In association with in vitro cultur

In association with in vitro culture and transplantation, isolation of spermatogonial stem cells (SSCs) is an
excellent approach for investigating spermatogonial physiology in vertebrates. However, in fish, the lack
of SSC molecular markers represents a great limitation to identify/purify these cells, rendering it difficult
to apply several valuable biotechnologies in fish-farming. Herein, we describe potential molecular markers,
which served to phenotypically characterize, cultivate and transplant Nile tilapia SSCs. Immunolocalization
revealed that Gfra1 is expressed exclusively in single type A undifferentiated spermatogonia
(Aund, presumptive SSCs). Likewise, the expression of Nanos2 protein was observed in Aund cells. However,
Nanos2-positive spermatogonia have also been identified in cysts with two to eight germ cells that
encompass type A differentiated spermatogonia (Adiff). Moreover, we also established effective primary
culture conditions that allowed the Nile tilapia spermatogonia to expand their population for at least
one month while conserving their original undifferentiated (stemness) characteristics. The maintenance
of Aund spermatogonial phenotype was demonstrated by the expression of early germ cell specific markers
and, more convincingly, by their ability to colonize and develop in the busulfan-treated adult Nile tilapia
recipient testes after germ cell transplantation. In addition to advancing our knowledge on the
identity and physiology of fish SSCs, these findings provide the first step in establishing a system that will
allow fish SSCs expansion in vitro, representing an important progress towards the development of new
biotechnologies in aquaculture, including the possibility of producing transgenic fish.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เชื่อมโยงกับเพาะปลูก การแยกเซลล์ต้นกำเนิด spermatogonial (SSCs) เป็นการวิธีแห่งราช spermatogonial สรีรวิทยาใน vertebrates อย่างไรก็ตาม ในปลา การขาดเครื่องหมายโมเลกุล SSC แทนจำกัดสำหรับระบุ/บริสุทธิ์เซลล์เหล่านี้ แสดงยากการใช้หลาย biotechnologies มีคุณค่าในการทำฟาร์มปลา นี้ เราอธิบายเครื่องหมายโมเลกุลที่มีศักยภาพที่ทำให้ phenotypically ลักษณะ ปลูก และเปลี่ยนนิล SSCs Immunolocalizationเปิดเผยว่า Gfra1 จะแสดงเฉพาะใน spermatogonia undifferentiated มีชนิดเดียว(Aund, presumptive SSCs) ในทำนองเดียวกัน ค่าของโปรตีน Nanos2 ถูกพบในเซลล์ Aund อย่างไรก็ตามยังได้ระบุในซีสต์ spermatogonia Nanos2 บวกกับสองถึงแปดเจิร์มเซลล์ที่รอบตัวชนิดต่าง ๆ spermatogonia (Adiff) นอกจากนี้ เรายังสร้างหลักที่มีประสิทธิภาพสภาพวัฒนธรรมที่ได้รับอนุญาต spermatogonia ปลานิลแม่น้ำไนล์เพื่อขยายประชากรของพวกเขาสำหรับน้อยหนึ่งเดือนในขณะที่อนุรักษ์ลักษณะดั้งเดิม undifferentiated (stemness) การบำรุงรักษาของ Aund spermatogonial phenotype ถูกแสดง โดยค่าของเครื่องหมายเฉพาะเจิร์มเซลล์ต้นและ ขึ้น convincingly ความสามารถในการ colonize และพัฒนาในการรักษา busulfan ผู้ใหญ่นิลลิ้มผู้รับหลังจากการปลูกถ่ายเซลล์จมูก นอกจากความรู้ของเราก้าวหน้าในการเอกลักษณ์และสรีรวิทยาของปลา SSCs ค้นพบเหล่านี้มีขั้นตอนแรกในการสร้างระบบที่จะทำให้ปลาขยาย SSCs การเพาะเลี้ยง แสดงความคืบหน้าสำคัญมีต่อการพัฒนาใหม่biotechnologies ในสัตว์น้ำ รวมถึงความเป็นไปได้ของการผลิตถั่วเหลืองปลา

