VIII. Additional Mutations In The V

VIII. Additional Mutations In The VDR Gene


A. Hinge region mutations
A premature stop codon caused by an amber mutation
(CAG to TAG) in exon 4 was found by Kristjansson et al. (260)
in a Turkish patient (F32) with HVDRR . Previous studies
using fibroblasts from this patient had demonstrated an absence
of ligand binding and 1,25-(OH)2D3 responses (202).
This premature stop mutation occurs at Gln 152 and deletes
306 aa of the VDR. As expected, the Gln152 stop mutant VDR
was unresponsive to 1,25-(OH)2D3 in gene activation assays.
The Gln152 stop mutation was also identified by Wiese et al.
(245) in a HVDRR patient (F32) previously reported by Barsony
et al. (202).
B. Splice site mutations
Hawa et al. (264) examined the molecular cause of HVDRR
with alopecia in a young Greek girl (F50). Using RT-PCR and
DNA sequencing, they showed that the patient’s RNA sequence
diverged from the wild-type sequence at nucleotide
147. The sequence from exon 4 was deleted and the sequence
that followed was from exon 5. Sequence analysis of the VDR
chromosomal gene found no mutations in the exons; however,
a G-to-C base change was found in the 59-end of intron
E (Fig. 10). This single nucleotide change converts the wildtype
sequence from GTAAGT to GTAACT and eliminates
the 59-donor splice site [consensus sequence: GT(A/G)AGT].
The loss of the 59-donor splice site caused exon 4 to be
skipped in the processing of the VDR transcript. The loss of
exon 4 introduced a reading frameshift that resulted in a
premature stop codon in exon 5. The mutant protein contains
92 aa of the wild-type sequence and an additional 6 aa due
to the frameshift (Glu92fs) (Fig. 12). The shortened VDR had
no [3H]1,25-(OH)2D3 binding and failed to induce 24-hydroxylase
activity.
A splice site mutation was also identified in a German
patient (F56) with HVDRR and alopecia (246). Studies of the
patient’s fibroblasts showed absent [3H]1,25-(OH)2D3 binding
and failure to induce 24-hydroxylase activity with 1,25-
(OH)2D3 treatment. In this case, a cryptic 59-donor splice site
was generated in exon 6. The mutation in this case, a C-to-G
transition, changed the sequence from GTCAGT to GTGAGT.
This single base change did not alter the amino acid
coding sequence in exon 6 but introduced a splice site that
could be recognized by the spliceosome complex during
RNA processing. As a result, the mutation caused a 56-bp
deletion in exon 6 that led to a frameshift 15 bases into exon
7. The mutant protein contains 233 aa of the wild-type sequence
and an additional 4 aa due to the frameshift
(Leu233fs) (Fig. 13). The mutation caused the truncation of
194 aa of the VDR leading to a loss of 1,25-(OH)2D3 binding
and hormone responsiveness.


C. Major structural mutations
There has been one case (F42) reported in which a major
structural defect in the VDR gene was found to cause
HVDRR (263). The defect, a deletion in the VDR gene, was
identified by PCR and Southern blotting. The deletion eliminated
exons 7, 8, and 9. This is the only case thus far reported
in which a partial gene deletion has been shown to be the
cause of HVDRR.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

