2. Materials and methods2.1. Food s

2. Materials and methods

2.1. Food samples

The following materials were used: juices of the local producers (multivegetable, grapefruit, orange), fruits and vegetables (banana, kiwi fruit, cauliflower, broccoli, cucumber, tomato, parsley leaves), fruit cream in powder, infant milk powder, and multivitamin syrup. Infant milk powder consists of whey protein, vegetable oils, lactose, skimmed milk, calcium citrate, potassium citrate, soy lecithin, potassium chloride, L-phenylalanine, magnesium chloride,
ascorbic acid, all-rac-a-tocopheryl acetate, retinol palmitate,

The sample was homogenized for 1 min using Ultra Turrax homogenizer and then centrifuged for 5 min at 12,000g. The super- natant was filtered through a 0.45-lm syringe filter. The obtained extract was divided into two parts; one part was used for determi-
nation of ascorbic acid (AAp) and the other for determination of total content of vitamin C (TC) after reduction of DHAA. Then
0.2 mL of 100 mM solution of tris(2-carboxyethyl)phosphine was
added to 2 mL of the extract and the sample was continuously sha- ken for 30 min in the dark.
During all stages of analysis the temperature in laboratory was between 23 and 25 C. All analyses were repeated six times and results are expressed as mg of analyte/100 g fresh mass in the case of fruits and vegetables and mg of analyte/100 g of product for the remaining samples.

2.4. HPLC analysis

A reversed phase HPLC method was used for determination of total content of vitamin C and AA. Analyses were performed with the use of Varian (USA) HPLC system equipped with a diode-array detector (DAD, type 335), an isocratic pomp (type 210), a dosing valve 7725i (Rheodyne, USA) and a column thermostat. Galaxie Chromatography Data System, version 1.9.302 (Varian, USA) was used for process control and data collection. Separations were
made using a column Gemini (150 4.6 mm, 3 lm, C18, Phenom-
enex, USA) connected with a pre-column Gemini (4 3 mm, C18, Phenomenex, USA). The injection volume was 20 lL. The mobile phase was a solution of orthophosphoric acid at pH 2.8 pumped



