in this lab you will review how to

in this lab you will review how to use the spectrophotometer with a spectrophotometer one can measure how much light of a particular wavelength(color) is absorbed by a solution the light is absorbed by a particular molecule of in terest in the solution freqently that molecule is produced or used up in a chemical reaction proceeds when we measuree these changes we measure the rate of a reaction as it occurscerectrophtain dyes interact with virtually all proteins to yield a protein-dye conjugate that absorbs light differently than the dys alone(there is a significant increase in the light absorption)this chhange in absorption can be quantified with a spectrotometer and is the basis of an indirect measure of the amount of protein in a sample in this procedure protein containing solutions will be exposed to a dye molecule called coomassie blue g-250 the interaction of coomassie blue g-250 with protein molecules produces an intensely blue complex
we use special cuvettes to hold samples of interest in the spectrophotometer cuvettes are made of thin uniform glass or plastic that is highly transparent to light at wavelengths used (some wavelengths such as those in the ultraviolet region (200 to 300 nm) require cuvettes made of other materials such as quartz) since cuvettes can be very expensive all cuvettes should be handled very carefully so they are not scratched or broken do not put anything sharp or hard into a cuvette when you use them always position them such that the light passes through the optical windows and not the sides of the cuvette intended for your fingers rinse your cuvettes with distilled water immediately after use to prevent materials from drying onto the inner surfaces

to use the spectrophotometer follow the detailed instructions found at: http://bio.winona.edu/berg/307s06/Labs/documents/Genesys6.doc. Solutions that are visibly blue (such as the Solutions containing coomassie blue g-250 and dissolved proteins ) absord red light so you should set the spectrophotometer to provide a measuring beam of red light red light has wavelengths ranging from about 600 to about 700 nm for the maximum sensitivity a wavelength at the absorption maximum is normally chosen red solutions absorb blue light blue light has shorter wavelengths(around 400 to 450 nm) than red light so to measure a red solution it is necessary to set the spectrophotometer to produce a blue measuring beam