VIII. เพิ่มเติมการกลายพันธุ์ในยีน VDRบานพับ a.ภูมิภาคกลายพันธุ์รหัสพันธุกรรมหยุดก่อนวัยที่เกิดจากการกลายพันธุ์สีเหลืองอำพัน(CAG การแท็ก) ใน exon 4 พบโดย Kristjansson et al. (260)ในตุรกีผู้ป่วย (F32) กับ HVDRR การศึกษาก่อนหน้านี้ใช้ fibroblasts จากผู้ป่วยรายนี้ได้แสดงให้เห็นถึงการขาดงานรวมลิแกนด์ และ 1.25- (OH) 2D 3 การตอบสนอง (202)เกิดขึ้นที่ Gln 152 นี้กลายพันธุ์ก่อนวัยอันควรหยุด และลบ306 aa ของ VDR เป็นที่คาดหวัง การ Gln152 หยุด mutant VDRไม่ตอบสนองต่อ 1.25- (OH) 2D 3 ในยีน assays เปิดใช้งานGln152 หยุดกลายพันธุ์ยังพบโดย Wiese et al(245) ใน HVDRR ใน ผู้ป่วย (F32) ที่รายงาน โดย Barsonyet al. (202)ข.ประกบไซต์กลายพันธุ์Hawa et al. (264) ตรวจสอบสาเหตุโมเลกุลของ HVDRRกับผมร่วงในกรีกสาว (F50) ใช้ RT-PCR และดีเอ็นเอ การจัดลำดับจะพบว่าผู้ป่วยลำดับ RNAแยกออกจากป่าชนิดลำดับที่นิวคลีโอไทด์147. การลำดับจาก exon 4 ถูกลบ และลำดับที่ตามมาจาก exon 5 การวิเคราะห์ของการ VDRยีนของโครโมโซมที่พบไม่มีการกลายพันธุ์ใน exons อย่างไรก็ตามการเปลี่ยนแปลงฐานของ G-C พบในสุด 59 ของ intronE (10 รูป) เปลี่ยนแปลงเดี่ยวนี้แปลง wildtypeลำดับจาก GTAAGT เพื่อ GTAACT และกำจัดเว็บไซต์ประกบ 59 ผู้บริจาค [มติลำดับ: GT(A/G) AGT]Exon 4 จะเกิดการสูญเสียของไซต์ประกบ 59 ผู้บริจาคข้ามไปในการประมวลผลเสียงบรรยาย VDR การสูญเสียของexon 4 นำ frameshift อ่านที่ผลในการรหัสพันธุกรรมหยุดก่อนวัยอันควรใน exon 5 โปรตีนกลายพันธุ์ประกอบด้วย92 aa ลำดับชนิดป่าและการครบกำหนด aa 6 เพิ่มเติมการ frameshift (Glu92fs) (12 รูป) มี VDR ย่อไม่มี [3H] 1.25- (OH) 2D 3 ผูก และไม่ชวน 24 hydroxylaseกิจกรรมยังพบการกลายพันธุ์ของไซต์ประกบในเยอรมันผู้ป่วย (F56) HVDRR และผมร่วง (246) การศึกษาการของผู้ป่วย fibroblasts ที่แสดงให้เห็นว่าขาด [3H] 1.25- (OH) 2D 3 ผูกและความล้มเหลวเพื่อก่อให้เกิดกิจกรรม 24 hydroxylase กับ 1.25-(OH) 2D 3 รักษา ในกรณีนี้ 59-บริจาคลับตัดต่อไซต์ถูกสร้างขึ้นใน exon 6 การกลายพันธุ์ในกรณีนี้ มี C กับ Gเปลี่ยน เปลี่ยนลำดับจาก GTCAGT เป็น GTGAGTการเปลี่ยนแปลงฐานเดียวนี้ไม่เปลี่ยนแปลงกรดอะมิโนรหัสลำดับใน exon ที่ 6 แต่นำประกบเป็นเว็บไซต์ที่รู้จัก spliceosome ซับซ้อนระหว่างการประมวลผลของอาร์เอ็นเอ เป็นผล การกลายพันธุ์เกิด 56-bpการลบใน exon 6 ที่ frameshift 15 ฐานเป็น exon7.โปรตีนกลายพันธุ์ประกอบด้วย 233 aa ของป่าชนิดลำดับและ 4 การเพิ่มเติมเนื่องจาก frameshift aa(Leu233fs) (13 รูป) กลายพันธุ์ที่เกิดจากการตัดคำของ194 aa ของ VDR ที่นำไปสู่การสูญเสียของ 1.25- (OH) 2D 3 ผูกและการตอบสนองฮอร์โมนค.กลายพันธุ์โครงสร้างใหญ่มีกรณีหนึ่ง (F42) รายงานซึ่งสำคัญพบความบกพร่องของยีน VDR โครงสร้างทำให้เกิดHVDRR (263) แก้ไขข้อบกพร่อง การลบในยีน VDRระบุ โดย PCR และ blotting วิธีภาคใต้ การลบออกexons 7, 8 และ 9 เป็นกรณีเดียวที่รายงานป่านนี้ในที่ การลบยีนบางส่วนได้รับการแสดงเพื่อให้การสาเหตุของ HVDRR

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

VIII การกลายพันธุ์เพิ่มเติมใน VDR ยีน


A. บานพับกลายพันธุ์ภูมิภาค
หยุด codon ก่อนวัยอันควรเกิดจากการกลายพันธุ์สีเหลืองอำพัน
(CAG เพื่อแท็ก) ในเอกซ์ซอน 4 ถูกพบโดย Kristjansson et al, (260)
ในผู้ป่วยตุรกี (F32) กับ HVDRR การศึกษาก่อนหน้า
โดยใช้เซลล์จากผู้ป่วยรายนี้ได้แสดงให้เห็นถึงการขาด
ของแกนด์ผูกพันและ 1,25- (OH) 2D3 การตอบสนอง (202).
นี้กลายพันธุ์หยุดก่อนวัยอันควรเกิดขึ้นใน Gln 152 และลบ
306 AA ของ VDR เป็นที่คาดหวัง Gln152 หยุดกลายพันธุ์ VDR
ก็ไม่ตอบสนองต่อ 1,25- (OH) 2D3 ในการเปิดใช้งานการตรวจยีน.
Gln152 หยุดการกลายพันธุ์ก็ยังระบุ Wiese et al.
(245) ในผู้ป่วย HVDRR (F32) รายงานก่อนหน้านี้โดย Barsony
et al, (202).
บี การกลายพันธุ์เว็บไซต์ Splice
Hawa, et al (264) การตรวจสอบสาเหตุของโมเลกุล HVDRR
กับผมร่วงในเด็กสาวกรีก (F50) ใช้ RT-PCR และ
ลำดับดีเอ็นเอที่พวกเขาแสดงให้เห็นว่าลำดับอาร์เอ็นเอของผู้ป่วย
แยกจากลำดับชนิดป่าที่เบื่อหน่าย
147 ลำดับจากเอกซ์ซอน 4 ถูกลบและลำดับ
ที่ตามมาจากเอกซ์ซอน 5. การวิเคราะห์ลำดับของ VDR
โครโมโซมยีนพบการกลายพันธุ์ใน exons no; อย่างไรก็ตาม
การเปลี่ยนแปลงฐาน G-เพื่อ-C พบว่าในปี 59 ในตอนท้ายของ intron
E (รูปที่. 10) การเปลี่ยนแปลงนี้เดี่ยวเบื่อหน่ายแปลง wildtype
ลำดับจาก GTAAGT เพื่อ GTAACT และกำจัด
เว็บไซต์ 59 บริจาคประกบกัน [ความเห็นลำดับ: GT (A / G) AGT].
การสูญเสียของเว็บไซต์ประกบ 59 ผู้บริจาคที่เกิดเอกซ์ซอน 4 ที่จะ
ข้ามไปใน การประมวลผลของหลักฐาน VDR การสูญเสียของ
เอกซ์ซอน 4 แนะนำ frameshift อ่านที่มีผลในการ
หยุด codon ก่อนวัยอันควรในเอกซ์ซอน 5. โปรตีนกลายพันธุ์มี
92 AA ของลำดับชนิดป่าและอีก 6 AA เนื่องจาก
ไป frameshift (Glu92fs) (รูป. 12) สั้น VDR มี
ไม่มี [3H] 1,25- (OH) 2D3 ผูกพันและล้มเหลวที่จะทำให้เกิด 24 hydroxylase
กิจกรรม.
การกลายพันธุ์เว็บไซต์ประกบกันก็ยังเป็นที่ที่ระบุไว้ในเยอรมัน
ผู้ป่วย (F56) กับ HVDRR และผมร่วง (246) การศึกษาของ
เซลล์ของผู้ป่วยแสดงให้เห็นว่าขาด [3H] 1,25- (OH) 2D3 ผูกพัน
และความล้มเหลวที่จะทำให้เกิดกิจกรรม 24-hydroxylase กับ 1,25-
รักษา (OH) 2D3 ในกรณีนี้เป็นความลับเว็บไซต์ประกบ 59 ผู้บริจาค
ได้รับการสร้างขึ้นในเอกซ์ซอน 6. การกลายพันธุ์ในกรณีนี้ C-G เพื่อ
การเปลี่ยนแปลง, การเปลี่ยนแปลงลำดับจาก GTCAGT เพื่อ GTGAGT.
นี้มีการเปลี่ยนแปลงฐานเดียวไม่ได้เปลี่ยนแปลงกรดอะมิโน
เข้ารหัส ลำดับเอกซ์ซอน 6 แต่แนะนำเว็บไซต์ประกบกันที่
อาจจะได้รับการยอมรับโดยซับซ้อน spliceosome ในระหว่าง
การประมวลผลอาร์เอ็นเอ เป็นผลให้เกิดการกลายพันธุ์ที่เกิด 56 bp
ลบในเอกซ์ซอน 6 ที่นำไปสู่ frameshift 15 ฐานลงในเอกซ์ซอน
7 โปรตีนกลายพันธุ์มี 233 AA ของลำดับชนิดป่า
และอีก 4 AA เนื่องจากการ frameshift
(Leu233fs) (รูป. 13) การกลายพันธุ์ที่เกิดจากการตัดของ
194 AA ของ VDR ที่นำไปสู่การสูญเสียของ 1,25- A (OH) 2D3 ผูกพัน
และการตอบสนองฮอร์โมน.


ซี การกลายพันธุ์ของโครงสร้างหลัก
มีกรณีหนึ่ง (F42) รายงานที่สำคัญ
ข้อบกพร่องของโครงสร้างในยีน VDR ถูกพบว่าทำให้เกิด
HVDRR (263) ข้อบกพร่องที่เป็นลบในยีน VDR ถูก
ระบุ PCR และซับภาคใต้ การลบกำจัด
exons 7, 8, และ 9 นี้เป็นกรณีเฉพาะป่านนี้รายงาน
ซึ่งในการลบยีนบางส่วนได้รับการแสดงที่จะเป็น
สาเหตุของการ HVDRR

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

8 . การกลายพันธุ์ในยีนเพิ่มเติม .A . บานพับเขตการกลายพันธุ์คลอดก่อนกำหนดรหัสหยุดเกิดจากการกลายพันธุ์ แอมเบอร์( และแท็ก ) ใน exon 4 ถูกพบโดย kristjansson et al . ( 260 )ในคนไข้ที่ตุรกี ( f32 ) กับ hvdrr . การศึกษาก่อนหน้านี้ใช้ไฟโบรบลาสต์จากผู้ป่วยนี้ได้แสดงให้เห็นถึงการขาดของลิแกนด์ผูกพันและการ 1,25 - ( โอ้ ) 2d3 การตอบสนอง ( 202 )นี้ ก่อนหยุดการกลายพันธุ์เกิดขึ้นที่ gln 152 และลบ306 AA ของ . . อย่างที่คาดไว้ gln152 หยุดกลายพันธุ์ .ไม่ตอบสนองต่อ 1,25 - ( โอ้ ) 2d3 ในยีนกระตุ้น ) .การ gln152 หยุดการกลายพันธุ์ยังระบุโดยวีเซอร์ et al .( 245 ) ในผู้ป่วย hvdrr ( f32 ) รายงานว่า ก่อนหน้านี้ โดย barsonyet al . ( 202 )B . ดามเว็บไซต์การกลายพันธุ์Hawa et al . ( 264 ) ตรวจสอบสาเหตุของ hvdrr โมเลกุลกับผมร่วงในผู้หญิงกรีกหนุ่ม ( ของ ) การใช้เทคนิคและการจัดลำดับดีเอ็นเอ พวกเขาพบว่าลำดับ DNA ของผู้ป่วยแยกออกจากลำดับนิวคลีโอไทด์มีความเหมือนที่147 . ลำดับจาก exon 4 ลบและลำดับที่ตามมาจาก exon 5 การวิเคราะห์ลำดับของ .