Indirect ELISAFor indirect detectio

Indirect ELISA
For indirect detection, the antigen coated to a multi-well plate is detected in two stages or layers. First an unlabeled primary antibody, which is specific for the antigen, is applied. Next, an enzyme-labeled secondary antibody is bound to the first antibody. The secondary antibody is usually an anti-species antibody and is often polyclonal. The indirect assay, the most popular format for ELISA, has the advantages and disadvantages:
Advantages
A wide variety of labeled secondary antibodies are available commercially.
Versatile because many primary antibodies can be made in one species and the same labeled secondary antibody can be used for detection.
Maximum immunoreactivity of the primary antibody is retained because it is not labeled.
Sensitivity is increased because each primary antibody contains several epitopes that can be bound by the labeled secondary antibody, allowing for signal amplification.
Disadvantages
Cell Smear: Adhere non-adherent cells on coverslip with chemical bond
Cross-reactivity might occur with the secondary antibody, resulting in nonspecific signal.
An extra incubation step is required in the procedure.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อ้อม ELISAสำหรับการตรวจจับทางอ้อม antigen เคลือบผสมหลายดีตรวจพบในระยะสองหรือชั้น ครั้งแรก ใช้ไม่มีป้ายชื่อหลักแอนติบอดี ซึ่งใช้เฉพาะสำหรับ antigen ถัดไป ชื่อเอนไซม์แอนติบอดีรองถูกผูกไว้กับแอนติบอดีตัวแรก แอนติบอดีรองมักจะเป็นแอนติบอดีชนิดต่อต้าน และมักจะเป็นโพลีแอนติ ทดสอบทางอ้อม ELISA รูปแบบนิยมมากที่สุดมีข้อดีและข้อเสีย:ข้อดีความหลากหลายของแอนติบอดีรองที่ติดป้ายมีพร้อมจำหน่ายหลากหลายเนื่องจากแอนติบอดีหลายหลักสามารถทำได้ในหนึ่งสายพันธุ์ และสามารถใช้สำหรับการตรวจหาแอนติบอดีรองป้ายเดียวกันสูงสุด immunoreactivity ของแอนติบอดีหลักถูกเก็บ เพราะไม่มีป้ายชื่อความไวจะเพิ่มขึ้นเนื่องจากแอนติบอดีแต่ละหลักประกอบด้วยหลาย epitopes ที่สามารถผูก โดยแอนติบอดีรองป้าย ช่วยให้การขยายสัญญาณข้อเสียภายในเซลล์: ยึดมติไม่ใช่เซลล์บน coverslip ด้วยพันธะเคมีCross-reactivity อาจเกิดขึ้นกับแอนติบอดีรอง ส่งผลให้สัญญาณแบบขั้นตอนการบ่มพิเศษจำเป็นต้องมีในกระบวนงาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อ้อม ELISA
สำหรับการตรวจหาทางอ้อมแอนติเจนเคลือบแผ่นหลายอย่างดีมีการตรวจพบในสองขั้นตอนหรือชั้น แรกแอนติบอดีหลักที่ไม่มีป้ายกำกับซึ่งเป็นที่เฉพาะเจาะจงสำหรับแอนติเจนที่ถูกนำไปใช้ ถัดไปเป็นเอนไซม์ที่มีข้อความรองแอนติบอดีถูกผูกไว้กับแอนติบอดีแรก แอนติบอดีรองมักจะเป็นแอนติบอดีต่อต้านชนิดและมักจะเป็นโพลี การทดสอบทางอ้อมรูปแบบที่นิยมมากที่สุดสำหรับวิธี ELISA มีข้อดีและข้อเสีย:
ข้อดี
หลากหลายที่มีป้ายกำกับแอนติบอดี้รองใช้ได้ในเชิงพาณิชย์.
อเนกประสงค์เพราะแอนติบอดีหลักหลายคนสามารถทำได้ในหนึ่งชนิดและที่เหมือนกันที่มีป้ายกำกับรองแอนติบอดีที่สามารถใช้สำหรับ . การตรวจหา
ภูมิคุ้มกันสูงสุดของแอนติบอดีหลักจะถูกเก็บไว้เพราะมันจะไม่ได้ระบุว่า.
ความไวแสงจะเพิ่มขึ้นเพราะแต่ละแอนติบอดีหลักมี epitopes หลายอย่างที่สามารถจะผูกพันตามรองแอนติบอดีที่มีป้ายกำกับเพื่อให้สามารถขยายสัญญาณ.
ข้อเสีย
Smear เซลล์: ยึดมั่นในเซลล์ที่ไม่ใช่พรรคพวก ใน coverslip กับพันธะเคมี
ปฏิกิริยาข้ามอาจจะเกิดขึ้นกับรองแอนติบอดีที่เกิดในสัญญาณเชิญชม.
ขั้นตอนการบ่มพิเศษเป็นสิ่งจำเป็นในขั้นตอน