Antigen detection ELISAs for EHF an

Antigen detection ELISAs for EHF and MHF.When infection with EBOV or MARV becomes fatal, patients usually die before the antibody response. This fact suggests that serological diagnostics are suitable for the diagnosis of infection in patients who survive but not in those who succumb to the infection. High titers of infectious filovirus are present in the blood and tissues of patients at the early stage of illness, suggesting that the detection of virus antigens is suitable for diagnosis of EHF and MHF at an early stage. Antigen-capture ELISA was developed for the detection of EBOV antigens; it was used in clinical settings such as EHF outbreaks in the Democratic Republic of Congo in 1995, in Gabon in 1996, and in Uganda in 2000 and was confirmed to be efficacious in diagnosis of EHF (28-30, 50). In the antigen-capture ELISA, a pool of monoclonal antibodies to the Zaire and Sudan EBOVs and rabbit sera raised to the Zaire and Sudan EBOVs were used as capture and detection antibodies, respectively (28, 29). Antigen-capture ELISA systems to detect EBOV and MARV antigens have also been developed by other groups, including ours (20, 34, 35, 39, 44). The target proteins are NP, VP40, and GP. The characteristics of the developed EBOV- and MARV-specific antigen-capture ELISAs are summarized in Table 3. Saijo et al. developed filovirus antigen detection ELISAs using unique monoclonal antibodies to the rNPs of Zaire EBOV, Reston EBOV, and Lake Victoria MARV (20, 39, 44). Although the monoclonal antibodies were produced by immunizing mice with recombinant NPs, the NP-capture ELISA detected not only the rNPs of these viruses but also the authentic EBOV and MARV rNPs. Antigen-capture ELISAs were developed for detecting the NPs of Zaire EBOV, Sudan EBOV, and Reston EBOV (39), that of Reston EBOV alone (20), and that of MARV alone (44). The antigenic regions on the NPs of EBOV and MARV were determined to be located in their carboxy-terminal halves. The carboxy-terminal 110 and 102 amino acids of the NPs of EBOV and MARV, respectively, possess strong antigenicity (45). All the monoclonal antibodies that could be used as capture antibodies in the antigen-capture ELISA format reacted with epitopes within the carboxy-terminal ends of NPs (20, 39, 44). The monoclonal antibodies useful as capture antibodies for rNPs of EBOV and MARV recognized conformational epitopes within the carboxy-terminal ends of NPs, while those for rNP of Reston EBOV recognized linear epitopes (20, 39, 44). Interestingly, the antigen-capture ELISA with capture monoclonal antibodies to the rNP of Reston EBOV (Res2-6C8 and