Materials and methods
Major produce areas including East of Guilan and West of Mazandaran were selected for the sample of the study in 2008 and 2009. The regions selected in East of Guilan were Chaboksar, Rudsar, Langerud and in west of Mazandaran were Ramsar, Tonekabon, Chalus, Noshahr. The number of samples which were selected in each location depended on the hectarage of orchard. Each sample consisting of five to ten sub-samples, were collected at a depth of 10-40 cm around the citrus trees canopy. The samples were maintained in refrigerator at 4˚C until processing by centrifugal flotation technique. A total of 110 soil and root samples were taken. The 150 g soil samples were washed and the nematodes extracted by centrifugal flotation technique. Then they were fixed and transferred to glycerin according to the De Grisse method (1969).
Nematodes were extracted from roots by Terry method (Whitehead and Hemming, 1965). First the soil was washed from roots and the roots were chopped into 1 cm lengths and were placed on the terry. Terry tray full of water, So that, pieces root are in water flooding. 10 consecutive days of water in the trays passed through the sieve 400 Mesh. Nematodes collected and all of them were counted. In order to view and taking pictures of root lesion nematodes, attempting to stained root tissues. For staining nematodes in root was used of Southey (1970) method. First, the root pieces with a hypochlorite sodium solution made colorless. Then placed in acid fuchsin solution and it has been boiled for 30 seconds. Finally, roots were transferred to acidic glycerol, root Clear and nematode was observed red. A stereo microscope was used for counting number of Pratylenchus. Permanent slides were prepared from the extracted nematodes. After microscopic consideration, the useful measurements and drawings (morphological and morphometrical characters) were attained by using a drawing tube attached to the microscope and their identities confirmed with recent taxonomic keys. Major Characters used to identify the different species included: tail shape, whether the tail was smooth or crenate/ annulated, the number of head annules and type and number of lateral lines. (Handoo and Golden, 1989; Castillo and Vovlas, 2007).
The occurrence of a nematode species in samples is expressed as frequency. Absolute frequency is the percentage of times a nematode species occurs in a known number of samples, whereas relative frequency, also expressed as a percentage, is the relation between absolute frequency of a species and absolute frequency of all pratylenchus species. The mean population for each species in 150 g soil and 1 g root are stated.
วัสดุและวิธีการพื้นที่ผลิตหลัก Guilan ของตะวันออกและตะวันตกของ Mazandaran ได้เลือกสำหรับตัวอย่างของการศึกษาใน 2008 และ 2009 ภูมิภาคที่เลือกในตะวันออกของ Guilan Chaboksar, Rudsar, Langerud และในทางตะวันตกของ Mazandaran มีอนุสัญญาแรมซาร์ Tonekabon, Chalus, Noshahr จำนวนตัวอย่างที่ถูกเลือกในแต่ละตำแหน่งขึ้นอยู่กับ hectarage ของออร์ชาร์ด แต่ละอย่างที่ประกอบด้วยตัวอย่างย่อยห้าถึงสิบ ถูกเก็บที่ความลึก 10-40 เซนติเมตรรอบหลังคาต้นไม้ส้ม ตัวอย่างถูกเก็บไว้ในตู้เย็น 4˚C จนประมวลผล ด้วยเทคนิคแรงเหวี่ยงลอย รวมตัวอย่างดินและราก 110 ที่ถ่าย ตัวอย่างดิน 150 กรัมถูกล้าง และ nematodes การสกัด ด้วยเทคนิคแรงเหวี่ยงลอย จากนั้น พวกเขาถูกแก้ไข และโอนกลีเซอรีนตามวิธีของ De Grisse (1969)Nematodes ที่สกัดจากราก โดยวิธีเทอร์รี่ (สิวหัวขาวและ Hemming, 1965) ก่อน ถูกล้างดินจากราก และรากถูกสับลงในความยาว 1 ซม. และวางอยู่บนเทอร์รี่ เทอร์รี่ถาดเต็มไปด้วยน้ำ ดังนั้น ส่วนรากอยู่ในน้ำท่วม ติดต่อกัน 10 วันน้ำในถาดส่งผ่านตะแกรงตาข่าย 400 Nematodes รวบรวม และการนับ ในการดูและภาพของรากแผล nematodes พยายามย้อมเนื้อเยื่อราก ย้อม nematodes ในรากถูกใช้ของ Southey (1970) วิธี ครั้งแรก ชิ้นรากด้วยโซเดียมไฮโปคลอไรต์ทำสี วางลงในโซลูชัน fuchsin กรด และมีการต้ม 30 วินาที ในที่สุด รากถูกย้ายไปกลีเซอรอลเป็นกรด รากล้างและนีมาโทดาถูกสังเกตสีแดง กล้องจุลทรรศน์แบบสเตอริโอถูกใช้สำหรับการนับจำนวน Pratylenchus มีเตรียมสไลด์ถาวรจาก nematodes แยก หลังจากพิจารณาด้วยกล้องจุลทรรศน์ ประโยชน์วัด และภาพวาด (สัณฐานและ morphometrical) ได้บรรลุ โดยใช้หลอดวาดกับกล้องจุลทรรศน์และข้อมูลเฉพาะตัวของพวกเขายืนยันกับคีย์อนุกรมวิธานที่ล่า ตัวละครหลักใช้ในการระบุสายพันธุ์ต่าง ๆ รวม: หางรูปร่าง ว่าหางไม่ราบรื่น หรือ crenate / annulated จำนวนหัว annules และชนิดและจำนวนของบรรทัดด้านข้าง (Handoo และโกลเด้น 1989 Castillo และ Vovlas, 2007)การเกิดขึ้นของนีมาโทดาชนิดในตัวอย่างที่แสดงความถี่ ความถี่ที่แน่นอนเป็นเปอร์เซ็นต์ของเวลานีมาโทดาชนิดที่เกิดขึ้นในจำนวนที่ทราบตัวอย่าง ในขณะที่ความถี่สัมพัทธ์ ซึ่งแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ เป็นความสัมพันธ์ระหว่างความถี่ของสายพันธุ์และความถี่ที่สมบูรณ์พันธุ์ pratylenchus มีระบุประชากรเฉลี่ยสำหรับแต่ละสายพันธุ์ในรากดินและ 1 กรัม 150 กรัม
การแปล กรุณารอสักครู่..

