Microplate assayPRP, human type O,

Microplate assay
PRP, human type O, was obtained from Doctors’ Blood Centre, Manila. Residual red blood cells were removed by centrifugation at 1800 rpm for 5 minutes. Platelets were washed with Tyrode’s buffer (pH7.4) and then centrifuged at 1800 rpm for 10 minutes (Kuo et al., 1990). Platelets were resuspended 1:1 (vol/vol) in EDTA-free Tyrode’s buffer containing 0.25% bovine serum albumin (Sigma). The platelet suspension (192 μl) was transferred to wells in a 96 well microtiter plate and incubated at 37oC for 5 minutes. Crude methanol extracts of sponges and tunicates dissolved in NSS (8 μl of 50 mg/ml stock; final concentration in the microplate, 2 mg/ml) were added in duplicate and incubated at 37oC for 30 minutes. Aspirin (Sigma, 2 mg/ml) was used as positive control. NSS was used as negative control. Platelets were induced to aggregate by addition of 0.25 M CaCl2 (4 μl) (Born and Cross, 1963). The plate was incubated at 37oC for 30 minutes. Giemsa dye (4 μl) was added to each well and incubated for 5 minutes. The microtiter plate was then inverted, tapped gently, and washed with distilled water. Each well was observed for the presence or absence of violet gels.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทดสอบไมโคร
PRP โอชนิดของมนุษย์ที่ได้รับจากศูนย์บริการโลหิตแพทย์ ', มะนิลา เหลือเซลล์เม็ดเลือดแดงที่ถูกถอดออกโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 1,800 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 5 นาที เกล็ดเลือดถูกล้างด้วยบัฟเฟอร์ Tyrode ของ (pH7.4) และปั่นแล้วที่ 1,800 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาที (Kuo et al., 1990) เกล็ดเลือดที่ถูก resuspended 1: 1 (ปริมาตร / ปริมาตร) ในบัฟเฟอร์ Tyrode EDTA ฟรีของที่มี 0.25% ซีรั่มอัลบูมิวัว (ซิกม่า) ระงับเกล็ดเลือด (192 ไมโครลิตร) ถูกย้ายไปอยู่ในหลุม 96 แผ่นไมโครดีและบ่มที่ 37oC เป็นเวลา 5 นาที สารสกัดจากเมทานอลน้ำมันดิบของฟองน้ำและ tunicates ละลายในเอ็นเอส (8 ไมโครลิตร 50 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรหุ้น; เข้มข้นสุดท้ายใน microplate 2 mg / ml) ถูกเพิ่มเข้ามาในที่ซ้ำกันและบ่มที่ 37oC เป็นเวลา 30 นาที แอสไพริน (ซิกม่า 2 mg / ml) ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวก เอ็นเอสถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมเชิงลบ เกล็ดเลือดที่ถูกเหนี่ยวนำให้เกิดการรวมโดยนอกเหนือจาก 0.25 M CaCl2 (4 ไมโครลิตร) (เกิดและครอส 1963) แผ่นที่ได้รับการบ่มที่ 37oC เป็นเวลา 30 นาที สีย้อม Giemsa (4 ไมโครลิตร) ถูกบันทึกอยู่ในแต่ละดีและบ่มเป็นเวลา 5 นาที แผ่นไมโครถูกคว่ำแล้วเคาะเบา ๆ และล้างด้วยน้ำกลั่น แต่ละคนดีเป็นที่สังเกตสำหรับการมีหรือไม่มีเจลสีม่วง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย
ช่วย ประเภทมนุษย์โอ ได้รับจากศูนย์บริการโลหิต แพทย์มะนิลา เหลือสีแดงเลือดเซลล์ถูกเอาออกโดยการเหวี่ยงแยกที่ 1 , 800 รอบต่อนาที เป็นเวลา 5 นาที เกล็ดเลือดถูกล้างด้วย tyrode เป็นบัฟเฟอร์ ( ph7.4 ) และระดับที่ 1800 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาที ( Kuo et al . , 1990 ) เกล็ดเลือดเป็น resuspended 1 : 1 ( Vol / Vol ) EDTA ฟรี tyrode ของบัฟเฟอร์ที่ประกอบด้วย 0ซีรั่มอัลบูมิวัว 25% ( Sigma ) โรคระงับ ( 192 μ L ) ย้ายไปหลุมในแผ่นไมโคร 96 ก็บ่มที่ 37oc เป็นเวลา 5 นาที สารสกัดหยาบเมทานอล sponges และทูนิเขทละลายใน NSS ( 8 μ L 50 มก. / มล. หุ้น สุดท้ายพบในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย , 2 มก. / มล. ) เพิ่มในซ้ำบ่มที่ 37oc เป็นเวลา 30 นาที แอสไพริน ( ซิกม่า2 mg / ml ) ใช้เป็นตัวควบคุมบวก NSS ถูกใช้เป็นตัวควบคุมลบ เกล็ดเลือดถูกชักนำโดยรวม โดยเพิ่ม 0.25 เมตรผลิต ( 4 μ l ) ( เกิดและข้าม , 1963 ) จาน บ่มที่ 37oc เป็นเวลา 30 นาที จิมซาย้อม ( 4 μ L ) ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละ และบ่มเป็นเวลา 5 นาที หลุมของจาน แล้วคว่ำ , เคาะเบา ๆและล้างด้วยน้ำกลั่นแต่ละคนก็เป็นสังเกตสำหรับการแสดงตนหรือขาด
เจลสีม่วง