Method 5This method[25] is similar

Method 5
This method[25] is similar with the method 3[23] based on yeast cell lysis with the use of cell autolysis and hot water and then further cell disruption with homogenization instead of sonication. The method is applied in brewer's spent yeast, a brewery by-product. Also a protease enzyme is used for the removal of cell wall proteins and organic solvents for the removal of lipids. The conditions for the use of the enzyme are not optimized. The final product is insoluble β-glucan. In the beginning, yeast slurry cells are passed through a sieve (125 µm) for a first purification and then centrifuged (4500g / 10 min) for 5–6 times until the supernatant is clear. The yeast cells are taken as a sediment after discarding the supernatant. Next, cell autolysis is induced: 15% (w/w) cell material / pH 5.0 / 3% NaCl / 55°C / 24 h / agitation (120 rpm). Then, autolyzed cells are heated (80°C / 15 min) for deactivating the endolytic cell enzymes. The autolyzed cells are separated by centrifugation (4500g / 10 min) as sediment and treated with hot water: 250 mL suspension of autolyzed cells / 10% (w/w) solids content / 0.02 M sodium phosphate buffer / pH 7.5 / 50 g glass beads (0.3–0.4 mm diameter) / 121°C / 4 h. Then, the cell material is washed twice with distilled water and separated as a sediment by centrifugation. In a next step, cells are disrupted with homogenization with a pressure between 70 and 80 MPa and three passes (other parameters are not shown). The received cell walls are treated with organic solvents for the removal of lipids. Isopropanol is proposed as the most appropriate: cell walls are suspended in organic solvent in a ratio of 1:4 (w/v), heated under reflux for 2 h, centrifuged for the separation of the residue from the supernatant (5000g / 10 min) and washed three times with acetone 1:1 (w/v). The defatted cells are obtained as a sediment after centrifugation. In the final step, proteins are removed enzymatically with the use of a protease. Protamex (Novozymes Co., Denmark) is suggested as the most efficient: 15% (w/w) solid content / pH 7.5 / 55°C / 5 h (the amount of the proposed enzyme is not shown), then heating of suspension (80o C / 15 min) for inactivation of protease and centrifugation (5000g / 10 min / wash several times). Wet β-glucans (sediment) are spray dried for the preparation of the final β-glucan: 8% (w/w) solids content / inlet temperature 180o C / outlet air temperature 85o C.[25]

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิธีที่ 5วิธีการนี้ [25] คล้ายกับวิธีที่ 3 [23] ตามยีสต์เซลล์ lysis มีการใช้น้ำร้อน autolysis เซลล์ และต่อเซลล์ทรัพยกับ homogenization แทน sonication วิธีการใช้ในยีสต์ใช้ของเบียร์ โรงเบียร์ผลพลอยได้ นอกจากนี้ เอนไซม์รติเอสถูกใช้สำหรับการกำจัดผนังเซลล์โปรตีนและสารอินทรีย์กำจัดไขมัน เงื่อนไขสำหรับการใช้เอนไซม์ไม่เหมาะ ผลิตภัณฑ์สุดท้ายคือ β-กลูแคนที่ไม่ละลายน้ำ ในการเริ่มต้น ยีสต์สารละลายเซลล์จะผ่านตะแกรง (125 µm) สำหรับฟอกครั้งแรกแล้ว เหวี่ยง (4500g 10 นาที) สำหรับ 5-6 ครั้งจนกระทั่ง supernatant ชัดเจน เซลล์ยีสต์นำมาเป็นตะกอนที่หลังทิ้ง supernatant ถัดไป เกิด autolysis เซลล์: เซลล์ 15% (w/w) วัสดุ / ค่า pH 5.0 / 3% NaCl / 55° C 24 ชั่วโมง / ปั่นป่วน (120 รอบต่อนาที) แล้ว autolyzed เซลล์จะอุ่น (80° C/15 นาที) สำหรับการใช้เอนไซม์เซลล์ endolytic เซลล์ autolyzed จะแยก โดยการหมุนเหวี่ยง (4500g 10 นาที) เป็นตะกอน และถือน้ำร้อน: ระงับ 250 มล autolyzed เซลล์ / 10% (w/w) เนื้อหาของแข็ง / 0.02 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ / ค่า pH 7.5 / ประคำแก้ว 50 กรัม (0.3-0.4 มม.) / 4 h 121° C วัสดุเซลล์ถูกล้าง ด้วยน้ำกลั่นสองครั้ง แล้วแยกเป็นตะกอนการหมุนเหวี่ยง ในขั้นตอนถัดไป เซลล์อยู่ระหว่างสองวันกับ homogenization มีความดันระหว่าง 70 ถึง 80 MPa และสามผ่าน (ไม่แสดงพารามิเตอร์อื่น ๆ) ผนังเซลล์ได้รับรับการรักษา ด้วยสารละลายอินทรีย์กำจัดไขมัน Isopropanol เสนอตามความเหมาะสมมากที่สุด: ผนังเซลล์กำลังลอยอยู่ในตัวทำละลายที่อินทรีย์ในอัตราส่วน 1:4 (w/v), ความร้อนใต้ไหลย้อนสำหรับ 2h เหวี่ยงสำหรับการแยกของสารตกค้างจาก supernatant (5000g 10 นาที) และล้าง 3 ครั้ง ด้วยอะซิโตน 1:1 (w/v) เซลล์ defatted ได้รับเป็นตะกอนหลังจากการหมุนเหวี่ยง โปรตีนจะถูกเอาออกในขั้นตอนสุดท้าย enzymatically ด้วยการใช้โปรติเอส Protamex (บริษัท Novozymes เดนมาร์ก) แนะนำอย่างมีประสิทธิภาพที่สุด: เนื้อหาแข็ง 15% (w/w) / ค่า pH 7.5 / 55° C 5 ชั่วโมง (ปริมาณของเอนไซม์ที่นำเสนอจะแสดง), แล้ว ร้อนระงับ (80o C / 15 นาที) สำหรับของรติเอสและหมุนเหวี่ยง (10 นาที 5000 กรัมล้างหลายครั้ง) เปียกβ-glucans (ตะกอน) จะพ่นแห้งสำหรับการเตรียมของβ-กลูแคนสุดท้าย: 8% (w/w) ของแข็งเนื้อหา / อุณหภูมิ 180o C ร้านแอร์อุณหภูมิ 85o C. [25]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธีที่ 5
วิธีนี้ [25] มีความคล้ายคลึงกับวิธีการที่ 3 [23] อยู่บนพื้นฐานของการสลายเซลล์ยีสต์ที่มีการใช้การย่อยตัวเองของเซลล์และน้ำร้อนและการทำลายเซลล์แล้วต่อด้วยการทำให้เป็นเนื้อเดียวกันแทน sonication วิธีการที่จะนำไปใช้ในการต้มเบียร์ของยีสต์ใช้จ่ายโรงเบียร์โดยผลิตภัณฑ์ นอกจากนี้ยังมีเอนไซม์โปรติเอสถูกนำมาใช้สำหรับการกำจัดของโปรตีนผนังเซลล์และตัวทำละลายอินทรีย์สำหรับการกำจัดของไขมันที่ เงื่อนไขการใช้งานของเอนไซม์จะไม่เหมาะ ผลิตภัณฑ์สุดท้ายเป็นที่ไม่ละลายน้ำβ-Glucan ในการเริ่มต้นเซลล์ยีสต์สารละลายจะถูกส่งผ่านผ่านตะแกรง (125 ไมครอน) สำหรับการทำให้บริสุทธิ์เป็นครั้งแรกและหมุนเหวี่ยง (4500G / 10 นาที) สำหรับ 5-6 ครั้งหลังจากนั้นจนกระทั่งสารละลายที่มีความชัดเจน เซลล์ยีสต์ถูกนำมาเป็นตะกอนหลังจากทิ้งใส ถัดไป Autolysis เซลล์จะถูกเหนี่ยวนำ: 15% (w / w) วัสดุมือถือ / พีเอช 5.0 / 3% NaCl / 55 ° C / 24 ชั่วโมง / กวน (120 รอบต่อนาที) จากนั้นเซลล์ autolyzed มีความร้อน (80 ° C / 15 นาที) สำหรับการปิดเอนไซม์เซลล์ endolytic เซลล์ autolyzed ถูกแยกออกจากการหมุนเหวี่ยง (4500G / 10 นาที) เป็นตะกอนและรับการรักษาด้วยน้ำร้อน: 250 ระงับมลของเซลล์ autolyzed / 10% (w / w) ปริมาณของแข็ง / 0.02 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ / ค่า pH แก้ว 7.5 / 50 กรัม ลูกปัด (0.3-0.4 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลาง) / 121 ° C / 4 ชั่วโมง แล้ววัสดุเซลล์จะถูกชะล้างสองครั้งด้วยน้ำกลั่นและแยกเป็นตะกอนโดยการหมุนเหวี่ยง ในขั้นตอนต่อไปเซลล์จะหยุดชะงักด้วยความเป็นเนื้อเดียวกันมีความดันระหว่าง 70 และ 80 เมกะปาสคาลและสามผ่าน A (พารามิเตอร์อื่น ๆ จะไม่แสดง) ผนังเซลล์ที่ได้รับการรับการรักษาด้วยตัวทำละลายอินทรีย์สำหรับการกำจัดของไขมัน isopropanol ถูกเสนอให้เป็นที่เหมาะสมที่สุด: ผนังเซลล์จะถูกระงับในตัวทำละลายอินทรีย์ในอัตราส่วน 1: 4 (w / v) ความร้อนภายใต้กรดไหลย้อนเป็นเวลา 2 ชั่วโมง, หมุนเหวี่ยงเพื่อแยกสารตกค้างจากสารละลายที่ (5000G / 10 นาที ) และล้างสามครั้งด้วยอะซิโตน 1: 1 (w / v) เซลล์ที่สกัดจะได้รับเป็นตะกอนหลังจากการหมุนเหวี่ยง ในขั้นตอนสุดท้ายโปรตีนจะถูกลบออกเอนไซม์ที่มีการใช้โปรติเอสที่ Protamex (Novozymes Co. , เดนมาร์ก) เป็นข้อเสนอแนะที่เป็นมีประสิทธิภาพมากที่สุด: 15% (w / w) เนื้อหาที่เป็นของแข็ง / ค่า pH 7.5 / 55 ° C / 5 H (จำนวนของเอนไซม์ที่เสนอจะไม่แสดง) แล้วความร้อนของการระงับ (80o C / 15 นาที) สำหรับการใช้งานของโปรติเอสและการหมุนเหวี่ยง (5000G / 10 นาที / ล้างหลายครั้ง) เปียกβ-กลูแคน (ตะกอน) เป็นสเปรย์แห้งสำหรับการเตรียมการขั้นสุดท้ายβ-Glucan นี้: 8% (w / w) อุณหภูมิที่ของแข็งเนื้อหา / ขาเข้า 180 o C / เต้าเสียบ 85o องศาเซลเซียสอุณหภูมิอากาศ [25]