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในห้องปฏิบัติการนี้คุณจะทบทวนวิธีการใช้เครื่องทดสอบกรดด่าง ด้วยเครื่องทดสอบกรดด่างหนึ่งสามารถวัดปริมาณแสงของ wavelength(color) เฉพาะถูกดูด โดยแสงถูกดูด โดยโมเลกุลเฉพาะของใน terest ใน freqently โซลูชันโซลูชัน โมเลกุลที่ผลิต หรือใช้ในปฏิกิริยาเคมีดำเนินเมื่อเรา measuree เปลี่ยนแปลงเหล่านี้เราวัดอัตราของปฏิกิริยาตาม occurscerectrophtain สีโต้ตอบกับโปรตีนแทบทั้งหมดให้ ค่าสังยุคสีย้อมโปรตีนที่ดูดซับแสงแตกต่างจาก dys ที่เดียว (ไม่มีการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในการดูดซึมแสง) chhange นี้ในการดูดซึมสามารถ quantified กับ spectrotometer การ และเป็นพื้นฐานของการวัดทางอ้อมของจำนวนโปรตีนในตัวอย่างโปรตีนตอนนี้โซลูชั่นที่มีจะถูกโมเลกุลสีย้อมเป็นสี coomassie g-250 ติดต่อ coomassie blue g 250 กับโมเลกุลของโปรตีนที่เรียกว่าซับซ้อนมีสีฟ้าเจี๊ยบเราใช้ cuvettes พิเศษเพื่อเก็บตัวอย่างน่าสนใจใน cuvettes เครื่องทดสอบกรดด่างที่ทำจากแก้วเครื่องแบบบางหรือพลาสติกที่สูงโปร่งแสงที่ความยาวคลื่นที่ใช้ (ความยาวคลื่นบางอย่างที่มีในภูมิภาคอัลตราไวโอเลต (200-300 nm) ต้อง cuvettes ที่ทำจากวัสดุอื่น ๆ เช่นควอตซ์) ตั้งแต่ cuvettes ได้แพง cuvettes ทั้งหมดควรมีจัดการอย่างระมัดระวังมากดังนั้นพวกเขาจะไม่มีรอยขีดข่วน หรือเสีย อย่าใส่อะไรคม หรือยากไป cuvette เมื่อคุณใช้เสมอวางไว้ให้แสงผ่านหน้าต่างแสง และด้านของ cuvette ที่ไว้สำหรับนิ้วไม่ล้าง cuvettes ของน้ำกลั่นทันทีหลังจากใช้เพื่อป้องกันไม่ให้วัสดุแห้งบนพื้นผิวภายในการใช้ เครื่องทดสอบกรดด่างทำตามคำแนะนำรายละเอียดที่: http://bio.winona.edu/berg/307s06/Labs/documents/Genesys6.doc โซลูชั่นที่จะมองเห็นสีฟ้า (เช่นโซลูชันประกอบด้วย coomassie บลู g 250 และละลายโปรตีน) absord แสงสีแดงดังนั้นคุณควรตั้งเครื่องทดสอบกรดด่างวัดแสงไฟสีแดงไฟสีแดงให้มีความยาวคลื่นตั้งแต่ประมาณ 600 ประมาณ 700 nm สำหรับความไวสูงสุดที่ความยาวคลื่นที่ดูดซึมสูงสุดปกติเลือกโซลูชั่นแดงดูดซับแสงสีน้ำเงินแสงสีน้ำเงินมีความยาวคลื่นที่สั้นกว่า (ประมาณ 400 ถึง 450 nm) กว่าแสงสีแดงเพื่อการวัด สีแดงจำเป็นต้องตั้งเครื่องทดสอบกรดด่างในการผลิตสีน้ำเงินที่วัดแสง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในห้องปฏิบัติการนี้คุณจะทบทวนวิธีการใช้ spectrophotometer กับ spectrophotometer หนึ่งสามารถวัดแสงเท่าใดของความยาวคลื่นเฉพาะ (สี) จะถูกดูดซึมโดยวิธีแสงถูกดูดซึมโดยโมเลกุลโดยเฉพาะอย่างยิ่งใน terest ในการแก้ปัญหา freqently โมเลกุลที่เป็น ผลิตหรือนำไปใช้ในการดำเนินการเกิดปฏิกิริยาทางเคมีเมื่อเรา measuree การเปลี่ยนแปลงเหล่านี้เราวัดอัตราการเกิดปฏิกิริยาในขณะที่มัน occurscerectrophtain สีโต้ตอบกับโปรตีนเกือบทั้งหมดเพื่อให้ผันโปรตีนที่ดูดซับสีย้อมแสงที่แตกต่างกว่า DYS เพียงอย่างเดียว (มีอย่างมีนัยสำคัญ เพิ่มขึ้นในการดูดกลืนแสง) chhange ในการดูดซึมนี้สามารถวัดด้วย spectrotometer และเป็นพื้นฐานของการวัดทางอ้อมของปริมาณของโปรตีนในโปรตีนตัวอย่างในขั้นตอนนี้ที่มีการแก้ปัญหาที่จะได้สัมผัสกับโมเลกุลของสีย้อมที่เรียกว่า coomassie G- สีฟ้า 250 ปฏิสัมพันธ์ของ coomassie สีฟ้า G-250 กับโมเลกุลของโปรตีนผลิตที่ซับซ้อนสีฟ้าอย่างเข้มข้น