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในการเชื่อมโยงกับวัฒนธรรมการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อและการปลูก, การแยกเซลล์ต้นกำเนิด spermatogonial (SSCs) เป็น
วิธีการที่ดีเยี่ยมสำหรับการตรวจสอบสรีรวิทยา spermatogonial ในสัตว์ที่มีกระดูกสันหลัง อย่างไรก็ตามในปลาขาด
ของโมเลกุล SSC แสดงให้เห็นถึงข้อ จำกัด ที่ดีในการระบุ / ชำระล้างเซลล์เหล่านี้แสดงว่ามันยากที่
จะใช้เทคโนโลยีชีวภาพที่มีคุณค่าหลายอย่างในการเลี้ยงปลา ในที่นี้เราจะอธิบายเครื่องหมายโมเลกุลที่มีศักยภาพ
ซึ่งทำหน้าที่ในการลักษณะภายนอกลักษณะปลูกฝังและปลูกปลานิล SSCs Immunolocalization
เปิดเผยว่า Gfra1 จะแสดงเฉพาะในชนิดเดียว spermatogonia ความแตกต่าง
(aund, สันนิษฐาน SSCs) ในทำนองเดียวกันการแสดงออกของโปรตีน Nanos2 ถูกพบในเซลล์ aund อย่างไรก็ตาม
spermatogonia Nanos2 บวกยังได้รับการระบุไว้ในซีสต์ที่มี 2-8 เซลล์สืบพันธุ์ที่
ห้อมล้อมชนิดแตกต่าง spermatogonia (Adiff) นอกจากนี้เรายังได้ก่อตั้งหลักที่มีประสิทธิภาพ
เงื่อนไขวัฒนธรรมที่ได้รับอนุญาตให้ปลานิล spermatogonia เพื่อขยายประชากรของพวกเขาเป็นเวลาอย่างน้อย
หนึ่งเดือนในขณะที่การอนุรักษ์ความแตกต่างของพวกเขาเดิม (stemness) ลักษณะ การบำรุงรักษา
ของฟีโนไทป์ aund spermatogonial ได้แสดงให้เห็นถึงการแสดงออกของเครื่องหมายเซลล์สืบพันธุ์ต้นที่เฉพาะเจาะจง
และที่ประทับใจโดยความสามารถในการตั้งถิ่นฐานและการพัฒนาในแม่น้ำไนล์ผู้ใหญ่ busulfan รับการรักษาปลานิล
อัณฑะผู้รับหลังจากปลูกถ่ายเซลล์สืบพันธุ์ นอกจากความรู้ที่ก้าวหน้าของเราใน
ความเป็นตัวตนและสรีรวิทยาของ SSCs ปลา, การค้นพบเหล่านี้ให้เป็นขั้นตอนแรกในการสร้างระบบที่จะ
ช่วยให้การขยายตัวของปลา SSCs ในหลอดทดลองที่เป็นตัวแทนของความคืบหน้าสำคัญต่อการพัฒนาของใหม่
เทคโนโลยีชีวภาพในการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำรวมทั้งความเป็นไปได้ การผลิตปลาพันธุ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในความสัมพันธ์กับการเพาะเลี้ยงใน และการ spermatogonial สเต็มเซลล์ ( สิงคโปร์ ) เป็นวิธีที่ยอดเยี่ยมเพื่อตรวจสอบ
spermatogonial สรีรวิทยาในกระดูกสันหลัง อย่างไรก็ตาม ในปลาขาด
ของ SSC โมเลกุลเครื่องหมายแสดงถึงข้อจำกัดดีระบุ / ฟอก เซลล์เหล่านี้ แสดงว่ายาก
สมัครหลายที่มีคุณค่ามากในการเลี้ยงปลา ในที่นี้เราอธิบายเครื่องหมายโมเลกุลที่มีศักยภาพ
ซึ่งเสิร์ฟ phenotypically ศึกษา ฝึกฝน และปลูกถ่ายปลานิลปกติ . immunolocalization
เปิดเผยว่า gfra1 จะแสดงเฉพาะใน
spermatogonia ชนิดเดียว ( aund ให้ผลไม่แตกต่างกัน , ปกติ ) อนึ่ง การแสดงออกของโปรตีนที่พบใน nanos2 aund เซลล์ อย่างไรก็ตาม
nanos2 บวกอัณฑะยังได้รับการระบุในซีสต์ที่มีสองถึงแปดเซลล์สืบพันธุ์ที่
ครอบคลุมประเภทแตกต่าง อัณฑะ ( adiff ) นอกจากนี้เรายังสร้างวัฒนธรรมที่มีประสิทธิภาพหลัก
เงื่อนไขที่อนุญาตให้ ปลานิล อัณฑะขยายประชากรของตนเองอย่างน้อยหนึ่งเดือนในขณะที่อนุรักษ์ของเดิม
ไม่แตกต่างกัน ( stemness ) ลักษณะการรักษาของการ aund
spermatogonial ) โดยการแสดงออกของต้นเซลล์สืบพันธุ์เฉพาะเครื่องหมาย
และมากขึ้นชัดเจน โดยความสามารถในการตั้งรกรากและพัฒนาในตากถือว่าผู้ใหญ่ปลานิล
หลังจากการปลูกถ่ายเซลล์ผู้รับตัวเชื้อโรค นอกจากความก้าวหน้า ความรู้ของเราที่
ตัวตนและสรีรวิทยาปกติปลาการค้นพบเหล่านี้ให้ ขั้นตอนแรกในการสร้างระบบซึ่งจะอนุญาตให้ขยายการเพาะปลา
ปกติคิดเป็นสิ่งสำคัญต่อการพัฒนาความก้าวหน้าของเทคโนโลยีชีวภาพใหม่
ในการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ รวมทั้งความเป็นไปได้ของการผลิตปลาดัดแปลงพันธุกรรม .