According to the method described in a previous study , 2,7-dichlorodihydrofluorescein diacetate (27-DCFH-DA) was carried out to measure the capacity of nicotine
to generate ROS in a HepG2 cell. In brief, about 5 × 104 cells
were seeded into 96 wells of a black microplate. When cells were
confluent, cell media were eliminated and washed by PBS. For
the treatment, RES (50, 100, and 250 μM), OXY (50, 100, and
250 μM), a mixture of RES and OXY (50 and 100 μM), and
EESC (1.8 mg/mL) were treated into cells for 2 h. Then, cell
media containing IC50 value of nicotine were suspended into the
cells and maintained for 24 h in an incubator. After treatment, cell
media were sucked and cells were dislocated by trypsin EDTA,
and then it was treated with 27-DCFH-DA. After 30 min of
reaction, the cell fluorescence was measured using a microplate reader at 488 nm for excitation and at 525 nm
for emission.
ตามวิธีการอธิบายไว้ในก่อนหน้านี้ศึกษา 2, 7 - dichlorodihydrofluorescein diacetate (2 7 - DCFH-ดา) เพื่อวัดความจุของนิโคตินสร้าง ROS ในเซลล์ HepG2 สรุป เกี่ยวกับ 5 × 104 เซลล์ถูกเตรียมเป็นหลุม 96 ของ microplate ดำ เมื่อเซลล์ถูกconfluent สื่อเซลล์ถูกตัดออก และล้าง ด้วย PBS สำหรับการรักษา RES (50, 100 และ 250 ไมครอน), OXY (50, 100 และΜ m 250), มีส่วนผสมของ RES และ OXY (μ m 50 และ 100), และEESC (1.8 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร) ได้รับการรักษาในเซลล์ 2 ชม แล้ว เซลล์สื่อประกอบด้วยค่า IC50 ของนิโคตินถูกหยุดชั่วคราวเป็นการเซลล์ และรักษาสำหรับ 24 ชั่วโมงในตู้อบที่ หลังการรักษา เซลล์สื่อถูกดูด และเซลล์ถูกหิน โดย EDTA ทริปซินแล้ว ก็ถือว่า 7 2 - DCFH-DA. หลังจาก 30 นาทีปฏิกิริยา การเรืองแสงของเซลล์ที่มีวัดโดยใช้เครื่องอ่าน microplate ที่ 488 nm สำหรับกระตุ้น และ 525 nmสำหรับการปล่อย
การแปล กรุณารอสักครู่..