DNA extractionAll the samples were

DNA extraction
All the samples were grounded and
homogenized with an electric mill (IKA m20
WERKE). DNA extraction was carried out from
100 mg of ground and homogenized foodstuff
based on the CTAB method (1, 15). This method
includes the following steps: first, 300 µL of
sterile deionized water was added to the sample
and mixed. To the mixture, 500 µL of CTAB
extraction buffer (20 g/L CTAB, 1.4 M NaCl,
0.1 M Tris-HCl, 20 mM Na2
EDTA) was added
and mixed. Then, 20 µL Proteinase K (20 mg/
mL) was added, mixed and incubated at 65°C
for 90 min. Then, 20 µL of RNase A (10 mg/
mL) was added, mixed, incubated at 65°C for
5-10 min and centrifuged for 10 min at 16000 g.
Afterwards, the supernatant was transferred to a
new tube containing 500 µL chloroform, mixed
for 30 sec and centrifuged for 10 min at 16000
g until phase separation occurred. Later, 500 µL
of the upper layer was transferred into a new
tube containing 500 µL chloroform, mixed and
centrifuged for 5 min at 16000 g. The upper layer
was transferred to a new tube and 2 volumes of
CTAB precipitation solution (5 g/L CTAB, 0.04
M NaCl) was added, mixed by pipetting and
incubated for 60 min at room temperature. Then,
it was centrifuged for 5 min at 16000 g and the
supernatant was discarded. The precipitate was
dissolved in 350 µL NaCl (1.2 M) and 350 µL of
chloroform was added; the mix was shaken for 30
sec. and then centrifuged for 10 min at 16000 g
until phase separation occurred. The upper layer
was transferred to a new tube and 0.6 volumes of
isopropanol was added, mixed and centrifuged
for 10 min at 16000 g. The supernatant was
discarded and 500 µL of 70% ethanol solution
was added, mixed and centrifuged for 10 min at
16000 g. Then, the supernatant was discarded
and the pellets were dried and re-dissolved in
100 µL sterile deionized water.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สกัดดีเอ็นเอตัวอย่างมีเหตุผล และมีโรงงานผลิตไฟฟ้า (IKA m20 homogenizedWERKE) สกัดดีเอ็นเอดำเนินการจาก100 mg ของพื้นดินและ homogenized อาหารคะแนนเฉลียจากวิธี CTAB (1, 15) วิธีการนี้มีขั้นตอนต่อไปนี้: ครั้งแรก 300 µL ของน้ำหมันจุถูกเพิ่มลงในตัวอย่างและแบบผสม ผสม 500 µL ของ CTABบัฟเฟอร์สกัด (20 g/L CTAB, 1.4 M NaCl0.1 ทริสเรทติ้ง HCl M, Na2 20 มม.