Cassava pulp was obtained from Sanguan Wongse Starch
Industries (Thailand). Dry pulp was prepared by heating 1 kg wet
cassava pulp at 90 C for 24 h followed by grinding and sieving
through a 0.5-mm mesh screen (ZM-100; Retsch, Haan, Germany).
The dry pulp was stored in plastic bags at 4 C. The enzymes used
for starch hydrolysis, a-amylase from Aspergillus oryzae and glucoamylase
from Aspergillus niger, were obtained from Megazyme
Co, Ltd. Cellulase from Trichoderma reesei (Sigma) was used to
hydrolyze the cellulosic fiber in the cassava pulp. The sake-brewing
yeast, S. cerevisiae Kyokai no. 7 (K7),was obtained from the National
Research Institute of Brewing (NRIB). S. cerevisiae MT8-1/pGA11 [5]
displaying R. oryzae glucoamylase was used as a source for plasmid
extraction. The yeasts were grown aerobically at 30 C with
complete medium (YPD) containing 20 g peptone,10 g yeast extract
(Difco Laboratories, Detroit, Mich.), and 20 g glucose per liter.
Escherichia coli DH5a (TaKaRa) was used for genetic manipulation.
E. coli was grown at 37 C in Luria–Bertani medium containing
100 mg of ampicillin per millilitre.
มันสำปะหลังที่ได้จากสงวน wongse แป้ง
อุตสาหกรรม ( ประเทศไทย ) เตรียมเยื่อแห้งโดยความร้อน 1 กิโลกรัมเปียก
กากมันสำปะหลังที่ 90 เป็นเวลา 24 ชั่วโมงตามบดและ sieving
ผ่าน 0.5-mm ตาข่ายหน้าจอ ( zm-100 ; retsch แฮน , เยอรมนี ) .
pulp แห้ง เก็บในถุงพลาสติกที่ 4 C เอนไซม์ที่ใช้ในการย่อยแป้ง
a-amylase จาก Aspergillus ,
oryzae และกลูโคอะไมเลสจาก Aspergillus niger ได้จาก megazyme
Co , Ltd จาก Trichoderma reesei เซล ( Sigma ) คือใช้
, เส้นใยเซลลูโลสในมันสำปะหลัง . สาเกต้ม
ยีสต์ S . cerevisiae kyokai หมายเลข 7 ( K7 ) ที่ได้รับจากสถาบันวิจัยแห่งชาติ
ต้ม ( nrib ) S . cerevisiae mt8-1 / pga11 [ 5 ]
แสดง R . oryzae กลูโคอะไมเลสที่ใช้เป็นแหล่งสำหรับพลาสมิด
การสกัด ส่วนยีสต์เติบโต aerobically 30 C
สื่อสมบูรณ์ ( ypd extract ) ที่มี 20 กรัม , 10 กรัมยีสต์สกัด
( difco ห้องปฏิบัติการ , ดีทรอยต์ , สิงคโปร์ ) และกลูโคส 20 กรัมต่อลิตร dh5a
Escherichia coli ( ทาการะ ) คือใช้สำหรับการจัดการทางพันธุกรรม .
E . coli โตที่ 37 c ในลุเรีย–แบร์ตานิขนาดกลางที่มี
100 มิลลิกรัมของเมอรีล สตรีป ต่อมิลลิลิตร
การแปล กรุณารอสักครู่..