at a flow of 0.6 mL/min. Chromatograms were recorded at 244 nm and temperature of 30 C. The concentration of AA was calculated from equation of the calibration curve plotted for the standard solutions. AA identification was performed on the basis of reten- tion time and UV absorption spectrum of the standard ascorbic acid sample (Fig. 1).
In the first stage the content of AA was analyzed in the sample (AAp, Eq. (2)) and then DHAA was reduced quantitatively using tris(2-carboxyethyl)phosphine and total content of vitamin C was determined (TC, Eq. (3)). The concentration of DHAA (DHAAp) was calculated by subtracting the initial concentration of AA from total concentration of vitamin C (the subtraction method). Calculation of the analytes content was performed according to Gökmen et al. (2000) methodology with modification concerning the choice of reducer and manner of its addition to the extract of vitamin C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 การตัวอย่างอาหารใช้วัสดุต่อไปนี้: ครีมผง นมผงเด็ก และวิตามินน้ำผลไม้น้ำผลไม้ผลิตในท้องถิ่น (multivegetable ส้มโอ ส้ม), ผัก และผลไม้ (กล้วย กีวีผลไม้ cauliflower บรอกโคลี แตงกวา มะเขือเทศ ใบผักชีฝรั่ง), นมผงทารกประกอบด้วยเวย์โปรตีน น้ำมันพืช ย่อยแลคโตส นมขาดมันเนย แคลเซียมซิเตรต โพแทสเซียมซิเตรต ถั่วเหลืองเลซิติน โพแทสเซียม คลอไรด์ L phenylalanine แมกนีเซียมคลอไรด์กรดแอสคอร์บิค ทั้งหมด-rac-a-หน่วยสากล retinol palmitate ตัวอย่าง homogenized เป็นกลุ่มใน 1 นาทีใช้ homogenizer Ultra Turrax และ centrifuged ใน 5 นาทีที่ 12, 000g ซุปเปอร์-natant ถูก filtered ผ่าน filter เข็ม 0.45-lm สารสกัดได้รับถูกแบ่งออกเป็นสองส่วน ส่วนหนึ่งใช้สำหรับ determiประเทศของกรดแอสคอร์บิค (AAp) และอื่น ๆ สำหรับการกำหนดเนื้อหารวมของวิตามินซี (TC) หลังจากการลดลงของ DHAA แล้ว0.2 mL ของ 100 มม.ของ tris(2-carboxyethyl) phosphine ถูกเพิ่ม 2 mL ของการดึงข้อมูล และตัวอย่างอย่างต่อเนื่องเป็น sha-เคนใน 30 นาทีในมืดในทุก ๆ ขั้นตอนของการวิเคราะห์ ในห้องปฏิบัติได้ระหว่าง 23 และ 25 c วิเคราะห์ทั้งหมดถูกทำซ้ำ 6 ครั้ง และผลลัพธ์จะแสดงเป็นมิลลิกรัมของ analyte/100 g มวลสดในกรณีของผัก และผลไม้และ mg ของ analyte/100 g ของผลิตภัณฑ์ตัวอย่างที่เหลือ2.4 การการวิเคราะห์ HPLCวิธี HPLC ระยะกลับถูกใช้สำหรับการกำหนดเนื้อหารวมของวิตามินซีและเอเอ ได้ดำเนินการวิเคราะห์ ด้วยการใช้ของแล้วแต่กำหนด (สหรัฐอเมริกา) HPLC ระบบพร้อมกับไดโอดอาร์เรย์เครื่องตรวจจับ (พ่อ พิมพ์ 335), การเอิกเกริก isocratic คิด (ชนิด 210) กระบวนการวาล์ว 7725i (Rheodyne สหรัฐอเมริกา) และอุณหภูมิคอลัมน์ ระบบข้อมูล Chromatography Galaxie รุ่น 1.9.302 (แล้วแต่กำหนด สหรัฐอเมริกา) ถูกใช้สำหรับเก็บข้อมูลและควบคุมกระบวนการ ประโยชน์ได้ทำได้โดยใช้คอลัมน์เมถุน (150 4.6 มม. 3 lm, C18, Phenom -enex สหรัฐอเมริกา) ที่เชื่อมต่อกับเมถุนคอลัมน์ก่อน (4 มม. 3, C18, Phenomenex สหรัฐอเมริกา) ปริมาณฉีดได้ 20 จะ เฟสเคลื่อนโซลูชันของ orthophosphoric กรดที่ pH 2.8 ขุ่น ที่ flow ของ 0.6 mL/นาที บันทึก Chromatograms ที่ 244 nm และอุณหภูมิ 30 c มีคำนวณความเข้มข้นของ AA จากสมการของเส้นโค้งเทียบพล็อตสำหรับโซลูชั่นมาตรฐาน เอเอ identification ที่ดำเนินการโดยใช้เวลา reten สเตรชันและ UV สเปกตรัมการดูดซึมของตัวอย่างมาตรฐานกรดแอสคอร์บิค (Fig. 1)ในระยะ first เนื้อหาของ AA ได้วิเคราะห์จากตัวอย่าง (AAp, Eq. (2)) แล้ว