2.6. Identification and quantificat

2.6. Identification and quantification of polyphenols by HPLC-DAD/
MS–MS
An HPLC instrument (Agilent LC 1100 series; Agilent Technologies,
Inc., Palo Alto, CA, USA) controlled by the Chemstation software
was used to identify and quantify the main polyphenols
present in the UAE and CVE extracts. The HPLC instrument was
coupled to an Esquire 3000+ (Bruker Daltonics, GmbH, Bremen,
Germany) mass spectrometer equipped with an ESI source
and ion-trap mass analyzer, and controlled by Esquire control
and data analysis software. A Merck Lichrospher 100RP-18
(5 lm, 250  4 mm) column was used for analytical purposes.
Separation was performed through a linear gradient method
using 2.5% acetic acid (A) and acetonitrile (B), starting the sequence
with 10% B and programming gradient to obtain 20% B at 10 min,
40% B at 35 min, 100% B at 4 min, 100% B at 45 min, 10% B at
46 min and 10% B at 50 min. In order to ensure that the LC–MS
pump performed accurately, 10% of organic solvent was premixed
in the water phase. The flow-rate was 1 mL/min and the chromatograms
were monitored at 240, 280 and 330 nm. The mass
spectrometry operating conditions were optimized in order to
achieve maximum sensitivity values. The ESI source was operated
in negative mode to generate [MH] ions under the following
conditions: a desolvation temperature of 365
C and a vaporizer
temperature of 400
C; dry gas (nitrogen) and nebulizer were set
at 12 L/min and 70 psi, respectively. The MS data were acquired
as full scan mass spectra at 50–1100 m/z by using 200 ms for the
collection of the ions in the trap. The main compounds were identified
by means of an HPLC–DAD analysis, comparing the retention
time, UV spectra and MS/MS data of the peaks in the samples with
those of authentic standards or data reported in the literature. Only
the main olive leaf polyphenol, oleuropein, was quantified using an
external standard (Extrasynthese, GenayCedex, France).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6. การระบุและการนับจำนวนโพลีฟีนโดย HPLC พ่อ /MS – MSเครื่อง HPLC (Agilent LC 1100 ชุด เทคโนโลยี Agilentอิงค์ พาโลอัลโต CA, USA) ควบคุม โดยซอฟต์แวร์ Chemstationใช้ในการระบุ และกำหนดปริมาณโพลีฟีนหลักปัจจุบันในสหรัฐอาหรับเอมิเรตส์ และแยก CVE แก้ไขเครื่องมือ HPLCควบคู่การเป็นโฮ 3000+ (Bruker Daltonics, GmbH เบร เมนสเปกโตรมิเตอร์มวลเยอรมนี) พร้อมกับเป็นแหล่ง ESIและดักไอออนมวลวิเคราะห์ ควบคุม โดยควบคุมโฮและซอฟต์แวร์การวิเคราะห์ข้อมูล เมอร์ค Lichrospher 100RP-18(5 lm, 250 มม. 4) คอลัมน์ถูกใช้เพื่อการวิเคราะห์แยกดำเนินการผ่านวิธีการไล่ระดับสีเชิงเส้นใช้ 2.5% กรดอะซิติก (A) และ acetonitrile (B), เริ่มต้นตามลำดับไล่ระดับสีที่เขียนโปรแกรมจะได้รับ 20% B 10 นาที และ 10% B100% B ที่ 45 นาที 100% B ที่ 4 นาที 40% B เวลา 35 นาที 10% B ที่46 นาทีและ 10% B เวลา 50 นาที เพื่อให้แน่ใจว่า LC – MSปั๊มที่ดำเนินการอย่างถูกต้อง 10% ของตัวทำละลายอินทรีย์เป็น premixedในเฟสน้ำ คืออัตราการไหล 1 มิลลิลิตร/นาทีและ chromatogramsมีการตรวจสอบที่ 240, 280 และ 330 nm มวลspectrometry ปฏิบัติเงื่อนไขเหมาะสมเพื่อให้ให้ค่าความไวแสงสูงสุด ดำเนินการแหล่ง ESIในโหมดค่าลบเพื่อสร้างประจุ [M H] ภายใต้ต่อไปนี้เงื่อนไข: 365 C และ vaporizer การ desolvation อุณหภูมิอุณหภูมิ 400 C ตั้งก๊าซแห้งไนโตรเจนและฝอยละอองที่ 12 ลิตร/นาทีและ 70 psi ตามลำดับ ข้อมูล MS ได้รับมาเป็นเต็มสแกนสเปกตรัมมวลที่ 50 – 1100 m/z โดยใช้ 200 ms สำหรับการคอลเลกชันของไอออนในกับดัก ระบุสารประกอบหลักโดยวิธีการวิเคราะห์ HPLC – พ่อ เปรียบเทียบการเก็บข้อมูลเวลา สเปกตรัมรังสียูวี และ MS/MS ข้อมูลของยอดเขาในตัวอย่างมีของแท้มาตรฐานหรือข้อมูลรายงานในวรรณคดี เท่านั้นใบมะกอกหลัก polyphenol เพิ่ม ถูกวัดโดยใช้การมาตรฐานภายนอก (Extrasynthese, GenayCedex ฝรั่งเศส)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 การจำแนกชนิดและปริมาณของโพลีฟีโดยวิธี HPLC-DAD /
MS-MS
เครื่องมือ HPLC (Agilent LC 1,100 ชุด; Agilent Technologies,
Inc. , พาโลอัลโต, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา) ควบคุมโดยซอฟต์แวร์ ChemStation
ถูกใช้ในการระบุและปริมาณโพลีฟีนหลัก
ในปัจจุบัน ในยูเออีและสารสกัดจาก CVE เครื่องมือ HPLC ถูก
ควบคู่ไปยังอัศวิน 3000+ (Bruker Daltonics, GmbH, เบรเมน
เยอรมนี) สเปกโตรมิเตอร์มวลพร้อมกับแหล่งที่มาของ ESI
และไอออนกับดักวิเคราะห์มวลและควบคุมโดยการควบคุมอัศวิน
และซอฟต์แวร์การวิเคราะห์ข้อมูล เมอร์ค LiChrospher 100RP-18
(5 LM 250? 4 มิลลิเมตร) คอลัมน์นี้ถูกใช้เพื่อวัตถุประสงค์ในการวิเคราะห์.
แยกได้ดำเนินการผ่านวิธีการที่ลาดเชิงเส้น
โดยใช้กรด 2.5% อะซิติก (A) และ acetonitrile (B) เริ่มต้นลำดับ
10% B และการเขียนโปรแกรมการไล่ระดับสีที่จะได้รับ 20% B 10 นาที,
40% B ที่ 35 นาที, 100% B 4 นาที, 100% B ที่ 45 นาที, 10% B ที่
46 นาทีและ 10% B ที่ 50 นาที ในการสั่งซื้อเพื่อให้แน่ใจว่า LC-MS
ปั๊มดำเนินการอย่างถูกต้อง 10% ของตัวทำละลายอินทรีย์ผสม
ในขั้นตอนน้ำ การไหลอัตรา 1 มิลลิลิตร / นาทีและ chromatograms
ถูกตรวจสอบที่ 240, 280 และ 330 นาโนเมตร มวล
spectrometry สภาพการใช้งานมีประสิทธิภาพสูงสุดเพื่อ
ให้บรรลุค่าความไวแสงสูงสุด แหล่งที่มาของ ESI เป็นผู้ดำเนินการ
ในโหมดเชิงลบเพื่อสร้าง [M? h]? ไอออนภายใต้การดังต่อไปนี้
เงื่อนไข: อุณหภูมิ desolvation 365 ซีและไอ
? อุณหภูมิ 400 C; ก๊าซแห้ง (ไนโตรเจน) และ nebulizer ที่ตั้งอยู่
ที่ 12 ลิตร / นาทีและ 70 ปอนด์ต่อตารางนิ้วตามลำดับ ข้อมูล MS ได้มา
เต็มสแกนสเปกตรัมมวลที่ 50-1100 M / z โดยใช้ MS 200 สำหรับ
คอลเลกชันของไอออนในกับดัก สารประกอบหลักที่ถูกระบุ
โดยวิธีการของการวิเคราะห์ HPLC-DAD เปรียบเทียบการเก็บรักษา
เวลาสเปกตรัมรังสียูวีและข้อมูล MS / MS ของยอดเขาในตัวอย่างที่มี
ผู้มาตรฐานของแท้หรือข้อมูลรายงานในวรรณคดี เพียง
หลักใบมะกอกโพลีฟีน, oleuropein ถูกวัดโดยใช้
มาตรฐานภายนอก (Extrasynthese, GenayCedex ฝรั่งเศส)