เราใช้ cuvettes พิเศษที่จะถือตัวอย่างที่น่าสนใจใน cuvettes spectrophotometer ทำจากแก้วเครื่องแบบบางหรือพลาสติกที่เป็นอย่างสูงที่โปร่งใสให้แสงในช่วงความยาวคลื่นที่ใช้ (บางความยาวคลื่น เช่นผู้ที่อยู่ในภูมิภาคอัลตราไวโอเลต (200-300 นาโนเมตร) cuvettes ต้องทำจากวัสดุอื่น ๆ เช่นควอทซ์) ตั้งแต่ cuvettes อาจมีราคาแพงมาก cuvettes ทุกคนควรได้รับการจัดการอย่างระมัดระวังเพื่อให้พวกเขาไม่ได้มีรอยขีดข่วนหรือหักหรือไม่ใส่อะไรที่คมชัดหรือยาก เป็น cuvette เมื่อคุณใช้พวกเขาเสมอตำแหน่งพวกเขาเช่นที่แสงผ่านหน้าต่างแสงและไม่ได้เป็นด้านข้างของ cuvette ที่มีไว้สำหรับนิ้วมือของคุณล้าง cuvettes ของคุณด้วยน้ำกลั่นทันทีหลังการใช้เพื่อป้องกันไม่ให้วัสดุจากการอบแห้งลงบนพื้นผิวด้านในที่จะใช้ spectrophotometer ปฏิบัติตามคำแนะนำโดยละเอียดพบได้ที่: http://bio.winona.edu/berg/307s06/Labs/documents/Genesys6.doc การแก้ปัญหาที่เป็นสีฟ้าอย่างเห็นได้ชัด (เช่นโซลูชั่นที่มีสีฟ้า coomassie-250 กรัมและโปรตีนที่ละลายในน้ำ) ไฟสีแดง absord ดังนั้นคุณควรตั้ง spectrophotometer เพื่อให้แสงวัดแสงสีแดงแสงสีแดงมีความยาวคลื่นตั้งแต่ประมาณ 600 ถึง 700 นาโนเมตรสำหรับ ความไวแสงสูงสุดที่ความยาวคลื่นที่สูงสุดในการดูดซึมได้รับการแต่งตั้งตามปกติการแก้ปัญหาสีแดงดูดซับแสงสีฟ้าอ่อนสีฟ้ามีความยาวคลื่นสั้น (ประมาณ 400-450 นาโนเมตร) กว่าแสงสีแดงเพื่อให้การวัดวิธีการแก้ปัญหาสีแดงก็เป็นสิ่งจำเป็นที่จะตั้ง spectrophotometer ในการผลิตการวัดสีฟ้า คาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในแลปนี้คุณจะตรวจสอบว่าใช้วัสดุกับวัสดุหนึ่งสามารถวัดแสงเฉพาะความยาวคลื่นเท่าใด ( สี ) จะถูกดูดซึมโดยโซลูชั่นแสงถูกดูดซึมโดยโมเลกุลโดยเฉพาะใน terest ในการแก้ปัญหา freqently โมเลกุลที่สร้างหรือใช้ในปฏิกิริยาทางเคมี ซึ่งเมื่อเรา measuree เหล่านี้เปลี่ยนแปลง เราวัดอัตราของปฏิกิริยามัน occurscerectrophtain สีโต้ตอบกับโปรตีนเกือบทั้งหมดจะให้ผลย้อมโปรตีน ) ที่ดูดซับแสงต่างแข็งคนเดียว ( มีการเพิ่มขึ้นที่สำคัญในการดูดซึมแสง ) chhange ในการดูดซึมสามารถ quantified กับ spectrotometer และพื้นฐานของการวัดทางอ้อมของปริมาณโปรตีนในตัวอย่าง ในขั้นตอนนี้ประกอบด้วยโปรตีน โซลูชั่นถูกย้อมโมเลกุลที่เรียกว่าเหล่านี้น่าจะเป็น g-250 สีฟ้าปฏิสัมพันธ์เหล่านี้น่าจะเป็น g-250 สีฟ้าที่มีโมเลกุลของโปรตีนผลิต
ซับซ้อนยิ่งนัก สีฟ้าเราใช้คิวเวทท์พิเศษเพื่อเก็บตัวอย่างที่น่าสนใจในเครื่องคิวเวททเป็นบางชุดแก้วหรือพลาสติกที่โปร่งใสเพื่อแสงที่ความยาวคลื่นที่ใช้ ( บางความยาวคลื่นเช่นผู้ที่อยู่ในภูมิภาคอัลตราไวโอเลต ( 200 ถึง 300 nm ) ต้องให้คิวเวทท์ ผลิตจากวัสดุอื่น เช่น ควอตซ์ ) ตั้งแต่คิวเวททจะแพงมากทุกคิวเวททควรจัดการให้ดีพวกเขาไม่ได้เป็นรอยหรือแตก ไม่ใส่อะไรคมๆ หรือหนักในคิวเวตต์เมื่อคุณใช้พวกเขาพวกเขาเช่นเสมอตำแหน่งที่แสงผ่าน Windows แสงและด้านข้างของคิวเวตต์ไว้สำหรับนิ้วมือของคุณล้างคิวเวทท์ ด้วยน้ำทันทีหลังการใช้งานเพื่อป้องกันวัสดุแห้งบนพื้นผิวด้านใน

ใช้วัสดุทําตามคําแนะนํารายละเอียดได้ที่ http://bio.winona.edu/berg/307s06/labs/documents/genesys6.doc .โซลูชั่นที่เห็นสีฟ้า ( เช่นโซลูชั่นที่มีเหล่านี้น่าจะเป็นสีฟ้า g-250 และละลายโปรตีน ) absord ไฟสีแดง ดังนั้นคุณควรตั้งค่าเครื่องให้วัดแสง ไฟ แดง แดง มีความยาวคลื่นตั้งแต่ประมาณ 600 ถึง 700 nm สำหรับความไวของความยาวคลื่นสูงสุดที่ดูดซึมสูงสุดเป็นปกติเลือกโซลูชั่นซับสีฟ้าสีแดง สีฟ้าอ่อนมีความยาวคลื่นที่สั้นกว่า ( ประมาณ 400 - 450 nm ) กว่าไฟสีแดงเพื่อวัดโซลูชั่นสีแดงจะต้องตั้งค่าเครื่องเพื่อผลิตฟ้าวัดคาน