Res2-1D8), which recognize linear epitopes, can detect only rNP of Reston EBOV, but that with capture antibody to rNP of Zaire EBOV (3-3D), which recognizes the conformational epitope, can detect not only the rNP of Zaire EBOV but also rNPs of Sudan, Reston, and Ivory Coast EBOVs (20, 39). Lucht et al. developed an antigen-capture ELISA using a monoclonal antibody to Zaire EBOV GP as the capture antibody and another monoclonal antibody to the same antigen as a detector antibody (35). They also developed an ELISA for the detection of Zaire EBOV VP40, using two monoclonal antibodies to Zaire EBOV VP40 as capture and detector antibodies (34). The EBOV GP-capture ELISA only detected the GP of Zaire EBOV, and the EBOV VP40-capture ELISA detected the VP40s of all four EBOV species. It is considered that EBOV and MARV antigen detection ELISAs are useful for accurate and rapid diagnosis of EHF and MHF. The efficacies of these antigen-capture ELISAs must be evaluated by using patient specimens in a clinical setting and in actual EHF or MHF outbreaks.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตรวจสอบตรวจหา ELISAs EHF และ MHFเมื่อติดเชื้อ EBOV หรือ MARV ร้ายแรง ผู้ป่วยมักจะตายก่อนการตอบสนองของแอนติบอดี ความจริงแนะนำว่า เหมาะสำหรับการวินิจฉัยการติดเชื้อ ในผู้ป่วยที่อยู่รอด แต่ไม่ใช่ ในคนที่ตายไปเชื้อวินิจฉัยสภาวะ Titers สูงของ filovirus ติดเชื้ออยู่ในเลือดและเนื้อเยื่อของผู้ป่วยในระยะแรก ๆ ของการเจ็บป่วย การแนะนำว่า การตรวจพบไวรัส antigens เหมาะสำหรับการวินิจฉัย EHF และ MHF การได้ ELISA ตรวจหาจับได้รับการพัฒนาสำหรับการตรวจพบ EBOV antigens มันถูกใช้ในการตั้งค่าทางคลินิกเช่นระบาด EHF ในสาธารณรัฐประชาธิปไตยคองโกใน 1995 ในประเทศกาบอง ในปี 1996 และยูกันดาใน 2000 และได้รับการยืนยันให้บ็อชในการวินิจฉัย EHF (28-30, 50) ในการจับกุมตรวจหา ELISA สระว่ายน้ำของแอนตี้ monoclonal เพื่อจะ Zaire และซูดาน EBOVs และกระต่ายยก Zaire และซูดาน EBOVs ใช้เป็นการจับภาพและตรวจพบแอนตี้ ตามลำดับ (28, 29) จับตรวจหาระบบ ELISA การตรวจพบ EBOV และ MARV antigens ยังได้ถูกพัฒนาขึ้นโดยกลุ่มอื่น รวมถึงเรา (20, 34, 35, 39, 44) โปรตีนเป้าหมายมี NP, VP40 และ GP ลักษณะของการพัฒนา EBOV และ MARV-เฉพาะการตรวจหาจับ ELISAs ได้สรุปไว้ในตาราง 3 นิอิฮามะ et al. พัฒนาตรวจตรวจหา filovirus ELISAs ใช้ monoclonal แอนตี้ที่ไม่ซ้ำกับ rNPs Zaire EBOV, Reston EBOV และ MARV ทะเลสาบวิกตอเรีย (20, 39, 44) แม้ว่าแอนตี้ monoclonal ผลิต โดย immunizing หนูกับ recombinant NPs, ELISA NP จับตรวจพบไม่เพียง rNPs ของไวรัสเหล่านี้ แต่ EBOV อาหารและ MARV rNPs จับตรวจหา ELISAs ได้รับการพัฒนาสำหรับการตรวจสอบ NPs Zaire EBOV ซูดาน EBOV และ EBOV Reston (39), ที่ EBOV Reston คนเดียว (20), และที่ MARV เพียงอย่างเดียว (44) ภูมิภาค antigenic NPs EBOV และ MARV ถูกกำหนดให้อยู่ในซีกของเทอร์มินัล carboxy เทอร์มินัล