2.7.1. Plasma alternative haemolyti

2.7.1. Plasma alternative haemolytic complement pathway(ACH500, lysozyme and peroxidase activities ACH50 was determined following the method described by Sunyer and Tort[471, using rabbit red blood cells(RaRBC) as target cells to haemolysis. The serially diluted plasma was incubated(100 min) with RaRBC(2.8 x 108 cell ml-1), centrifuged(122 x g. 2.5 min) and the optical density(OD) of the supernatant was measured at 414 nm. The reciprocal of the serum dilution causing lysis of RaRBC was designated as ACH50 l48l. Results are 50% presented as ACH50 units mL Lysozyme activity was determined in plasma and skin mucus measuring(450 nm) the decrease of the turbidity of a Micrococcus lysodeikticus suspension, as described by Ellis 19l and Hutchinson and Manning 1501. Lysozyme concentration(Hg mL was esti mated using lyophilized hen egg-white lysozyme(Sigma serially diluted in sodium phosphate buffer(0.05 M: pH 6.2) to establish a standard curve. Skin mucus was prepared according methodology adapted from Fagan et al. 151 l and Fast et al. 152 After sequential centrifugation 1500 x g, 20 000 x g, for 10 min at 4 oC) the su pernatants were diluted with 3 parts of sodium phosphate buffer 0.05 M: pH 6.2) and analysed as previous described. Total peroxidase activity in plasma was measured as described by Quade and Roth 153. The peroxidase activity(U mL plasma) was determined assuming that one unit of peroxidase produces an absorbance change of 1 oD. All analyses were conducted in triplicates

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7.1. พลาทาง haemolytic เสริมเดิน (ACH500, lysozyme การถูกฮอสกิจกรรม และกำหนดวิธีการอธิบาย โดย Sunyer และละเมิด [471 ใช้กระต่ายแดงเลือด cells(RaRBC) เป็นเซลล์เป้าหมาย haemolysis ACH50 พลาสม่า serially เจือจางก็ได้รับการกก (100 นาที) กับ RaRBC (2.8 x 108 เซลล์ ml-1), เหวี่ยง (122 x กรัม 2.5 นาที) และ density(OD) แสงของ supernatant ถูกวัดที่ 414 nm ในทางกลับกันการเจือจางซีรั่มที่สาเหตุของ RaRBC ถูกกำหนดเป็น ACH50 l48l ผลลัพธ์จะแสดงเป็น ACH50 หน่วย mL กิจกรรม lysozyme การถูกกำหนดในพลาสม่าและผิวเมือก measuring(450 nm) 50% การลดลงของความขุ่น Micrococcus lysodeikticus ระงับ ตามที่อธิบายไว้ โดยเอลลิสที่ 19 l Hutchinson และ 1501 แมนนิ่ง ความเข้มข้นของ lysozyme การถูก (Hg มิลลิลิตรถูก esti แม่ใช้ไข่ขาว lysozyme การถูกไก่ lyophilized (Sigma serially เจือจางในโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (0.05 m:ค่า pH 6.2) การสร้างกราฟมาตรฐานการ ผิวเมือกจัดเตรียมตามวิธีที่ดัดแปลงมาจากร้อยเอ็ด Fagan 151 l และเร็วร้อยเอ็ด 152 หลังหมุนตามลำดับ 1500 x g, 20 000 x g, 10 นาทีที่ 4 oC) su pernatants ถูกเจือจาง ด้วย 3 ส่วนของโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 0.05 m:ค่า pH 6.2) และวิเคราะห์อธิบายเป็นก่อนหน้านี้ กิจกรรมรวมฮอสในพลาสมามีวัดตามที่อธิบายไว้ โดย Quade และ Roth 153 พิจารณากิจกรรมฮอส (U mL พลา) สมมติว่าหน่วยผลิตฮอส absorbance ที่เปลี่ยนของ 1 oD ได้ดำเนินการวิเคราะห์ทั้งหมดใน triplicates