เพิ่ม EDTA)และแบบผสม แล้ว 20 µL Proteinase K (20 มิลลิกรัม /มล.) ถูกเพิ่ม ผสม และรับการกกที่ 65 ° C90 นาที RNase A แล้ว 20 µL (10 มิลลิกรัม /มิลลิลิตร) ถูกเพิ่ม ผสม 65 ° c สำหรับได้รับการกก5-10 นาที และ centrifuged 10 นาทีที่ 16000 gหลังจากนั้น supernatant โอนย้ายไปผสมใหม่หลอดที่ประกอบด้วยคลอโรฟอร์ม µL 500สำหรับ 30 วินาที และ centrifuged 10 นาทีที่ 16000กรัมจนเกิดการแยกเฟส ในภายหลัง 500 µLของชั้นบนถูกย้ายเข้าใหม่หลอดที่มี 500 µL คลอโรฟอร์ม ผสม และผลิตภัณฑ์ 5 นาทีที่ 16000 g ชั้นบนหลอดใหม่และ 2 ปริมาณการโอนย้ายแก้ปัญหาฝน CTAB (5 แยก CTAB, 0.04M NaCl) ถูกเพิ่ม ผสม โดยปิเปต และได้รับการกก 60 นาทีที่อุณหภูมิห้อง แล้วมันคือผลิตภัณฑ์ที่ 16000 g 5 นาทีและsupernatant ถูกละทิ้ง ตะกอนถูกละลายใน 350 µL NaCl (1.2 ม.) และ 350 µL ของคลอโรฟอร์มเพิ่ม เขย่าส่วนผสมสำหรับ 30วินาทีแล้ว จาก 10 นาทีที่ 16000 gจนแยกขั้นตอนเกิดขึ้น ชั้นบนโอนย้ายไปหลอดใหม่และปริมาณ 0.6isopropanol เพิ่ม ผสม และผลิตภัณฑ์10 นาทีที่ 16000 g Supernatant ถูกµL ทิ้ง และ 500 ของการแก้ปัญหาเอทานอล 70%เพิ่ม ผสม และ centrifuged 10 นาทีที่16000 กรัม แล้ว supernatant ถูกละทิ้งและเม็ดแห้ง และละลายอีกครั้งในปลอดเชื้อ 100 µL จุน้ำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สกัดดีเอ็นเอ
ตัวอย่างทั้งหมดถูกสายดินและ
หดหายกับโรงงานไฟฟ้า (IKA M20
WERKE) สกัดดีเอ็นเอถูกหามออกจาก
100 มิลลิกรัมจากพื้นดินและอาหารหดหาย
ตามวิธี CTAB (1, 15) วิธีการนี้
มีขั้นตอนดังต่อไปนี้: ครั้งแรก 300 ไมโครลิตรของ
deionized น้ำหมันถูกบันทึกอยู่ในตัวอย่าง
และผสม ที่ผสม 500 ไมโครลิตรของ CTAB
บัฟเฟอร์สกัด (20 กรัม / ลิตร CTAB 1.4 M NaCl,
0.1 M Tris-HCl, 20 มิลลิเมตร Na2
EDTA) ถูกบันทึก
และผสม จากนั้น 20 ไมโครลิตร Proteinase K (20 มิลลิกรัม /
มิลลิลิตร) ถูกเพิ่มเข้ามาผสมและบ่มที่ 65 องศาเซลเซียส
เป็นเวลา 90 นาที จากนั้น 20 ไมโครลิตรของ RNase A (10 มิลลิกรัม /
มิลลิลิตร) ถูกเพิ่มเข้ามาผสมบ่มที่อุณหภูมิ 65 องศาเซลเซียสเป็นเวลา
5-10 นาทีและปั่นเป็นเวลา 10 นาทีที่ 16000 กรัม.
หลังจากนั้นใสถูกย้ายไปยัง
หลอดใหม่ที่มี 500 ไมโครลิตร คลอโรฟอร์มผสม
30 วินาทีและปั่นเป็นเวลา 10 นาทีที่ 16000
กรัมจนถึงแยกเฟสที่เกิดขึ้น ต่อมา 500 ไมโครลิตร
ของชั้นบนถูกย้ายเข้าใหม่
หลอดที่มี 500 ไมโครลิตรคลอโรฟอร์มผสมและ
ปั่นเป็นเวลา 5 นาทีที่ 16000 กรัม ชั้นบน
ถูกย้ายไปยังหลอดใหม่และเล่ม 2 ของ
