Intramuscular fatty acids were extracted according to Folch, Lees, and Stanley (1957). Briefly, a 5.0 g homogenised longissimus dorsi sample was blended with chloroform/methanol (2:1, v/v) solution, filtered, placed in a separator funnel and mixed with saline solution (0.88% KCl). After separation into two phases, the aqueous methanol fraction was discarded and the chloroform lipid fraction was washed with distilled water/methanol (1:1, v/v). After a further filtration and evaporation by means of a rotary evaporator, lipid extracts were transferred to test tubes. Duplicates of 100 mg of lipids were methylated using 1 ml of hexane and 0.05 ml of 2 N methanolic KOH ( I.U.P.A.C., 1987). Gas chromatographic analysis was performed with a Varian model Star 3400 CX instrument equipped with a CP 88 capillary column (length 100 m, internal diameter 0.25 mm, film thickness 0.25 ml; Sigma). The oven temperature was set at 140 °C for 4 min then was increased up to 220 °C at a rate of 4 °C/min. Helium was used as carrier gas at a flow rate of 0.7 ml/min; the temperature of the injector was set at 220 °C with an injection rate of 120 ml/min and an injection volume of 1 μl. The detector (FID) temperature was set at 260 °C. Retention times and area of every peak were computed using the Varian Star 3.4.1. software. The individual fatty acid peaks were identified by comparison of retention times with those of known mixtures of standard fatty acids (37 component FAME mix, 18919-1 AMP, Supelco, Bellefonte, PA) run under the same operating conditions.
บาดทะยักจากกรดไขมันถูกสกัดตาม Folch ลีส์ และสแตนลีย์ (1957) สั้น ๆ ตัว 5.0 g homogenised longissimus dorsi อย่างผสมผสานเข้ากับโซลูชันคลอโรฟอร์ม/เมทานอล (2:1, v/v) กรอง วางลงในกรวยแยก และผสมกับน้ำเกลือ (0.88% KCl) หลังจากแยกเป็น 2 ขั้นตอน เศษส่วนเมทานอลอควีถูกละทิ้ง และเศษส่วนคลอโรฟอร์มไขมันถูกล้าง ด้วยน้ำกลั่นเม (1:1, v/v) หลังจากไปกรองและระเหยจาก evaporator โรตารี่ สารสกัดจากไขมันมีการถ่ายโอนการทดสอบท่อ โครงการ 100 มก.ซ้ำได้ methylated ใช้ 1 ml ของเฮกเซน และ 0.05 ml 2 N methanolic เกาะ (I.U.P.A.C., 1987) วิเคราะห์ chromatographic แก๊สทำกับดาว 3400 CX เครื่องรุ่นแล้วแต่กำหนดพร้อมคอลัมน์เส้นเลือดฝอย CP 88 (ความยาว 100 เมตร เส้นผ่าศูนย์กลางภายใน 0.25 mm ความหนาของฟิล์ม 0.25 ml ซิก) อุณหภูมิเตาอบตั้งที่ 140 ° C สำหรับ 4 นาที แล้วเพิ่มขึ้นถึง 220 ° C ในอัตรา 4 ° C/นาที ใช้ฮีเลียมเป็นก๊าซผู้ขนส่งในอัตราไหล 0.7 ml/min อุณหภูมิของหัวฉีดที่ถูกกำหนดที่ 220 ° C อัตราการฉีดของ 120 ml/min และปริมาณการฉีดของ 1 μl ตั้งอุณหภูมิเครื่องตรวจจับ (FID) ที่ 260 องศาเซลเซียส รักษาเวลาและพื้นที่ของทุกคถูกคำนวณโดยใช้ดาวแล้วแต่กำหนด 3.4.1 ซอฟต์แวร์ กรดไขมันแต่ละแห่งได้ระบุ โดยการเปรียบเทียบครั้งคงรู้จักส่วนผสมของกรดไขมันมาตรฐาน (37 ส่วนประกอบชื่อเสียงผสม 18919 1 AMP, Supelco, Bellefonte, PA) ผู้ทำงานภายใต้เงื่อนไขปฏิบัติเดียวกัน
การแปล กรุณารอสักครู่..