carboxy 110 และ 102 กรดอะมิโนของ NPs EBOV และ MARV ตามลำดับ มี antigenicity แข็งแรง (45) แอนตี้จับแอนตี้ monoclonal ทั้งหมดที่สามารถใช้ในการจับกุมตรวจหา รูปแบบ ELISA ปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นกับ epitopes ภายในเทอร์มินัล carboxy สิ้นสุดลงของ NPs (20, 39, 44) แอนตี้ monoclonal ประโยชน์ตามจับแอนตี้สำหรับ rNPs EBOV และ MARV รู้จัก epitopes conformational ในปลาย carboxy เทอร์มินัลของ NPs ในขณะที่สำหรับ rNP Reston EBOV รู้จัก epitopes เชิงเส้น (20, 39, 44) เป็นเรื่องน่าสนใจ ตรวจหาจับ ELISA กับแอนตี้ monoclonal จับไป rNP ของ EBOV Reston (Res2 - 6C 8 และ Res2 - 1 D 8), ซึ่งรู้จัก epitopes เชิงเส้น ตรวจพบ rNP ของ Reston EBOV แต่ว่า มีจับ แอนติบอดีไป rNP Zaire EBOV (3-3D), ซึ่งรู้จัก conformational epitope สามารถตรวจพบไม่เพียง rNP Zaire EBOV แต่ยัง rNPs ของซูดาน Reston และ EBOVs โกตดิวัวร์ (20, 39) Lucht et al. พัฒนาจับตรวจหาการ ELISA โดยใช้แอนติบอดี monoclonal กับ Zaire EBOV GP แอนติบอดีจับและอื่น monoclonal แอนติบอดีเพื่อตรวจหาเดียวกันเป็นการตรวจแอนติบอดี (35) นอกจากนี้พวกเขายังพัฒนา ELISA สำหรับตรวจ Zaire EBOV VP40 ใช้ monoclonal แอนตี้ที่สองเพื่อ Zaire EBOV VP40 เป็นแอนตี้จับและเครื่องตรวจจับ (34) ELISA EBOV GP จับเฉพาะพบ GP Zaire EBOV และ ELISA VP40 จับ EBOV พบ VP40s พันธุ์ทั้งหมดสี่ EBOV เป็นพิจารณาที่ EBOV และ MARV ตรวจหาตรวจ ELISAs มีประโยชน์สำหรับการวินิจฉัยถูกต้อง และรวดเร็วของ EHF MHF Efficacies เหล่านี้ตรวจหาจับ ELISAs ต้องมีประเมิน โดยใช้ไว้เป็นตัวอย่างผู้ป่วยในทางคลินิก และระบาด EHF หรือ MHF จริง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การตรวจหาแอนติเจน ELISAs สำหรับ EHF และการติดเชื้อ MHF.When กับ EBOV หรือมาร์ฟจะกลายเป็นอันตรายถึงชีวิตผู้ป่วยมักจะตายก่อนที่จะตอบสนองของแอนติบอดี ความจริงเรื่องนี้แสดงให้เห็นว่าการวินิจฉัยทางภูมิคุ้มกันมีความเหมาะสมสำหรับการวินิจฉัยการติดเชื้อในผู้ป่วยที่อยู่รอด แต่ไม่ได้อยู่ในบรรดาผู้ที่ยอมจำนนต่อการติดเชื้อ titers สูงของ filovirus ติดเชื้อที่มีอยู่ในเลือดและเนื้อเยื่อของผู้ป่วยในระยะแรกของการเจ็บป่วยชี้ให้เห็นว่าการตรวจหาแอนติเจนของเชื้อไวรัสที่มีความเหมาะสมสำหรับการวินิจฉัยของ EHF และ MHF ในช่วงเริ่มต้น วิธี ELISA แอนติเจนจับภาพได้รับการพัฒนาสำหรับการตรวจหาแอนติเจน EBOV; มันถูกใช้ในการตั้งค่าทางคลินิกเช่นการระบาด EHF ในสาธารณรัฐประชาธิปไตยคองโกในปี 1995 ในประเทศกาบองในปี 1996 และในยูกันดาในปี 2000 และได้รับการยืนยันที่จะมีประสิทธิภาพในการวินิจฉัย EHF (28-30, 50) ในวิธี ELISA แอนติเจนจับ, สระว่ายน้ำของโคลนอลแอนติบอดีที่จะซาอีร์และซูดาน EBOVs กระต่ายและซีรั่มยกซาอีร์และซูดาน EBOVs ถูกนำมาใช้เป็นจับและแอนติบอดีการตรวจสอบตามลำดับ (28, 29) แอนติเจนจับระบบวิธี ELISA เพื่อตรวจหาแอนติเจนและ EBOV ร์ฟยังได้รับการพัฒนาโดยกลุ่มอื่น ๆ รวมทั้งของเรา (20, 34, 35, 39, 44) โปรตีนเป้าหมายเป็น NP, VP40 และ GP ลักษณะของการพัฒนา EBOV- และมาร์ฟเฉพาะ ELISAs แอนติเจนจับภาพได้สรุปไว้ในตารางที่ 3 Saijo และคณะ พัฒนา ELISAs การตรวจหาแอนติเจน filovirus ใช้โคลนอลแอนติบอดีที่ไม่ซ้ำกับ rNPs ของซาอีร์ EBOV เรสตัน EBOV และทะเลสาบวิกตอเรียร์ฟ (20, 39, 44) แม้ว่าโคลนอลแอนติบอดีที่ผลิตโดย immunizing หนูที่มี NPS recombinant, ELISA NP-จับตรวจพบไม่เพียง แต่ rNPs ของไวรัสเหล่านี้ แต่ยัง EBOV แท้และมาร์ฟ rNPs ELISAs แอนติเจนจับภาพได้รับการพัฒนาสำหรับการตรวจสอบของกรมอุทยานฯ ของซาอีร์ EBOV, ซูดาน EBOV และเรสตัน EBOV (39), ของเรสตัน EBOV คนเดียว (20) และของมาร์ฟคนเดียว (44) ภูมิภาคแอนติเจนบนของกรมอุทยานฯ EBOV และมาร์ฟได้รับการพิจารณาที่จะตั้งอยู่ในครึ่ง Carboxy ขั้วของพวกเขา Carboxy ขั้ว 110 และ 102 กรดอะมิโนของ NPS ของ EBOV และมาร์ฟตามลำดับมี antigenicity ที่แข็งแกร่ง (45) ทั้งหมดโคลนอลแอนติบอดีที่สามารถนำมาใช้เป็นแอนติบอดีจับภาพในรูปแบบวิธี ELISA แอนติเจนจับปฏิกิริยากับ epitopes ภายในปลาย Carboxy ขั้วของ NPS (20, 39, 44) โคลนอลแอนติบอดีที่มีประโยชน์เป็นแอนติบอดีที่จับสำหรับ rNPs ของ EBOV และมาร์ฟได้รับการยอมรับ epitopes โครงสร้างภายในปลาย Carboxy ขั้วของ NPS ในขณะที่สำหรับ RNP ของเรสตัน EBOV รับการยอมรับ epitopes เชิงเส้น (20, 39, 44) ที่น่าสนใจวิธี ELISA แอนติเจนจับภาพด้วยการจับโคลนอลแอนติบอดีที่จะ RNP ของเรสตัน EBOV (Res2-6C8 และ Res2-1D8) ซึ่งรับรู้ epitopes เชิงเส้นสามารถตรวจสอบได้เพียง RNP ของเรสตัน EBOV แต่ที่จับกับแอนติบอดีเพื่อ RNP ของซาอีร์ EBOV (3-3D) ซึ่งตระหนัก epitope โครงสร้างที่สามารถตรวจสอบได้ไม่เพียง แต่ RNP ของซาอีร์ EBOV แต่ยัง rNPs ของซูดาน, เรสตันและไอวอรี่โคส EBOVs (20, 39) แอร์และคณะ การพัฒนาวิธี ELISA แอนติเจนจับภาพโดยใช้แอนติบอดีเพื่อซาอีร์ EBOV GP เป็นแอนติบอดีที่จับภาพและแอนติบอดีอีกครั้งเพื่อให้แอนติเจนแอนติบอดีเดียวกับเครื่องตรวจจับ (35) พวกเขายังได้พัฒนาวิธี ELISA สำหรับการตรวจสอบของซาอีร์ EBOV VP40 ใช้สองโคลนอลแอนติบอดีที่จะซาอีร์ EBOV VP40 เป็นจับและแอนติบอดีตรวจจับ (34) วิธี ELISA EBOV GP-จับภาพเฉพาะที่ตรวจพบ GP ของซาอีร์ EBOV และวิธี ELISA EBOV VP40 จับตรวจพบ VP40s ของทั้งสี่สายพันธุ์ EBOV จะพิจารณาว่า EBOV และมาร์ฟ ELISAs ตรวจจับแอนติเจนมีประโยชน์สำหรับการวินิจฉัยที่ถูกต้องและรวดเร็วของ EHF และ MHF ประสิทธิผลของเหล่านี้ ELISAs แอนติเจนจับต้องได้รับการประเมินโดยใช้ตัวอย่างของผู้ป่วยในการตั้งค่าทางคลินิกและใน EHF เกิดขึ้นจริงหรือการระบาด MHF

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตรวจหาแอนติเจนและ elisas สำหรับ ehf mhf เมื่อมีการติดเชื้อ ebov หรือมาร์กลายเป็นร้ายแรง ผู้ป่วยมักจะตายก่อนที่แอนติบอดีตอบสนอง ข้อเท็จจริงนี้แสดงให้เห็นว่าระบบการวินิจฉัยที่เหมาะสมสำหรับการวินิจฉัยการติดเชื้อในผู้ป่วยที่รอดชีวิต แต่ไม่ได้อยู่ในผู้ที่ยอมจำนนต่อการติดเชื้อสูงของโรคติดเชื้อโดยฟิโลไวรัสที่มีอยู่ในเลือดและเนื้อเยื่อของผู้ป่วย ในระยะแรกของโรค แนะนำว่า การตรวจหาแอนติเจนของไวรัสที่เหมาะสำหรับการวินิจฉัยและ ehf mhf ในระยะแรก . แอนติเจนจับ ) พัฒนาขึ้นเพื่อใช้สำหรับการตรวจหาแอนติเจน ebov ; มันถูกใช้ในการตั้งค่าทางคลินิก เช่น ehf ระบาดในสาธารณรัฐประชาธิปไตยคองโกในปี 1995ในกาบองในปี 1996 และในยูกันดาในปี 2000 และได้รับประสิทธิภาพในการตรวจวินิจฉัย ehf ( 28-30 , 50 ) ในการจับแอนติเจน ELISA สระว่ายน้ำของโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อซูดานและซาอีร์ และ ebovs กระต่ายเซร่ายกกับซาอีร์และซูดาน ebovs ที่ใช้จับภาพและการตรวจหาแอนติบอดี ตามลำดับ ( 28 , 29 )แอนติเจน ELISA เพื่อตรวจสอบและจับระบบ ebov มาร์และได้รับการพัฒนาโดยกลุ่มอื่น ๆ รวมทั้งเรา ( 20 , 34 , 35 , 39 , 44 ) เป้าหมายที่โปรตีน NP , vp40 และจีพี ลักษณะของการพัฒนา ebov - มาร์เฉพาะแอนติเจนจับ elisas สรุปได้ในตารางที่ 3 ไซโจ et al .พัฒนาโดยใช้โมโนโคลนอลแอนติบอดี elisas ฟิโลไวรัสตรวจหาแอนติเจนเฉพาะกับ rnps ของซาอีร์ ebov เรสตัน , ebov และทะเลสาบวิคตอเรียมาร์ ( 20 , 39 , 44 ) โมโนโคลนอลแอนติบอดีจะถูกผลิตโดยภูมิคุ้มกันหนูด้วย recombinant NPS , NP จับ ELISA พบไม่เพียง แต่ rnps ของไวรัสเหล่านี้ แต่ยัง ebov ของแท้ และมาร์ rnps .elisas จับแอนติเจนที่ถูกพัฒนาเพื่อตรวจหาเชื้อเพลิงของซาอีร์ ebov , ซูดาน ebov และเรสตัน ebov ( 39 ) ของเรสตัน ebov คนเดียว ( 20 ) และของมาร์วินคนเดียว ( 44 ) ภูมิภาคของแอนติเจนบนแนวของ ebov มาร์และมีความตั้งใจจะตั้งอยู่ใน Carboxy Terminal ส่วน และ Carboxy Terminal แล้ว 102 กรดอะมิโนของกฟผ. และของ ebov มาร์ ตามลำดับมีเจื้อยแข็งแรง ( 45 ) ทั้งหมดของโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่สามารถใช้เป็นแอนติบอดีต่อแอนติเจนแอนติบอดีจับจับภาพในรูปแบบปฏิกิริยาจากภายในคาร์บปลายของ NPS ( 20 , 39 , 44 ) ส่วนโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่มีประโยชน์เป็นจับแอนติบอดีสำหรับ rnps ของ ebov มาร์รู้จักโครงสร้างและจากปลายของเชื้อเพลิงภายในคาร์บอกซี่ ,ในขณะที่ผู้ rnp ของเรสตัน ebov ได้รับการยอมรับจากเส้น ( 20 , 39 , 44 ) น่าสนใจ , แอนติเจน ELISA โมโนโคลนอลแอนติบอดีจับกับจับให้ rnp ของเรสตัน ebov ( res2-6c8 และ res2-1d8 ) ซึ่งรับรู้จากเส้นตรง สามารถตรวจสอบ rnp เรสตัน ebov เท่านั้น แต่กับจับ antibody rnp ของซาอีร์ ebov ( 3-3d ) ซึ่งตระหนักในไวรัส ,สามารถตรวจสอบไม่เพียง แต่ rnp ของซาอีร์ ebov แต่ยัง rnps ของซูดาน , เรสตัน และไอวอรี่โคสต์ ebovs ( 20 , 39 ) โดยเครื่องบิน et al . พัฒนาแอนติเจน ELISA โดยใช้โมโนโคลนอลแอนติบอดีจับกับแซร์ ebov GP เป็นจับแอนติบอดีอีกโมโนโคลนอลแอนติบอดีและแอนติเจนแอนติบอดีเช่นเดียวกับเครื่องตรวจจับ ( 35 ) พวกเขายังพัฒนาวิธี ELISA สำหรับการตรวจหา ebov vp40 ซาอีร์ ,โดยใช้โมโนโคลนอลแอนติบอดีในซาอีร์ ebov vp40 ดตรวจแอนติบอดี ( 34 ) GP ebov จับ ELISA เพียงพบ GP ของซาอีร์ ebov และ ebov vp40 จับ ELISA พบ vp40s ebov ทั้ง 4 ชนิด ก็ถือว่า ebov ตรวจหาแอนติเจน และมาร์ elisas ที่มีประโยชน์สำหรับการวินิจฉัยอย่างรวดเร็วและถูกต้องและ ehf mhf .ส่วนผลของแอนติเจนจับ elisas เหล่านี้ต้องถูกประเมินโดยใช้ตัวอย่างในการตั้งค่าทางคลินิกในผู้ป่วยและ ehf จริง หรือ mhf ระบาด