การแก้ปัญหาการเร่งรัด CTAB (5 กรัม / ลิตร CTAB 0.04
M NaCl) ถูกเพิ่มเข้ามาผสมโดยปิเปตและ
บ่มเป็นเวลา 60 นาทีที่อุณหภูมิห้อง จากนั้น
มันก็หมุนเหวี่ยงเวลา 5 นาทีที่ 16000 กรัมและ
ใสทิ้ง ตะกอนถูก
ละลายใน 350 ไมโครลิตรโซเดียมคลอไรด์ (1.2 เมตร) และ 350 ไมโครลิตรของ
คลอโรฟอร์มถูกเพิ่ม; ผสมถูกเขย่าเป็นเวลา 30
วินาที และปั่นแล้วเป็นเวลา 10 นาทีที่ 16000 กรัม
จนถึงแยกเฟสที่เกิดขึ้น ชั้นบน
ถูกย้ายไปยังหลอดใหม่และ 0.6 ปริมาณการ
isopropanol เสริมผสมและปั่น
เป็นเวลา 10 นาทีที่ 16000 กรัม ใสถูก
ทิ้งและ 500 ไมโครลิตรของการแก้ปัญหาเอทานอล 70%
ถูกเพิ่มเข้ามาผสมและปั่นเป็นเวลา 10 นาทีที่
16000 กรัม จากนั้นใสที่ถูกทิ้ง
และเม็ดก็แห้งและอีกครั้งที่ละลายใน
100 ไมโครลิตร deionized น้ำหมัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสกัดดีเอ็นเอตัวอย่างทั้งหมดถูกกักบริเวณและโฮโมกับโรงงานผลิตไฟฟ้า ( Ika M20werke ) การสกัดดีเอ็นเอถูกหามออกมาจาก100 มิลลิกรัมของพื้นดินและบดอาหารตาม ctab วิธี ( 1 , 15 ) วิธีนี้รวมถึงขั้นตอนต่อไปนี้ : 1 , 300 µล.เป็นหมันคล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำเพิ่มตัวอย่างและการผสม การผสม , 500 µ ctab ล.สารสกัด ( / l ctab 1.4 M ขนาด 20 กรัม0.1 M HCl หรือ 20 มม. ๆEDTA ) คือเพิ่มและการผสม แล้ว 20 µ K ( 20 มิลลิกรัมต่อลิตรโปรตีนมล. ) เพิ่มผสมบ่มที่อุณหภูมิ 65 องศา C และสำหรับ 90 นาทีแล้ว µเลส 20 ลิตร ( 10 มิลลิกรัมต่อลิตรมิลลิลิตรเติม , ผสม , อุณหภูมิ 65 องศา C สำหรับ5-10 นาที ไฟฟ้าสำหรับ 10 นาทีที่ 16 , 000 กรัมหลังจากนั้น , นำถูกส่งไปใหม่หลอดบรรจุ 500 µลิตร ( ผสม30 วินาที และไฟฟ้าสำหรับ 10 นาทีที่ ,กรัมจนแยกเฟสที่เกิดขึ้น ต่อมา µ 500 ล.ของชั้นบนถูกย้ายเข้าใหม่หลอดบรรจุ 500 µลิตร ( ผสมและไฟฟ้าสำหรับ 5 นาทีที่ 16 , 000 กรัมชั้นบนถูกย้ายไปที่หลอดใหม่ 2 เล่มctab ตกตะกอนสารละลาย ( 5 กรัม / ลิตร ctab 0.04M NaCl ) เข้ามาผสมด้วย pipetting และบ่มนาน 60 นาที ที่อุณหภูมิห้อง จากนั้นมันเป็นระดับ 5 นาทีที่ 16 , 000 กรัมและน่านถูกทิ้ง ที่ คือละลายใน 350 µ L NaCl ( 1.2 เมตร ) และ 350 µล.คลอโรฟอร์มได้เพิ่มส่วนผสมที่ถูกเขย่า 30วินาที แล้วระดับ 10 นาทีที่ 16 ก.จนแยกเฟสที่เกิดขึ้น ชั้นบนถูกย้ายไปที่หลอดใหม่และ 0.6 เล่มไอโซโพรพานอล เข้ามาผสมไฟฟ้าสำหรับ 10 นาทีที่ 16 , 000 กรัมสูงคือการยกเลิกและ 500 µ L ของสารละลายเอทานอล 70%เพิ่มผสมไฟฟ้าสำหรับ 10 นาทีที่16 , 000 กรัม จากนั้นนำทิ้ง ,และเม็ดแห้งและละลายใน100 µผมเป็นหมันคล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำ