Microwell Plate-Based Cellulase and

Microwell Plate-Based Cellulase and Xylanase Assay
The minimum reaction time required for DNS standard
curve stability at 100ºC was determined to be 20 min
(Fig. 2). Both glucose and xylose standard curves showed
instability when reacted for only 10 min, whereas little
variation when reacted for 20 min or longer. Consequently,
we concluded that 20 min is the most effective time period
to stabilize the color development of the standard curve.
As the DNS method detects the presence of reducing
sugars in samples by colorimetric response, microbes
producing extracellular cellulase and xylanase were easily
detected even with the naked eye when the DNS reaction
was completed (Fig. 3). Among 116 strains tested, 21
showed some degree of cellulase activity: J16, J29, J30, J42,
J46, J48, J49, J53, J58, J59, J64, J65, J78, J81, J82, J90, J103,
J104, J109, J113, and J115. For xylanase, the following 31
strains showed a detectable level of enzymatic activity: J8,
J16, J19, J27, J29, J30, J34, J42, J46, J47, J48, J49, J52, J53, J57,
J58, J59, J61, J64, J65, J78, J85, J89, J90, J92, J96, J103, J104,
J109, J113, and J115.
A greater number of microbes produced xylanase than
cellulase in general. In addition, the overall enzymatic
activities of xylanase-producing isolates were higher than
cellulase-producing isolates. Notably, strain J113 exhibited
the strongest cellulase activity as well as the xylanase
activity cellulase and xylanase activities, resulting in noticeable
color change in DNS analyses.
The relative enzymatic activity of each strain determined
by our screening method is summarized in Fig. 4. From 116
strains screened, we found 19 strains exhibiting both
cellulase and xylanase activities. There were 12 strains solely
secreting xylan-degrading enzyme, and 2 strains with
cellulase production only.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Microwell ใช้จาน Cellulase และทดสอบไซลาเนสเวลาปฏิกิริยาขั้นต่ำที่จำเป็นสำหรับมาตรฐาน DNSความมั่นคงของเส้นโค้งที่ 100ºC กำหนดเป็น 20 นาที(Fig. 2) กลูโคสและ xylose มาตรฐานเส้นโค้งแสดงให้เห็นว่าความไม่แน่นอนเมื่อปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นสำหรับเพียง 10 นาที ในขณะที่น้อยเปลี่ยนแปลงเมื่อปฏิกิริยาที่เกิดขึ้น ใน 20 นาที หรือนานกว่า ดังนั้นเราสรุปนาทีที่ 20 เป็นช่วงเวลามีประสิทธิภาพสูงสุดเพื่อรักษาเสถียรภาพการพัฒนาสีของเส้นโค้งมาตรฐานเป็น DNS วิธีตรวจพบสถานะลดน้ำตาลในตัวอย่างโดยการตอบสนองการวัดสี จุลินทรีย์ผลิต extracellular cellulase และไซลาเนสได้อย่างง่ายดายตรวจพบได้ ด้วยตาเปล่าเมื่อปฏิกิริยา DNSไม่สมบูรณ์ (Fig. 3) ระหว่าง 116 สายพันธุ์ทดสอบ 21พบบางส่วนของกิจกรรม cellulase: J16, J29, J30, J42J46, J48, J49, J53, J58, J59, J64, J65, J78, J81, J82, J90, J103J104, J109, J113 ก J115 สำหรับไซลาเนส 31 ต่อไปนี้สายพันธุ์พบว่าระดับความสามารถของเอนไซม์ในระบบกิจกรรม: J8J16, J19, J27, J29, J30, J34, J42, J46, J47, J48, J49, J52, J53, J57J58, J59, J61, J64, J65, J78, J85, J89, J90, J92, J96, J103, J104J109, J113 ก J115จำนวนจุลินทรีย์มากขึ้นผลิตไซลาเนสมากกว่าcellulase โดยทั่วไป นอกจากนี้ การรวมเอนไซม์ในระบบกิจกรรมของไซลาเนสผลิตแยกได้สูงกว่าแยกผลิต cellulase ยวด สายพันธุ์ J113 จัดแสดงกิจกรรม cellulase แข็งแกร่งเช่นเดียวกับไซลาเนสกิจกรรมไซลาเนสและ cellulase กิจกรรม ผลเห็นได้ชัดเปลี่ยนสีใน DNS วิเคราะห์กิจกรรมเอนไซม์ในระบบสัมพันธ์ของแต่ละต้องใช้ที่กำหนดโดยวิธีการคัดกรองของเราสามารถสรุปเป็น Fig. 4 จาก 116สายพันธุ์ฉาย เราพบสายพันธุ์ 19 อย่างมีระดับทั้งกิจกรรม cellulase และไซลาเนส มี 12 สายพันธุ์เท่านั้นเอนไซม์ลด xylan secreting และ 2 สายพันธุ์ด้วยcellulase ผลิตเท่านั้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

