According to these considerations,

According to these considerations, a 201 bp fragment(primers included) of the mitochondrial cytochrome b gene was selected for PCR amplification and SSCP analysis. The primers used—cytb4m13 and cytb2—successfully amplified the targeted fragment in all species analyzed (Figure 1). The degenerate primer cytb4m13 includes a –21 M13 universal sequencing site into its chain because it was designed in a previous work to facilitate sequencing of PCR products (22). The
sequencing tag was not removed in this study because, as also shown by other authors (51), it enhances the specificity while retaining the efficiency of the PCR amplification (data not
shown). The big difference in length between the cytb2 and cytb4m13 primers does not arise in any problem in PCR amplification because tagged primers, usually having melting temperature (Tm) > 72ºC, yield good results at annealing temperatures from 50º to 65ºC (51).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Fragment(primers included) bp 201 ของยีน b cytochrome ยลถูกเลือกสำหรับกระบือและ SSCP วิเคราะห์ตามบ้านหมี่ ไพรเมอร์ที่ใช้ — cytb4m13 และ cytb2 — ขยายส่วนเป้าหมายในทุกชนิดวิเคราะห์ (รูปที่ 1) เรียบร้อย Cytb4m13 degenerate รองพื้นรวมถึงการ –21 M13 สากลจัดลำดับไซต์ลงในห่วงโซ่ของมันเนื่องจากมันถูกออกแบบในการทำงานก่อนหน้าเพื่อให้ลำดับของผลิตภัณฑ์ PCR (22) การไม่ถูกเอาป้ายลำดับในการศึกษานี้ เพราะ ตามยังโดยผู้เขียนอื่น ๆ (51), ช่วยเพิ่มความจำเพาะในขณะที่การรักษาประสิทธิภาพของกระบือที่ (ข้อมูลไม่แสดง) แตกต่างในความยาวระหว่างไพรเมอร์ cytb2 และ cytb4m13 ที่เกิดขึ้นในปัญหาใด ๆ ในกระบือเนื่องจากแท็กไพรเมอร์ มักจะมีจุดหลอมเหลว (Tm) อุณหภูมิ > ผลผลิตผลลัพธ์ที่ดีที่หลอมอุณหภูมิจาก 50º เพื่อ 65ºC, 72ºC (51)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตามที่การพิจารณาเหล่านี้เป็น 201 bp ชิ้นส่วน (ไพรเมอร์รวม) ของยล cytochrome ขยีนได้รับเลือกให้ขยาย PCR และการวิเคราะห์ SSCP ไพรเมอร์ที่ใช้ cytb4m13 และ cytb2-ประสบความสำเร็จในการขยายส่วนการกำหนดเป้าหมายในการวิเคราะห์ทุกชนิด (รูปที่ 1) cytb4m13 เลวไพรเมอร์รวมถึงเว็บไซต์ลำดับ -21 M13 สากลในห่วงโซ่ของมันเพราะมันได้รับการออกแบบในการทำงานก่อนหน้านี้เพื่ออำนวยความสะดวกในการจัดลำดับของผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ (22)
แท็กลำดับไม่ถูกลบออกในการศึกษานี้เพราะในขณะที่ยังแสดงโดยผู้เขียนอื่น ๆ (51) ที่จะช่วยเพิ่มความจำเพาะขณะที่การรักษาประสิทธิภาพของเครื่องขยายเสียงวิธี PCR (ข้อมูลไม่
แสดง) ความแตกต่างใหญ่มีความยาวระหว่าง cytb2 และ cytb4m13 ไพรเมอร์ไม่ได้เกิดขึ้นในปัญหาใด ๆ ในการขยาย PCR เพราะแท็กไพรเมอร์มักจะมีอุณหภูมิหลอมละลาย (TM)> 72ºCผลผลิตผลลัพธ์ที่ดีที่อุณหภูมิการหลอมจาก50ºเพื่อ65ºC (51)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

จากการพิจารณาเหล่านี้ , 201 ชิ้น BP ( ไพรเมอร์รวม ) ของยีนไมโตคอนเดรียล ไซโตโครม บีเลือกเป็นแบบ PCR และการวิเคราะห์ยีน . ไพรเมอร์ used-cytb4m13 cytb2 เรียบร้อยแล้วและขยายเป้าหมายจำเพาะในชนิดข้อมูล ( รูปที่ 1 ) ใช้ degenerate primer cytb4m13 รวมถึง– 21 M13 สากลจัดลำดับเว็บไซต์ในห่วงโซ่ของมันเพราะมันถูกออกแบบมาเพื่ออำนวยความสะดวกในการทำงานก่อนหน้าการจัดลำดับของผลิตภัณฑ์ PCR ( 22 ) ที่ลำดับแท็กไม่ได้เอาออกในการศึกษา เพราะยังแสดงโดยผู้เขียนอื่น ๆ ( 51 ) , มันช่วยเพิ่มความจำในขณะที่รักษาประสิทธิภาพของวิธี Amplification ( ข้อมูลไม่แสดง ) มีความแตกต่างในความยาวระหว่าง cytb2 cytb4m13 ไพรเมอร์และไม่เกิดปัญหาใด ๆในการขยายเพราะแท็ก PCR ไพรเมอร์ , มักจะมีอุณหภูมิหลอมเหลว ( TM ) > 72 º C ให้ผลลัพธ์ที่ดีที่อุณหภูมิอบจาก 50 º 65 º C ( 51 )