DHAA ถูกลดการใช้ quantitatively tris(2-carboxyethyl) กำหนดเนื้อหา phosphine และผลรวมของวิตามินซี (TC, Eq. (3)) ความเข้มข้นของ DHAA (DHAAp) ถูกคำนวณ โดยลบความเข้มข้นเริ่มต้นของ AA จากความเข้มข้นรวมของวิตามินซี (วิธีลบ) เนื้อหา analytes ที่คำนวณตามวิธี (2000) Gökmen et al. กับ modification ที่เกี่ยวข้องกับการเลือกลักษณะนี้ของสารสกัดของวิตามินซีและลด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 ตัวอย่างอาหารวัสดุดังต่อไปนี้ถูกนำมาใช้: น้ำผลไม้ของผู้ผลิตในท้องถิ่น (multivegetable, ส้มโอ, ส้ม), ผักและผลไม้ (กล้วยผลไม้กีวี cauli ชั้น Ower บรอกโคลีแตงกวามะเขือเทศใบผักชีฝรั่ง) ครีมผลไม้ผงนมผงทารก และน้ำเชื่อมวิตามิน นมผงทารกประกอบด้วยเวย์โปรตีน, น้ำมันพืช, แลคโตส, ไขมันต่ำนมซิเตรตแคลเซียมซิเตรตโพแทสเซียมเลซิตินจากถั่วเหลือง, โพแทสเซียมคลอไรด์, L-phenylalanine, แมกนีเซียมคลอไรด์, วิตามินซีทุก RAC-a-tocopheryl acetate, palmitate เรตินตัวอย่างที่ได้รับการปั่นเป็นเวลา 1 นาทีโดยใช้ homogenizer Turrax อัลตร้าและปั่นแล้วเป็นเวลา 5 นาทีที่ 12,000g natant ซุปเปอร์ถูกไฟ ltered ผ่านเข็มฉีดยา 0.45 ไมครอนกรองไฟ สารสกัดที่ได้แบ่งออกเป็นสองส่วน ส่วนหนึ่งที่ใช้สำหรับ determi- ประเทศของวิตามินซี (AAP) และอื่น ๆ สำหรับการกำหนดเนื้อหาโดยรวมของวิตามินซี (TC) หลังจากที่ลดลงของ DHAA แล้ว0.2 มิลลิลิตร 100 มิลลิวิธีการแก้ปัญหาของ tris (2 carboxyethyl) ฟอสฟีนถูกเพิ่มเข้ามาใน2 มิลลิลิตรของสารสกัดและตัวอย่างต่อเนื่อง sha- เคนเป็นเวลา 30 นาทีในที่มืด. ในระหว่างการทุกขั้นตอนของการวิเคราะห์ในห้องปฏิบัติการอุณหภูมิอยู่ระหว่าง 23 และ 25 องศาเซลเซียสการวิเคราะห์ทั้งหมดได้ซ้ำแล้วซ้ำอีกหกครั้งและผลจะแสดงเป็นมิลลิกรัมวิเคราะห์ / 100 กรัมมวลสดในกรณีของผักและผลไม้และมิลลิกรัมวิเคราะห์ / 100 กรัมของผลิตภัณฑ์สำหรับตัวอย่างที่เหลือ. 2.4 HPLC วิเคราะห์กลับขั้นตอนวิธี HPLC ถูกนำมาใช้ในการกำหนดเนื้อหารวมของวิตามินซีและเอเอ วิเคราะห์ได้ดำเนินการกับการใช้งานของ Varian (USA) ระบบ HPLC เพื่อการติดตั้งเครื่องตรวจจับไดโอดอาร์เรย์ (DAD ประเภท 335) ซึ่งเป็นท่าทาง isocratic (ประเภท 210) วาล์วยา 7725i (Rheodyne สหรัฐอเมริกา) และเทอร์โมคอลัมน์ กาแลกซี่โครมาโตระบบข้อมูลรุ่น 1.9.302 (Varian สหรัฐอเมริกา) ถูกนำมาใช้สำหรับการควบคุมกระบวนการผลิตและการเก็บรวบรวมข้อมูล แยกถูกทำโดยใช้คอลัมน์ราศีเมถุน (150 4.6 มม 3 LM, C18, Phenom- Enex สหรัฐอเมริกา) เชื่อมต่อกับคอลัมน์ก่อนราศีเมถุน (4 3 มม C18, Phenomenex สหรัฐอเมริกา) ปริมาณการฉีด 20 LL ขั้นตอนถือเป็นวิธีการแก้ปัญหาของกรด orthophosphoric ที่ pH 2.8 สูบที่ฟลอริด้าโอ๊ย0.6 มิลลิลิตร / นาที chromatograms ถูกบันทึกไว้ที่ 244 นาโนเมตรและอุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสความเข้มข้นของ AA ที่คำนวณได้จากสมการของเส้นโค้งการสอบเทียบวางแผนสำหรับการแก้ปัญหามาตรฐาน AA ไอออนบวกสายระบุได้ดำเนินการบนพื้นฐานของเวลาการ reten- และสเปกตรัมการดูดซึมรังสียูวีของกลุ่มตัวอย่างวิตามินซีมาตรฐาน (รูปที่ 1).. ในสายขั้นตอนแรกเนื้อหาของ AA วิเคราะห์ในตัวอย่าง (AAP, สม. (2)) แล้ว DHAA ลดลงปริมาณการใช้ tris (2 carboxyethyl) ฟอสฟีนและเนื้อหาโดยรวมของวิตามินซีที่ถูกกำหนด (TC, สม. (3)) ความเข้มข้นของ DHAA (DHAAp) ที่คำนวณได้จากการลบความเข้มข้นเริ่มต้นของ AA จากความเข้มข้นรวมของวิตามินซี (วิธีการลบ) การคำนวณการวิเคราะห์เนื้อหาได้ดำเนินการตามGökmen et al, (2000) วิธีการที่มีประจุบวก Modi สายเกี่ยวกับทางเลือกของการลดและลักษณะของการนอกจากนี้ในการสารสกัดจากวิตามินซี

