2.3. Sample collection and preparat

2.3. Sample collection and preparation
Prior to morning feeding on day 21, a 5-mL blood sample was collected
from the anterior vena cava of each pig. Plasma was obtained
after centrifugation at 3000 ×g for 15 min at 4 °C, and then stored at
−80 °C for D-lactate and DAO detection.
After blood sampling, the piglets were anesthetized by injection of
sodium pentobarbital solution (50 mg/kg of BW) andwere killed by exsanguination.
The small intestinewas removed and 4 cm of jejunumtissue
from the midpoint of the jejunum was collected, gently rinsed with
0.1 M phosphate buffered saline (PBS) at pH 7.2, and then fixed in 10%
formaldehyde-phosphate buffer for subsequent histological and immunohistochemical
analysis. About 3 g of jejunal mucosa was snap-frozen
in liquid nitrogen, and stored at −80 °C until the tissue total RNA
isolation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 การเก็บตัวอย่างและการเตรียมความพร้อม
ก่อนที่จะมีการให้อาหารเช้าในวันที่ 21 ตัวอย่างเลือด 5 มิลลิลิตรถูกเก็บรวบรวม
จาก Cava หน้า Vena ของแต่ละหมู พลาสม่าที่ได้รับ
หลังจากการหมุนเหวี่ยงที่ 3000 ×กรัมเป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียสและจากนั้นเก็บไว้ที่
-80 ° C D-แลคเตทและการตรวจสอบ DAO.
หลังจากการเก็บตัวอย่างเลือดลูกสุกรได้รับการดมยาสลบโดยการฉีด
สารละลายโซเดียม Pentobarbital (50 มก / กิโลกรัมของ BW) andwere ฆ่าตายโดยการเอา.
intestinewas เล็กถอดออกและ 4 เซนติเมตร jejunumtissue
จากจุดกึ่งกลางของลำไส้เล็กส่วนกลางที่ถูกเก็บรวบรวมล้างเบา ๆ ด้วย
0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ (พีบีเอส) ที่ pH 7.2 และจากนั้นการแก้ไขใน 10%
ดีไฮด์ บัฟเฟอร์ -phosphate สำหรับการตรวจชิ้นเนื้อตามมาและ immunocytochemistry ของ
การวิเคราะห์ ประมาณ 3 กรัมของเยื่อบุ jejunal เป็นสแน็ปอินแช่แข็ง
ในไนโตรเจนเหลวและเก็บไว้ที่ -80 องศาเซลเซียสจนเนื้อเยื่อ RNA รวม
แยก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การเก็บตัวอย่างและการเตรียมตัวก่อนที่จะให้อาหารเช้าวันที่ 21 , 5-ml การเก็บตัวอย่างเลือดจากหน้าเวนาคาวาของแต่ละหมู พลาสมาที่ได้รับหลังการปั่นเหวี่ยงที่ 3000 × G สำหรับ 15 นาทีที่ 4 ° C แล้วเก็บไว้ที่− 80 ° C d-lactate และการค้นหาดาวหลังจากตัวอย่างเลือด , ลูกถูกวางยาสลบ โดยการฉีดสารละลายโซเดียม เพน ( 50 มิลลิกรัมต่อกิโลกรัมของน้ำหนักตัว ) และฆ่าโดยไหลหมดตัวเล็ก 4 ซม. jejunumtissue intestinewas ลบออกจากจุดกึ่งกลางของเดือนเพื่อล้าง กับ เบา ๆ0.1 M phosphate buffered น้ำเกลือ ( PBS ) ที่ pH 7.2 และแก้ไขแล้วใน 10 %ฟอร์มาลดีไฮด์ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์สำหรับต่อมาหนูการวิเคราะห์ ประมาณ 3 กรัม jejunal เยื่อเมือกเป็น snap แช่แข็งในไนโตรเจนเหลว ที่อุณหภูมิ 80 องศา C และ บริษัท เวสเทิร์น จนกว่าเนื้อเยื่อทั้งหมด .แยก