3.1. Identification of bioactive com

3.1. Identification of bioactive compounds in fractions B–D
Bioassay-guided isolation of A. cryptantha PE extract showed that fractions B–D were more effective inhibiting bacterial growth.The fraction B (2612.4 mg) was purified by medium pressure column chromatography MPCC (column length: 70 cm, diameter:5 cm, 100 g of silica gel) and eluted with a PE–EtOAc gradient affording 10 fractions of 200 ml each. Compound 1 (azorellolide,3.7 mg) was obtained from fraction 4 (32.1 mg) by RP-HPLC using water–methanol 2:8 as mobile phase. The NMR data of compound 1 are in agreement with literature (Colloca et al., 2004).The fraction C (721.8 mg) was permeated through a SephadexLH-20 column (column length 35 cm, diameter 4 cm) in methanol.Fifteen fractions were obtained based on TLC profiles (mobile phase EtOAc-PE 3:7 and sprayed with p-anisaldehide).Fraction C-6 (302.5 mg) was successively purified by preparative RP-HPLC using water-methanol 2:8 as mobile phase, followed by preparative TLC purification using ciclohexane–EtOAc (7:3) as eluent, to yield compounds 2 (mulinol, 11.6 mg), and 3 (stachytriol,4.6 mg). The NMR data of these compounds are in good agreement with literature (Loyola et al., 1997b; Soliman et al., 2007).On the other hand, the MeOH–soluble portion (1355 mg) of fraction D was permeated through a Sephadex LH-20 column (columnlength 35 cm, diameter 4 cm) in methanol. The fractions obtained were displayed similar TLC profiles were combined.Fraction D-(5–6) (289 mg) was purified by RP-HPLC using water-methanol (4:6) as eluent to yield compound 4: 11045-diepoxy-7-germacran-6-ol (23 mg), and its isomer 5:1104,5-diepoxy-7-germacran-6-ol (20.6 mg). Additionally, a complex mixture (88.6 mg) was further purified by RP-HPLC using water–methanol (3:7) as mobile phase to yield 0.5 mg of compound 6:1,2,3,3a,4,5,6,7,8,8a-decahydro-7-(1-hydroxy-1-methylethyl)-1,4-dimethylazulene-3a,8a-diol, and 2.7 mg of compound 7: madreporanone. All spectroscopic data of the isolated compounds are in agreement with literature (Sanz and Marco,1991; Anh et al., 1996; Loyola et al., 2002; Colloca et al.,2004).Fraction D-(7–8) (131 mg) was chromatographed on silica gel(column length 47 cm, diameter 2.5 cm, 50) with a PE–EtOAc gradient affording 210 fractions of 25 ml each. After TLC comparison(silica gel, PE–EtOAc 7:3), the fractions with similar TLC patterns were pooled into eight fractions. From fraction 4, was purified by RP–HPLC using water–methanol (3:7) as mobile phase to yield compound 8 (yaretol, 17 mg). The NMR data of compound 8 are inagreement with literature (Loyola et al., 2002).Fraction E (1444 mg) was