microwell จานจากเซลลูเลสและไซลาเนส Assay
เวลาปฏิกิริยาขั้นต่ำที่จำเป็นสำหรับมาตรฐาน DNS
เสถียรภาพโค้งที่100ºCมุ่งมั่นจะเป็น 20 นาที
(รูปที่. 2) ทั้งกลูโคสและไซโลสโค้งมาตรฐานแสดงให้เห็นความไม่แน่นอนเมื่อมีปฏิกิริยาตอบสนองเพียง 10 นาทีในขณะที่เล็ก ๆ น้อย ๆ การเปลี่ยนแปลงเมื่อมีปฏิกิริยาตอบสนองเป็นเวลา 20 นาทีหรือนานกว่านั้น ดังนั้นเราสรุปได้ว่า 20 นาทีเป็นช่วงเวลาที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดในการรักษาเสถียรภาพการพัฒนาสีของเส้นโค้งมาตรฐาน. ในฐานะที่เป็นวิธีการ DNS ตรวจพบการปรากฏตัวของการลดน้ำตาลในตัวอย่างโดยการตอบสนองสีจุลินทรีย์ผลิตเซลลูเลสสารและไซลาเนสที่ได้รับได้อย่างง่ายดายตรวจพบแม้จะมีตาเปล่าเมื่อปฏิกิริยาของ DNS เสร็จสมบูรณ์ (รูปที่. 3) ในบรรดา 116 สายพันธุ์ที่ผ่านการทดสอบ 21 แสดงให้เห็นว่าระดับของกิจกรรมเซลลูเลสบาง: J16, J29, J30, J42, J46, J48, J49, J53, J58, J59, J64, J65, J78, J81, J82, J90, J103, J104, J109 , J113 และ J115 สำหรับไซลาเนสต่อไปนี้ 31 สายพันธุ์พบว่ามีระดับที่ตรวจพบจากการทำกิจกรรมของเอนไซม์: J8, J16, J19, J27, J29, J30, J34, J42, J46, J47, J48, J49, J52, J53, J57, J58, J59, J61 , J64, J65, J78, J85, J89, J90, J92, J96, J103, J104, J109, J113 และ J115. จำนวนมากขึ้นของเชื้อจุลินทรีย์ที่ผลิตเอนไซม์กว่าเซลลูเลสโดยทั่วไป นอกจากนี้เอนไซม์โดยรวมกิจกรรมของเชื้อไซลาเนสที่ผลิตสูงกว่าสายพันธุ์ที่ผลิตเซลลูเลส โดยเฉพาะอย่างยิ่งสายพันธุ์ J113 แสดงกิจกรรมเซลลูเลสที่แข็งแกร่งเช่นเดียวกับไซลาเนสเซลลูกิจกรรมและกิจกรรมไซลาเนสผลที่เห็นได้ชัดเจนในการเปลี่ยนสีในการวิเคราะห์DNS. กิจกรรมของเอนไซม์ที่สัมพันธ์กันของแต่ละสายพันธุ์ที่กำหนดโดยวิธีการตรวจคัดกรองของเราจะสรุปในรูป 4. จาก 116 สายพันธุ์ที่คัดเลือกเราพบ 19 สายพันธุ์ที่จัดแสดงทั้งเซลลูเลสและกิจกรรมไซลาเนส มี 12 สายพันธุ์ แต่เพียงผู้เดียวเป็นหลั่งเอนไซม์ย่อยสลายไซแลนและ2 สายพันธุ์ที่มีการผลิตเซลลูเลสเท่านั้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

