Next, the lysate–PB buffermix was t

Next, the lysate–PB buffer
mix was transferred to the spin columns from the MinElute1 PCR
Purification Kit (Qiagen, Hilden, Germany). Due to the exceeded
lysate volume, the volume of the spin columns was enlarged by
attaching 20 ml extenders (Qiagen, Hilden, Germany). The
columns with the extenders and the lysate were placed on the
QIAvac 24 Plus device and lysate was drawn through the column
membrane by a vacuum, which was built up with a vacuum pump
in combination with the QIAvac Connecting System (Qiagen,
Hilden, Germany). Vacuum was applied till all lysate has passed
thought the membrane. Next, 750 ml of PE-buffer was added on the
column and incubated for 5 min. PE-buffer was drawn through the
membrane by applying the vacuum. This wash step was repeated
again twice. The column was then placed in a 2 ml collection tube
and centrifuged at 16,000 rcf for 1 min. After 15 min of drying, DNA
was finally eluted by adding 60 ml of ROTISOLV1 LC MS grade
water (Roth, Karlsruhe, Germany) to the columns and centrifuging
them at 16,000 rcf for 1 min.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ถัดไป บัฟเฟอร์ lysate-PBผสมโอนย้ายไปยังคอลัมน์หมุนจาก MinElute1 PCRชุดอุปกรณ์ทำให้บริสุทธิ์ (Qiagen, Hilden เยอรมนี) เนื่องจากที่เกินlysate ปริมาตร ปริมาตรของคอลัมน์หมุนขยายใหญ่ขึ้นโดยแนบ extenders 20 ml (Qiagen, Hilden เยอรมนี) การคอลัมน์กับ extenders lysate ที่วางอยู่บนการQIAvac 24 พร้อมอุปกรณ์ และ lysate มาผ่านคอลัมน์เมมเบรน โดยสูญญากาศ ที่สร้างขึ้นกับปั๊มสุญญากาศร่วมกับ QIAvac เชื่อมต่อระบบ (QiagenHilden เยอรมนี) ดูดจน lysate ของทั้งหมดได้ผ่านใช้คิดว่า เมมเบรน ถัดไป ถูก 750 มล.ของ PE บัฟเฟอร์การคอลัมน์ และได้รับการกกสำหรับ 5 นาทีบัฟเฟอร์ PE มาผ่านการเยื่อหุ้มเซลล์ โดยใช้เครื่องดูดฝุ่น ขั้นตอนการล้างนี้ซ้ำอีกสองครั้ง วางคอลัมน์ในหลอด 2 มล.เป็นเหวี่ยง rcf 16,000 1 นาทีที่แล้ว หลังจาก 15 นาทีของการอบแห้ง ดีเอ็นเอสุดท้ายถูก eluted โดยการเพิ่มเกรด ROTISOLV1 LC MS 60 mlน้ำ (Roth คาร์ลสฮัวร์ เยอรมนี) คอลัมน์ และถ้าพวกเขาที่ 16,000 rcf 1 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ถัดไปบัฟเฟอร์ lysate-ตะกั่ว
ผสมถูกย้ายไปที่คอลัมน์ปั่นจาก MinElute1 PCR
Kit บริสุทธิ์ (Qiagen, ฮิลเดน, เยอรมนี) เนื่องจากเกิน
ปริมาณ lysate ปริมาณของคอลัมน์หมุนขยายโดย
แนบ 20 มล. ยืด (Qiagen, ฮิลเดน, เยอรมนี)
คอลัมน์กับยืดและ lysate ถูกวางไว้บน
อุปกรณ์ QIAvac 24 Plus และ lysate ถูกดึงผ่านคอลัมน์
เมมเบรนโดยสูญญากาศซึ่งถูกสร้างขึ้นกับปั๊มสูญญากาศ
ในการทำงานร่วมกับระบบการเชื่อมต่อ QIAvac (Qiagen,
ฮิลเดน, เยอรมนี) . เครื่องดูดฝุ่นถูกนำมาใช้จน lysate ทั้งหมดได้ผ่านการ
คิดว่าเมมเบรน ถัดไป 750 มิลลิลิตร PE-บัฟเฟอร์ถูกเพิ่มเข้ามาใน
คอลัมน์และบ่มเป็นเวลา 5 นาที PE-บัฟเฟอร์ถูกดึงผ่าน
เมมเบรนโดยใช้สูญญากาศ ขั้นตอนการล้างนี้ซ้ำ
อีกครั้งเป็นครั้งที่สอง คอลัมน์นี้ถูกวางไว้ในหลอดคอลเลกชัน 2 มิลลิลิตร
และหมุนเหวี่ยงที่ 16,000 RCF เป็นเวลา 1 นาที หลังจาก 15 นาทีของการอบแห้งดีเอ็นเอ
ถูกชะที่สุดโดยการเพิ่ม 60 มล. ของเกรด ROTISOLV1 LC MS
น้ำ (โรทรีฟฟ์เยอรมนี) คอลัมน์และเหวี่ยง
พวกเขาที่ 16,000 RCF เป็นเวลา 1 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ต่อไป lysate – PB บัฟเฟอร์ผสม ถูกย้ายไปปั่นคอลัมน์จาก PCR minelute1ชุดบำบัด ( QIAGEN Hilden , เยอรมนี ) เนื่องจากการเกินปริมาณ lysate , ปริมาณของปั่นคอลัมน์ถูกขยายโดยติด 20 ml สูตร ( QIAGEN Hilden , เยอรมนี ) ที่คอลัมน์ที่มีการยืดและ lysate ถูกวางไว้บนqiavac 24 พร้อมอุปกรณ์และ lysate วาดผ่านคอลัมน์เยื่อแผ่นสูญญากาศ ซึ่งถูกสร้างขึ้นด้วยเครื่องปั๊มสูญญากาศในการรวมกันกับ qiavac เชื่อมต่อระบบ ( เพิ่ม ,ฮิลเดน , เยอรมนี ) เครื่องดูดฝุ่นใช้จนกว่า lysate ได้ผ่านคิดว่า เมมเบรน ถัดไป , 750 ml PE บัฟเฟอร์ที่เพิ่มในคอลัมน์โดย 5 นาที PE บัฟเฟอร์ถูกดึงผ่านเยื่อแผ่นโดยใช้สุญญากาศ นี้ล้างขั้นตอนซ้ำอีกสองครั้ง คอลัมน์ที่ถูกวางไว้แล้วใน 2 หลอดเก็บมลไฟฟ้าที่ 16 , 000 rcf เป็นเวลา 1 นาที หลังจาก 15 นาทีของการอบแห้ง , ดีเอ็นเอในที่สุด ตัวอย่าง โดยการเพิ่ม 60 มิลลิลิตร rotisolv1 LC MS เกรดน้ำ ( ร็อธ , Karlsruhe , เยอรมนี ) คอลัมน์และสารไว้ที่ 16 , 000 rcf เป็นเวลา 1 นาที