กรดไขมันในกล้ามเนื้อถูกสกัดตาม Folch, กากและสแตนลี่ย์ (1957) สั้น ๆ , 5.0 กรัม homogenised longissimus ตัวอย่าง dorsi ได้รับการผสมกับคลอโรฟอร์ม / เมทานอล (2: 1, v / v) การแก้ปัญหากรองที่วางไว้ในช่องทางแยกและผสมกับน้ำเกลือ (0.88% KCl) หลังจากที่แยกเป็นสองขั้นตอน, เมทานอลส่วนน้ำทิ้งและส่วนไขมันคลอโรฟอร์มถูกล้างด้วยน้ำกลั่น / เมทานอล (1: 1, v / v) หลังจากการกรองและการระเหยโดยวิธีการระเหยแบบหมุน, สารสกัดไขมันถูกย้ายไปทดสอบหลอด รายการที่ซ้ำกัน 100 มิลลิกรัมของไขมันถูก methylated ใช้ 1 มิลลิลิตรของเฮกเซนและ 0.05 มิลลิลิตร 2 เมทานอลเกาะ (IUPAC, 1987) แก๊สโครมาวิเคราะห์ได้ดำเนินการกับรูปแบบ Varian ดาว CX 3400 เครื่องมือที่ใช้ในการติดตั้งซีพี 88 คอลัมน์ฝอย (ความยาว 100 เมตรขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 0.25 มมภายในความหนาของฟิล์ม 0.25 มล.; ซิกม่า) อุณหภูมิเตาอบตั้งอยู่ที่ 140 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 นาทีจากนั้นเพิ่มขึ้นถึง 220 ° C ที่อัตรา 4 องศาเซลเซียส / นาที ฮีเลียมถูกใช้เป็นก๊าซที่อัตราการไหล 0.7 มล. / นาที; อุณหภูมิของหัวฉีดที่ถูกตั้งไว้ที่ 220 องศาเซลเซียสมีอัตราการฉีด 120 มล. / นาทีและปริมาณการฉีด 1 ไมโครลิตร เครื่องตรวจจับ (FID) อุณหภูมิที่ตั้งอยู่ที่ 260 องศาเซลเซียส เวลาการเก็บรักษาและพื้นที่ของทุกจุดสูงสุดถูกคำนวณโดยใช้ Varian ดาว 3.4.1 ซอฟต์แวร์ ยอดกรดไขมันของแต่ละบุคคลที่ถูกระบุโดยเปรียบเทียบการเก็บรักษาครั้งกับผู้ที่เป็นที่รู้จักของผสมของกรดไขมันมาตรฐาน (37 FAME ผสมส่วนประกอบ 18919-1 แอมป์ Supelco, เบลลาฟอน, PA) ทำงานภายใต้สภาพการใช้งานเดียวกัน
การแปล กรุณารอสักครู่..
เปอร์เซ็นต์กรดไขมันที่สกัดจากฟอล์ชตะกอนและ Stanley , ( 1957 ) สั้น , 5.0 กรัม homogenised โคเมารถตัวอย่างผสมกับเมทานอลคลอโรฟอร์ม / ( 2 : 1 v / v ) สารละลายที่กรอง , วางในกรวยแยก และผสมกับน้ำเกลือ ( 0.88 % โพแทสเซียม ) หลังจากแยกเป็น 2 เฟส คือส่วนน้ำที่ถูกทิ้งและเมทานอลคลอโรฟอร์มเศษไขมันถูกล้างด้วยน้ำกลั่น / เมทานอล ( 1 : 1 v / v ) หลังจากต่อการกรองและการระเหยโดยวิธีการระเหยสารแบบโรตารี่ ไขมัน คือ ทดสอบหลอด า 100 mg ของไขมันเป็น methylated 1 มิลลิลิตรโดยใช้เฮกเซนและ 0.05 มิลลิลิตร 2 N เมทานอลเกาะ ( i.u.p.a.c. , 1987 )การวิเคราะห์ก๊าซโครมา ด้วยรูปแบบไร้ดาว 3400 CX เครื่องมือพร้อมกับ CP 88 หลอดเลือดฝอยคอลัมน์ ( ความยาว 100 เมตร ภายในเส้นผ่าศูนย์กลาง 0.25 มม. ความหนาฟิล์ม 0.25 มิลลิลิตร ; Sigma ) อุณหภูมิเตาอบไว้ที่ 140 ° C เป็นเวลา 4 นาทีแล้วเพิ่มขึ้นถึง 220 องศาซี ในอัตรา 4 ° C / นาที ฮีเลียมถูกใช้เป็นแก๊สตัวพา ที่อัตราการไหลของ 0.7 มล. / นาที ;อุณหภูมิของหัวฉีดไว้ที่ 220 องศาองศาเซลเซียส อัตราการฉีด 120 มิลลิลิตรต่อนาที และฉีด ปริมาณ 1 ลิตร μตรวจจับ ( FID ) ไว้ที่อุณหภูมิ 260 องศา ในเวลาและพื้นที่ของทุกยอดถูกคำนวณโดยใช้เครื่องสตาร์ 3.4.1 . ซอฟต์แวร์แต่ละยอดมีกรดไขมันที่ระบุการเปรียบเทียบความคงทนในการจำเวลาที่รู้จักกันในมาตรฐานของกรดไขมัน ( 37 ) ส่วนผสม 18919-1 ชื่อเสียง , แอมป์ , supelco bellefonte , PA ) ทำงานภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน
การแปล กรุณารอสักครู่..