Enzyme assayThe bacterial cells wer

Enzyme assay
The bacterial cells were grown at 37
o
C and
120 rpm for 120 h in Horikoshi-II medium broth.
Then the bacterial cells were removed by centrifu-gation at 6,000 rpm, 4
o
C for 10 min. The supernatant
which contains CGTase enzyme was tested for
CD-TCE complex precipitation (Nomoto et al.,
1984). The enzyme solution was sequentially
2-fold diluted in 0.2 M phosphate buffer, pH 6.0
to adjust the enzyme concentration from 1:2 to 1:2
n
dilutions. The effects of different starch types and
their concentration, including incubation temperature
were tested. The incubation time was 24 h at the indicated temperature. Then 1 mL of 100% TCE
was added and vigorously mixed by vortex. The
mixture solution was incubated in the dark for 12 h.
The CD-TCE complex was precipitated on the
inter-phase between TCE and enzyme solution. The
CGTase/CD-TCE activity was expressed as the
lowest dilution unit of the crude enzyme showing
the white pellet of CD-TCE complex.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทดสอบเอนไซม์เซลล์แบคทีเรียกำลังเติบโตที่ 37 oC และรอบต่อนาที 120 สำหรับ h 120 ในซุปกลางโฮะริโคะชิ IIแล้ว ออกเซลล์แบคทีเรีย โดย centrifu-gation ที่ 6000 รอบต่อนาที 4 oC สำหรับ 10 นาที Supernatantซึ่งประกอบด้วยเอนไซม์ CGTase ถูกทดสอบในCD-TCE ซับซ้อนฝน (Nomoto et al.,1984) โซลูชันเอนไซม์ถูกตามลำดับ2-fold ผสมในบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 0.2 M ค่า pH 6.0การปรับความเข้มข้นเอนไซม์จาก 1:2 1:2ndilutions ผลของชนิดแป้งแตกต่างกัน และความเข้มข้นของพวกเขา รวมถึงการบ่มอุณหภูมิทดสอบ เวลาฟักตัว 24 ชมที่อุณหภูมิที่ระบุได้ แล้ว 1 mL ของ TCE 100%เพิ่ม และโยคะผสม ด้วย vortex ที่ผสมโซลูชั่นที่ incubated ในมืดสำหรับ 12 hคอมเพล็กซ์ CD TCE เป็นตะกอนในระหว่างระยะระหว่างโซลูชัน TCE และเอนไซม์ ที่กิจกรรม CGTase/CD-TCE ได้แสดงออกเป็นการหน่วยเจือจางต่ำแสดงเอนไซม์ดิบเม็ดสีขาวของ CD-TCE คอมเพล็กซ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทดสอบเอนไซม์
เซลล์แบคทีเรียมีปลูกที่อุณหภูมิ 37
o
C และ
120 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 120 ชั่วโมงในน้ำซุปกลาง Horikoshi-II.
จากนั้นเซลล์แบคทีเรียที่ถูกถอดออกโดย centrifu-มาตรการที่ 6,000 รอบต่อนาที, 4
o
C เป็นเวลา 10 นาที ใส
ซึ่งมีเอนไซม์ CGTase ได้รับการทดสอบ
CD-TCE ฝนที่ซับซ้อน (Nomoto et al.,
1984) การแก้ปัญหาการทำงานของเอนไซม์เป็นลำดับ
2 เท่าเจือจางใน 0.2 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH 6.0
ที่จะปรับความเข้มข้นของเอนไซม์จาก 1: 2-1: 2
n
เจือจาง ผลกระทบของแป้งชนิดที่แตกต่างกันและ
ความเข้มข้นของพวกเขารวมทั้งอุณหภูมิบ่ม
ถูกทดสอบ เวลาบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิที่ระบุ จากนั้น 1 มิลลิลิตรของแท้ 100% TCE
ถูกบันทึกและผสมอย่างจริงจังโดยกระแสน้ำวน
วิธีการแก้ปัญหาส่วนผสมถูกบ่มในที่มืดเป็นเวลา 12 ชม.
ที่ซับซ้อน CD-TCE ถูกตกตะกอนบน
เฟสระหว่างระหว่าง TCE และการแก้ปัญหาการทำงานของเอนไซม์
CGTase / กิจกรรม CD-TCE ถูกแสดงเป็น
หน่วยเจือจางต่ำสุดของเอนไซม์แสดง
เม็ดสีขาวของ CD-TCE ที่ซับซ้อน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เอนไซม์ในเซลล์แบคทีเรีย
ปลูกที่ 37
o
C
120 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 120 ชั่วโมง เรสในปริมาณปานกลาง
2 น้ำซุป จากนั้นเซลล์แบคทีเรียที่ถูกกำจัดโดย centrifu gation ที่ 6000 รอบต่อนาที , 4
o
C 10 นาทีซึ่งประกอบด้วยเอนไซม์ CGTase สูง

cd-tce คอมเพล็กซ์ ( ทดสอบการตกตะกอน nomoto et al . ,
1984 ) เอนไซม์ในสารละลายเจือจางในราว
ถึง 0.2 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ พีเอช 6.0
เพื่อปรับความเข้มข้นของเอนไซม์ จาก 1 : 2 กับ 1 : 2
n
เจือจาง . ผลของชนิดและปริมาณของแป้งที่แตกต่างกัน

รวมทั้งอุณหภูมิที่ถูกทดสอบ บ่มเพาะเวลา 24 ชั่วโมง ที่ระบุอุณหภูมิ แล้ว 1 มิลลิลิตร ใน 100%
ถูกเพิ่มและแรงผสมด้วย . .
ผสมสารละลายเลี้ยงในที่มืดเป็นเวลา 12 ชั่วโมง cd-tce ซับซ้อน

มาตกตะกอนในอินเตอร์เฟสระหว่างและในสารละลายเอนไซม์ .
/ cd-tce กิจกรรมเอนไซม์จะแสดงเป็นค่า
( หน่วยของเอนไซม์แสดง
เม็ดสีขาวของ cd-tce ซับซ้อน