือ
6 benzylaminopurine) และ? กรด -naphthaleneacetic (NAA) ที่แตกต่างกันในการ
รวมกัน ใบเลี้ยงหัวและชิ้นส่วนใหญ่
มีความสามารถในการฟื้นฟูเมื่อเทียบกับใบรากและก้านใบ
ชิ้น มูราซากิและ Tsurushima (1988) ที่ใช้ก้านใบ etiolated
เป็นชิ้นและยอดบังเอิญจำนวนมากที่แตกต่าง;
. ผู้เขียนก็สามารถที่จะสมบูรณ์กำจัดการปนเปื้อนของเชื้อจุลินทรีย์
และ Schwenkel Grunewaldt (1988) ผลิตจากหน่อ
ดอกชิ้น Dillen et al, (1996) การตรวจสอบการเหนี่ยวนำการถ่าย
แคลลัสในระยะยาวซึ่งได้รับมาจากชิ้นส่วนใบ.
ที่จะได้รับแคลลัสที่พวกเขาเลี้ยงบนอาหารสูตร Murashige ใบและ Skoog
(1962) (MS) ที่มีขนาดกลาง 2 มิลลิกรัมต่อลิตร-1 NAA, 3.2-4 มิลลิกรัม l- 1 ปริญญาตรีและ
3.2-4 มิลลิกรัม l-1 kinetin (ญาติ) แคลลัสซึ่งเกิดขึ้นหลังจาก 17 สัปดาห์ที่ผ่านมา
ได้รับการเลี้ยงสามครั้งเป็นระยะเวลาประมาณ 10 สัปดาห์หลังจากที่
แคลลัสได้รับการถ่ายโอนไปยังสื่อที่มี PGRs แตกต่างกัน (2 มิลลิกรัมต่อลิตร NAA-1,
4 มิลลิกรัมต่อลิตร BA-1 และ 4 มิลลิกรัมต่อลิตร Kin-1) และเลี้ยงห้าครั้งเกี่ยวกับเรื่องนี้
กลาง วัฒนธรรมแต่ละกินเวลา 6-7 สัปดาห์ที่ผ่านมา ชั้นนอกของแคลลัส
เป็นสีน้ำตาลและไม่ organogenic แคลลัสในขณะที่สีเหลืองเป็น
organogenic สูง เนื้อเยื่อ Organogenic สะสม organogenic ของ
ความสามารถอย่างน้อยสองปีที่ผ่านมาวัฒนธรรม รามและ
อัล Majathoub (2000b) การศึกษาป่าซี persicum โดยใช้เนื้อเยื่อผู้ใหญ่
(แผ่นใบก้านใบกลีบดอกและดอก) เพาะเลี้ยงบนอาหารสูตร MS
ที่เติม BA หรือ thidiazuron (TDZ) หน่อที่เกิดขึ้นไม่
เกี่ยวกับสื่อที่มี BA แต่ในสื่อที่มี TDZ, หน่อเกิดขึ้น
แม้ว่าความสำเร็จของกระบวนการขึ้นอย่างมีนัยสำคัญใน
ประเภทชิ้นส่วน, ชิ้นที่ดีที่สุดเป็นดอก ฟื้นฟูโดยตรง
ก็ยังเป็นไปได้จากใบชิ้นปลอดเชื้อที่มาจาก
ต้นกล้าในสื่อเสริมด้วย NAA และ TDZ อยู่ในป่า
cyclamen จาก Jordan (รามและอัล Majathoub, 2000a) นอกจากนี้
การฟื้นฟูยิงโดยตรงเป็นไปได้จากหัวและใบ
ตัดชิ้นส่วนจากต้นกล้าที่ปลอดเชื้อ ที่ยิ่งใหญ่ที่สุดร้อยละ
ฟื้นฟูยิงมาจากส่วนหัวเพาะเลี้ยงบนอาหาร
เสริมด้วยปริญญาตรีหรือ TDZ ขณะที่ก้านใบชิ้นส่วนไม่สามารถผลิต
หน่อ (อาบู Qaoud, 2004) ในซี mirabile หน่อที่ได้รับ
จากเนื้อเยื่อพืชเฉพาะเมื่อเลี้ยงบน Bourgin และ Nitsch (1967)
(BN) สื่อที่มี indole-3-กรดอะซิติก (IAA) หรือ NAA และญาติ
(Yamaner และ Erdag 2008) รายละเอียดเพิ่มเติมเกี่ยวกับการเหนี่ยวนำการถ่ายภาพ
ที่จะแสดงในตารางที่ 1
การขยายผ่านการเหนี่ยวนำแคลลัสในหลายกรณี
ผลในการแปรผันของเซลล์ร่างกาย หน่อบังเอิญได้รับ
โดยตรงจากเนื้อเยื่อโดยไม่ต้องแคลลัสระยะกลาง ดังนั้นจึง
เป็นวิธีการที่เหมาะสมในการผลิตมวลจริงมีพืชชนิดแม้ว่า
วิธีการที่ช้าและลำบาก
การแปล กรุณารอสักครู่..