microwell จานตามเซลไซลาเนสอย่างน้อย 3
เวลาปฏิกิริยาที่จำเป็นสำหรับ DNS มาตรฐาน
โค้งเสถียรภาพที่ 100 º C กำหนดให้ 20 นาที
( รูปที่ 2 ) ทั้งกลูโคสและไซโลเส้นโค้งมาตรฐานมีความไม่แน่นอนเมื่อทำปฏิกิริยา
แค่ 10 นาที ในขณะที่การเปลี่ยนแปลงเล็กน้อย
เมื่อทำปฏิกิริยา 20 นาทีหรือนานกว่านั้น โดย
เราสรุปได้ว่า 20 นาที คือ ช่วงเวลา
มีประสิทธิภาพมากที่สุดเพื่อปรับสีการพัฒนาเส้นโค้งมาตรฐาน
เป็น DNS วิธีการตรวจจับการลดน้ำตาลในการตอบสนอง ตัวอย่าง

ผลิตเซลลูเลสและ 7.4 จุลินทรีย์ และเอนไซม์ไซแลนเนสได้อย่างง่ายดาย
พบแม้ด้วยตาเปล่าเมื่อ DNS ปฏิกิริยา
เสร็จ ( รูปที่ 3 ) ระหว่าง 116 สายพันธุ์ทดสอบ 21
พบบางส่วนของกิจกรรมเอนไซม์ : j16 j29 , j30 j42 j46
, , , ,j48 j49 j58 J53 , , , , j59 j64 j65 j78 , , , , j81 j82 j90 j103 , , , , j104 j109 j113
, , , และ j115 . เอนไซม์ , ต่อไปนี้
31 สายพันธุ์ที่ตรวจพบระดับของเอนไซม์ j8
j16 J19 : , , , j27 j29 j30 j34 , , , , j46 j42 j47 j48 , , , , j52 j49 j57 J53 , , , ,
j58 j59 j61 j64 , , , , j78 j65 j85 j89 , , , , j90 j92 , j96 j103 j104 , , , , j109 j113 และ j115
, .
จำนวนมากของจุลินทรีย์ที่ผลิตเอนไซม์กว่า
เซลลูเลสในทั่วไป นอกจากนี้ กิจกรรมของเอนไซม์ไซลาเนสที่ผลิตโดย

เซลเชื้อสูงกว่าการผลิตเชื้อ โดยเฉพาะ สายพันธุ์ j113 จัดแสดง
กิจกรรมเอนไซม์ที่แข็งแกร่ง รวมทั้งกิจกรรมและกิจกรรมเอนไซม์ไซลาเนสเนส

เปลี่ยนสีอย่างเห็นได้ชัด ส่งผลวิเคราะห์ DNS .
เอนไซม์สัมพัทธ์ของแต่ละสายพันธุ์ที่กำหนด
โดยวิธีคัดกรองของเราได้สรุปไว้ในรูปที่ 4 จาก 116
สายพันธุ์คัดที่เราพบ 19 สายพันธุ์ ซึ่งกิจกรรมทั้ง
เซลไซลาเนส มี 12 สายพันธุ์ แต่เพียงผู้เดียวหลั่งเอนไซม์ย่อยสลายไซแลน
,
2 สายพันธุ์ กับเซลผลิตเท่านั้น