วัสดุและวิธีการพื้นที่ผลิตหลักรวมทั้งตะวันออกและตะวันตกของ guilan Markazi สุ่ม กลุ่มตัวอย่างที่ใช้ในการศึกษา ในปี 2008 และ 2009 ภูมิภาคที่เลือกในทางตะวันออกของ guilan เป็น chaboksar rudsar langerud , , และในทางตะวันตกของ Markazi Tonekabon เป็น Ramsar noshahr ชาลูส , , , . จำนวนตัวอย่างที่ถูกเลือกในแต่ละตำแหน่งขึ้นอยู่กับ hectarage ของสวนผลไม้ แต่ละตัวอย่างประกอบด้วยห้าถึงสิบตัวอย่างย่อยจำนวนที่ความลึก 10-40 ซม. รอบต้นไม้ส้มทรงพุ่ม ตัวอย่างที่ถูกเก็บรักษาไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส จน˚การประมวลผลโดยใช้เทคนิควิธีการลอยตัว . ทั้งหมด 110 ดินและราก จำนวนรับ 150 กรัม ( ล้างและไส้เดือนฝอยในดินได้ โดยเทคนิควิธีการลอยตัว . แล้วพวกเขาได้รับการแก้ไขและโอนให้หม่นหมองตาม เดอ grisse วิธี ( 1969 )ไส้เดือนฝอย สกัดจากรากโดยเทอร์รี่วิธี ( สิวและขอบ , 1965 ) ตอนแรกก็ล้างดินจากรากและรากถูกสับเป็น 1 ซม. ความยาวและถูกวางไว้บนเทอร์รี่ เทอร์รี่ ถาดเต็มรูปแบบของน้ำ ดังนั้น รากชิ้นในน้ำน้ำท่วม 10 วันติดต่อกัน น้ำในถาดผ่านตะแกรง 400 ตาข่าย ไส้เดือนฝอยที่รวบรวมทั้งหมดของพวกเขาถูกนับ ในการมุมมองและการถ่ายภาพของไส้เดือนฝอยรากแผลพยายามที่จะย้อมเนื้อเยื่อของราก สำหรับการใช้ไส้เดือนฝอยในรากของซัทธีย์ ( 1970 ) วิธี ชิ้นแรก รากด้วย โซเดียมไฮโซลูชันที่ไม่มีสี แล้ววางไว้ในสารละลายกรดเท่าและได้รับต้มประมาณ 30 วินาที ในที่สุด ราก คือ กรดกลีเซอรอล , ชัดเจนและไส้เดือนฝอยรากพบว่าสีแดง กล้องจุลทรรศน์สเตอริโอถูกใช้สำหรับการนับจำนวน pratylenchus . สไลด์ถาวรเตรียมจากสารสกัดพยาธิไส้เดือนตัวกลม หลังจากที่ทางพิจารณาการวัดประโยชน์และภาพวาด ( ทาง morphometrical อักขระ ) บรรลุโดยใช้แบบท่อแนบกับกล้องจุลทรรศน์และตัวตนของพวกเขายืนยันกับคีย์ล่าสุดทาง . ตัวละครหลักที่ใช้เพื่อระบุชนิดที่แตกต่างกัน ได้แก่ หาง ไม่ว่าหางเรียบหรือเป็น / เป็นวงแหวน จำนวน annules หัวและชนิดและจำนวนของเส้นด้านข้าง ( handoo และสีทอง , 1989 ; คาสติลโล่ และ vovlas , 2007 )การเกิดของพยาธิตัวกลมชนิด ในตัวอย่างจะแสดงเป็นค่าความถี่ ความถี่สัมบูรณ์คือเปอร์เซ็นต์ของพยาธิตัวกลมชนิดครั้งเกิดขึ้นในรู้จักหมายเลขตัวอย่าง และการแจกแจงความถี่สัมพัทธ์ ยังแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์คือ ความสัมพันธ์ระหว่างความถี่สัมบูรณ์ของชนิดและความถี่ที่แน่นอนของสายพันธุ์ pratylenchus ทั้งหมด จำนวนประชากรในแต่ละชนิดในดินและราก 1 กรัม 150 กรัม เป็น ระบุ
การแปล กรุณารอสักครู่..