ไม่พบการกลายพันธุ์ในยีนของโครโมโซมที่มี อย่างไรก็ตามเป็น g-to-c ฐานเปลี่ยน ถูกพบในตอนท้ายของ iNtRON 59E ( รูปที่ 10 ) เดี่ยวนี้เปลี่ยนแปลง wildtype นิวคลีโอไทด์ลำดับจาก gtaagt และขจัดเพื่อ gtaact59 ผู้บริจาคต่อเว็บไซต์ [ เอกฉันท์ลำดับ : GT ( A / F ) agt ]การสูญเสียของผู้บริจาคต่อเว็บไซต์ทำให้ชนิด 59 4 เป็นข้ามในการประมวลผลของ . . . การสูญเสียexon 4 แนะนำ 3 ที่ส่งผลให้อ่านรหัสพันธุกรรมหยุดกําหนดใน exon 5 ประกอบด้วยโปรตีนกลายพันธุ์92 AA ของของลำดับและอีก 6 AA เนื่องจากที่ 3 ( glu92fs ) ( รูปที่ 12 ) ว่ายน้ำได้สั้นลงไม่ [ 3 ] 1,25 - ( โอ้ ) 2d3 ผูกพันและล้มเหลวที่จะทำให้ hydroxylase 24กิจกรรมมีต่อเว็บไซต์การกลายพันธุ์ยังระบุว่าในเยอรมันคนไข้ ( f56 ) และ hvdrr alopecia ( 246 ) การศึกษาของจากผู้ป่วยพบขาด [ 3 ] 1,25 - ( โอ้ ) 2d3 ผูกและความล้มเหลวที่จะทำให้กิจกรรม 24 hydroxylase 1,25 - กับ( โอ้ ) 2d3 รักษา ในกรณีนี้ที่ผู้บริจาคต่อ 59 เว็บไซต์ถูกสร้างใน exon 6 การกลายพันธุ์ในคดีนี้ c-to-gเปลี่ยน , เปลี่ยนลำดับจาก gtcagt เพื่อ gtgagt .เปลี่ยนฐานเดียวนี้ไม่ได้เปลี่ยนแปลงกรดอะมิโนรหัสลำดับใน exon 6 แต่แนะนำต่อไซต์อาจจะได้รับการยอมรับจาก spliceosome ในระหว่างซับซ้อนการประมวลผล RNA ผลคือ การกลายพันธุ์ที่เกิดจาก 56 BPการลบใน exon 6 ที่นำไปสู่ 3 ใน exon 15 ฐาน7 . โปรตีนกลายพันธุ์มี 233 AA ของลำดับของและเพิ่มเติม 4 AA เนื่องจากการเม( leu233fs ) ( รูปที่ 13 ) การกลายพันธุ์ที่เกิดจากการตัดของ194 . AA ของนำไปสู่การสูญเสีย 1,25 - ( โอ้ ) 2d3 ผูกและการตอบสนองของฮอร์โมนซี. โครงสร้างหลักการกลายพันธุ์มีกรณีหนึ่ง ( f42 ) รายงานที่สำคัญโครงสร้างของเสียในยีนที่พบสาเหตุ .hvdrr ( 263 ) ข้อบกพร่อง , การลบใน . ยีน คือระบุโดยวิธี PCR และภาคใต้ blotting . การลบกรอบที่มี 7 , 8 และ 9 นี่เป็นเพียงคดีเดียว ป่านนี้ รายงานซึ่งในการลบยีนบางส่วนได้ถูกแสดงเป็นสาเหตุของ hvdrr .