permeated through a Sephadex LH-20 column (column length 35 cm, diameter 4 cm) in methanol.Eight fractions were obtained based on TLC profiles. The fractionE-8 (294.6 mg) was chromatographed on silica gel (column length45 cm, diameter 2 cm, 100 g) with an EP–EtOAc and then for successive purifications by RP–HPLC to yield compound 9: chrysotol or 6,10-epoxy-4-hydroxyguaiane (5 mg) being coincident NMR data with literature (Ahmed et al., 2006). The fractionation is summarized in Fig. 1.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.1. Identification สารกรรมการกในส่วน B – Dแนะนำ bioassay แยกสารสกัดจาก A. cryptantha PE พบว่า เศษส่วน B – D ถูกเพิ่มประสิทธิภาพ inhibiting เจริญเติบโตของแบคทีเรีย เศษส่วน B (2612.4 mg) เป็น purified โดยความดันปานกลางคอลัมน์ chromatography MPCC (คอลัมน์ความยาว: 70 ซม. ซม.เส้นผ่าศูนย์กลาง: 5, 100 กรัมของซิลิก้าเจล) และ eluted กับไล่ PE – EtOAc ซาวน่า 10 เศษของ 200 ml ทบ 1 (azorellolide, 3.7 มิลลิกรัม) ที่ได้จากเศษ 4 (32.1 มิลลิกรัม) โดย RP HPLC ใช้น้ำ – เมทานอลเฟสถือ 2:8 ข้อมูล NMR 1 ผสมมีข้อตกลงกับวรรณกรรม (Colloca et al., 2004) เศษส่วน C (721.8 มิลลิกรัม) มี permeated ผ่านคอลัมน์ SephadexLH-20 (คอลัมน์ความยาว 35 ซม. เส้นผ่านศูนย์กลาง 4 cm) ในเมทานอล สิบห้าเศษได้รับตาม TLC profiles (ระยะเคลื่อน EtOAc PE 3:7 และฉีดพ่น ด้วย p anisaldehide) เศษส่วน C-6 (302.5 มิลลิกรัม) ติด ๆ กันเป็น purified โดย preparative RP-HPLC ใช้เมทานอลน้ำ 2:8 ระยะถือ ตาม purification TLC preparative ใช้ ciclohexane-EtOAc (7:3) เป็น eluent ให้สาร 2 (mulinol, 11.6 มิลลิกรัม), และ 3 (stachytriol, 4.6 มิลลิกรัม) ข้อมูล NMR ของสารประกอบเหล่านี้อยู่ในข้อตกลงที่ดีกับวรรณกรรม (โลโยลา et al., 1997b สุลัย et al., 2007) บนมืออื่น ๆ ส่วนทานอละลาย (1355 มิลลิกรัม) ของเศษส่วน D มี permeated ผ่านคอลัมน์ Sephadex LH 20 (columnlength 35 ซม. เส้นผ่านศูนย์กลาง 4 cm) ในเมทานอล ส่วนที่ได้รับได้แสดง profiles TLC คล้ายถูกรวม เศษ D-(5–6) (289 มิลลิกรัม) ถูก purified โดย RP HPLC ใช้น้ำเมทานอล (4:6) เป็น eluent ให้ผสม 4: 11045-diepoxy-7-germacran-6-ol (23 มิลลิกรัม), และเป็นไอโซเมอร์ 5:1104,5-diepoxy-7-germacran-6-ol (20.6 mg) นอกจากนี้ ส่วนผสมที่ซับซ้อน (88.6 มิลลิกรัม) ถูกเพิ่มเติม purified โดย RP HPLC ใช้น้ำ – เมทานอล (3:7) เป็นเฟสเคลื่อนที่ให้ผลผลิต 0.5 มก.ผสม 6:1,2,3,3a,4,5,6,7,8,8a-decahydro-7-(1-hydroxy-1-methylethyl)-1,4-dimethylazulene-3a,8a-diol และ 2.7 มก.ผสม 7: madreporanone ข้อมูลทั้งหมดด้านสารแยกจะยังคงประกอบการ (Sanz และมาร์โค 1991 อันห์ et al., 1996 โลโยลาและ al., 2002 Colloca et al., 2004) เศษ D-(7–8) (131 mg) มี chromatographed บนซิลิก้าเจล (คอลัมน์ความยาว 47 ซม. เส้นผ่านศูนย์กลาง 2.5 ซม. 50) กับไล่ PE – EtOAc ซาวน่าเศษ 210 ของ 25 ml หลังจากเปรียบเทียบ TLC (ซิลิก้าเจล PE-EtOAc 7:3), เศษส่วน ด้วยรูปแบบ TLC คล้ายถูกทางถูกพูเป็นเศษส่วน 8 จากเศษส่วนที่ 4, purified โดย RP-HPLC ใช้น้ำ – เมทานอล (3:7) เป็นเฟสเคลื่อนที่ 8 ผสม (yaretol, 17 มิลลิกรัม) ให้ ข้อมูล NMR ของผสม 8 ไม่ inagreement กับวรรณกรรม (โลโยลาและ al., 2002) ส่วนอี (1444 มิลลิกรัม) มี permeated ผ่านคอลัมน์ Sephadex LH 20 (คอลัมน์ความยาว 35 ซม. เส้นผ่านศูนย์กลาง 4 cm) ในเมทานอล ส่วนที่ 8 ได้รับตาม TLC profiles FractionE-8 (294.6 มิลลิกรัม) ถูก chromatographed ในซิลิก้าเจล (คอลัมน์ length45 ซม. เส้นผ่านศูนย์กลาง 2 เซนติเมตร 100 g) กับ EP – EtOAc และ สำหรับ purifications ต่อเนื่องโดย RP-HPLC ให้ผสม 9: chrysotol หรือ 6,10-อีพ๊อกซี่-4-hydroxyguaiane (5 มิลลิกรัม) มีข้อมูล NMR ตรงกับวรรณกรรม (Ahmed และ al., 2006) แยกส่วนที่จะสรุปใน Fig. 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.1 ไอออนบวกสายระบุของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพในเศษส่วน B-D