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7.1 พลาสม่าทางเลือกทางเดิน haemolytic สมบูรณ์ (ACH500, ไลโซไซม์และ peroxidase กิจกรรม ACH50 ถูกกำหนดดังต่อไปนี้วิธีการอธิบายโดย Sunyer และละเมิด [471 โดยใช้เซลล์กระต่ายเม็ดเลือดแดง (RaRBC) เป็นเซลล์เป้าหมายที่จะเม็ดเลือดแตก. พลาสม่าเจือจางลำดับถูกบ่ม (100 นาที) กับ RaRBC (2.8 x 108 เซลล์ mL-1), หมุนเหวี่ยง (122 x กรัม. 2.5 นาที) และความหนาแน่นของแสง (OD) ของสารละลายวัดที่ 414 นาโนเมตร. กันและกันเจือจางซีรั่มที่ก่อให้เกิดการสลายของ RaRBC ถูกกำหนดให้เป็น ACH50 l48l. ผลการค้นหาจะ 50% นำเสนอเป็นหน่วย ACH50 กิจกรรมมล Lysozyme ถูกกำหนดในพลาสม่าและผิวหนังเมือกวัด (450 นาโนเมตร) ลดลงของความขุ่นของ lysodeikticus ระงับ Micrococcus ตามที่อธิบายโดยเอลลิส 19L และฮัทชินสันและแมนนิ่ง 1501. Lysozyme เข้มข้น (Hg มิลลิลิตร Esti แต่งงานโดยใช้ไก่ lysozyme ไข่สีขาวแห้ง (ซิกปรับลดลำดับในบัฟเฟอร์โซเดียมฟอสเฟต (0.05 M:. ค่า pH 6.2) เพื่อสร้างเส้นโค้งมาตรฐานผิวเมือกถูกจัดทำขึ้นตามวิธีการดัดแปลงมาจาก Fagan, et al 151 ลิตรและอัลเอตจานด่วน 152 หลังจากการหมุนเหวี่ยงลำดับ 1500 XG, 20 000 XG, 10 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส) เดอะ pernatants Su ถูกเจือจางด้วย 3 ส่วนของโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 0.05 M: ค่า pH 6.2) และวิเคราะห์ก่อนหน้าอธิบาย กิจกรรม peroxidase รวมในพลาสม่าวัดตามที่อธิบาย Quade โรทและ 153 กิจกรรม peroxidase (U มลพลาสม่า) ถูกกำหนดสมมติว่าหนึ่งหน่วยของ peroxidase ก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงการดูดกลืนแสงของ 1 oD การวิเคราะห์ทั้งหมดถูกดำเนินการใน triplicates

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การพัก . พลาสมาทางเลือก haemolytic เสริมทางเดิน ( ach500 ไลโซไซม์ peroxidase , และ ach50 กิจกรรมต่างๆถูกกำหนดตามวิธีที่อธิบายไว้โดย sunyer และละเมิด [ 471 , ใช้กระต่ายเซลล์เม็ดเลือดแดง ( rarbc ) เป็นเซลล์เป้าหมาย เพื่อ haemolysis . ที่เป็นเจือจางเลือดบ่ม ( 100 นาที ) กับ rarbc ( 2.8 x 108 เซลล์แน่นอน ) , ไฟฟ้า ( 122 x G 2.5 นาที ) และความหนาแน่นของแสง ( OD ) ของน่านคือวัดที่ 414 nm . ส่วนกลับของเซรุ่มเจือจางก่อให้เกิดการสลายของ rarbc คือเขตเป็น ach50 l48l ผลคือ 50% แสดงเป็นหน่วย ach50 มล ไลโซไซม์กิจกรรมตั้งใจในพลาสมาและเมือกผิววัด ( 450 nm ) การลดความขุ่นของ Micrococcus lysodeikticus ช่วงล่างตามที่อธิบายไว้โดยเอลลิสและและ 19l Hutchinson Manning 1501 . ไลโซไซม์เข้มข้น ( HG ml พบเจ้าเป็นชู้ โดยใช้โปรตีนไข่ขาวไลโซไซม์ ( Sigma เป็นเจือจางในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( 0.05 M : pH 6.2 ) เพื่อสร้างเส้นโค้งมาตรฐาน เมือกเป็นผิวที่เตรียมไว้ตามวิธีการดัดแปลงจาก ฟาแกน และคณะ 151 ลิตรและรวดเร็ว et al . ลำดับ 152 หลังจากปั่น 1500 x G 20 , 000 x G สำหรับ 10 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส ) ซู pernatants ถูกเจือจางด้วย 3 ส่วนของโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 6.2 0.05 M ) และวิเคราะห์เป็นก่อนหน้านี้อธิบาย รวมกิจกรรมทั้งในพลาสมาและวัดตามที่อธิบายไว้โดยเควดรอธ 153 การเปลี่ยนแปลงกิจกรรม ( U มิลลิลิตรพลาสมา ) คือว่าสมมติว่าหนึ่งหน่วยของเอนไซม์ผลิตค่าเปลี่ยน 1 . . การวิเคราะห์การทดลอง 3 ซ้ำทั้งหมด