แยกชีวภาพแนะนำของเอ cryptantha PE สารสกัดพบว่าเศษส่วน B-D มีประสิทธิภาพมากขึ้นการยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อแบคทีเรียส่วน B (2,612.4 มก.) ถูกเอ็ดสาย Puri โดยคอลัมน์ดันปานกลาง MPCC (ความยาวคอลัมน์ : 70 ซม. เส้นผ่าศูนย์กลาง: 5 ซม., 100 กรัมของซิลิกาเจล) และชะกับ PE-EtOAc ลาดเจตนารมณ์ 10 เศษของ 200 มลแต่ละ สารประกอบที่ 1 (azorellolide 3.7 มก.) ที่ได้รับจากส่วน 4 (32.1 มก.) โดย RP-HPLC โดยใช้น้ำเมทานอล 2: 8 เฟสเคลื่อนที่ ข้อมูล NMR ของสารประกอบที่ 1 อยู่ในข้อตกลงกับวรรณกรรม (Colloca et al., 2004) ได้โดยเริ่มต้นส่วน C (721.8 มก.) ได้รับการแทรกซึมผ่านคอลัมน์ SephadexLH-20 (ความยาว 35 ซมคอลัมน์ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 4 ซม.) ในเศษส่วน methanol.Fifteen ที่ได้รับขึ้นอยู่กับ TLC โปรไฟ les (เฟสเคลื่อนที่ EtOAc-PE ที่ 3: 7 และฉีดพ่นด้วยพี anisaldehide) .Fraction C-6 (302.5 มก.) ได้รับการอย่างต่อเนื่อง Puri สาย ed โดยเตรียม RP-HPLC โดยใช้น้ำเมทานอล 2: 8 เฟสเคลื่อนที่เป็น ตามมาด้วยการเตรียม TLC Puri ไอออนบวกไฟใช้ ciclohexane-EtOAc (7: 3) ​​เป็นตัวชะ, เพื่อให้สาร 2 (mulinol 11.6 มก.) และ 3 (stachytriol 4.6 มก.) ข้อมูล NMR ของสารเหล่านี้อยู่ในข้อตกลงที่ดีกับวรรณกรรม (Loyola, et al, 1997b.. Soliman et al, 2007) ในทางกลับกันส่วนที่ละลายในเมธานอล (1,355 มก.) ของส่วน D ถูกแทรกซึมผ่าน Sephadex LH-20 คอลัมน์ (columnlength 35 ซม. ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 4 ซม.) ในเมทานอล เศษส่วนได้มีการแสดงผลที่คล้ายกัน TLC โปรไฟ les เป็น combined.Fraction D- (5-6) (289 มก.) เป็นเอ็ดสาย Puri โดย RP-HPLC โดยใช้น้ำเมทานอล (4: 6) เป็นตัวชะที่จะให้ผลผลิตสารประกอบที่ 4: 11045-diepoxy-7 -germacran-6-เฒ่า (23 มก.) และ isomer ที่ 5: 1104,5-diepoxy-7-germacran-6-เฒ่า (20.6 มก.) นอกจากนี้ส่วนผสมที่ซับซ้อน (88.6 มก.) เป็นสาย Puri ต่อ ed โดย RP-HPLC โดยใช้น้ำเมทานอล (3: 7) เฟสเคลื่อนที่ให้ผลผลิต 0.5 mg ของสารประกอบที่ 6: 1,2,3,3a, 4,5,6, 7,8,8a-decahydro-7 (1 ไฮดรอกซี-1-methylethyl) -1,4-dimethylazulene-3a, 8a-diol และ 2.7 มิลลิกรัมของสารที่ 7: madreporanone ข้อมูลทั้งหมดสเปกโทรสโกของสารที่แยกอยู่ในข้อตกลงกับวรรณกรรม (ซานซ์และมาร์โก, 1991; Anh et al, 1996;. Loyola, et al., 2002;. Colloca, et al, 2004) .Fraction D- (7-8) ( 131 มก.) ได้รับการ chromatographed บนซิลิกาเจล (ความยาว 47 ซมคอลัมน์ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 2.5 ซม. 50) กับ PE-EtOAc ลาดเจตนารมณ์ 210 เศษของ 25 มล. แต่ละ หลังจากเปรียบเทียบ TLC (ซิลิกาเจล, PE-EtOAc 7: 3) ​​เศษส่วนที่มีรูปแบบที่คล้ายกัน TLC ถูกรวบรวมเป็นแปดเศษส่วน จากส่วนที่ 4 ถูกไฟ Puri ed โดย RP-HPLC โดยใช้น้ำเมทานอล (3: 7) เฟสเคลื่อนที่เพื่อให้สารประกอบ 8 (yaretol 17 มก.) ข้อมูล NMR ของสารประกอบ 8 จะ inagreement กับวรรณกรรม (Loyola et al., 2002) .Fraction อี (1,444 มก.) ได้รับการ
แทรกซึมผ่าน Sephadex LH-20 คอลัมน์ (ความยาว 35 ซมคอลัมน์ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 4 ซม.) ในเศษส่วน methanol.Eight อยู่ ที่ได้รับขึ้นอยู่กับ TLC โปรไฟ les fractionE-8 (294.6 มก.) ได้รับการ chromatographed บนซิลิกาเจล (length45 ซมคอลัมน์ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 2 ซม. 100 กรัม) กับ EP-EtOAc แล้วสำหรับไพเพอร์ปูรีไฟต่อเนื่องโดย RP-HPLC เพื่อให้สารที่ 9: chrysotol หรือ 6,10- อีพ็อกซี่-4-hydroxyguaiane (5 มก.) เป็นข้อมูล NMR ประจวบวรรณกรรม (อาเหม็ด et al., 2006) แยกสรุปในรูป 1