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ

2.1 . ตัวอย่างอาหาร

วัสดุดังต่อไปนี้ที่ใช้ : ผลไม้ของผู้ผลิตในท้องถิ่น ( multivegetable , ส้มโอ , ส้ม ) ผักและผลไม้ ( กล้วย , ผลไม้กีวี cauli flอาวเวอร์ คะน้า แตงกวา มะเขือเทศ ใบผักชีฝรั่ง ) , ผลไม้ครีมผง นมผงทารก วิตามินน้ำเชื่อม นมผงทารกประกอบด้วยเวย์โปรตีน , น้ำมันพืช แลคโตส นมพร่องมันเนยแคลเซียมซิเตรท , โพแทสเซียมซิเตรต , ถั่วเหลืองเลซิติน , โพแทสเซียมคลอไรด์ , แอล - ฟีนิลอะลานีน , แมกนีเซียมคลอไรด์ ,
กรดแอสคอร์บิค all-rac-a-tocopheryl acetate , เรตินอลที่สุด

ตัวอย่าง , บด 1 นาทีโดยใช้อัลตร้า turrax Homogenizer แล้วไฟฟ้าสำหรับ 5 นาทีที่ 12000g . Super - natant ถูกถ่ายทอดผ่าน 0.45-lm ltered เข็มจึง lter . สารสกัดที่ได้ถูกแบ่งออกเป็นสองส่วนส่วนหนึ่งถูกใช้สำหรับการพยา -
ประเทศของกรดแอสคอร์บิค ( AAP ) และอื่น ๆสำหรับการวิเคราะห์ปริมาณรวมของวิตามิน C ( TC ) หลังจากการลด dhaa . งั้น
0.2 มิลลิลิตร สารละลายของบริษัท 100 มม. ( 2-carboxyethyl ) ฟอสฟีนเป็น
เพิ่ม 2 มิลลิลิตรของสารสกัดและตัวอย่างต่อเนื่อง ซาเคนเป็นเวลา 30 นาทีในที่มืด
ในระหว่างขั้นตอนทั้งหมดของการวิเคราะห์อุณหภูมิในห้องปฏิบัติการระหว่าง 23 และ 25 C ทั้งหมดวิเคราะห์เป็นเวลาหกครั้ง และผลลัพธ์ที่ได้จะแสดงเป็นมิลลิกรัม / 100 กรัม สดครูมวลในกรณีของผักและผลไม้ และมิลลิกรัม / 100 กรัมของผลิตภัณฑ์ สำหรับครู จำนวนที่เหลือ

2.4 .

a การวิเคราะห์ HPLC กลับเฟส HPLC ได้ใช้วิธีการกำหนดเนื้อหาทั้งหมดของวิตามินซีและ AAวิเคราะห์ข้อมูลการใช้เครื่อง HPLC ( USA ) ระบบติดตั้งไดโอดเรย์ตรวจจับ ( พ่อ , 335 ชนิด ) , เอิกเกริก Isocratic ( ประเภท 210 ) , วาล์วจ่าย 7725i ( rheodyne , USA ) และคอลัมน์เบื้องต้น . galaxie chromatography ข้อมูลระบบ , รุ่น 1.9.302 ( Varian , USA ) ใช้สำหรับควบคุมกระบวนการและการเก็บข้อมูล แยกเป็น
ทำโดยใช้คอลัมน์ราศีเมถุน ( 150 4.6 มม. 3 อิม c18 , ,สมรรถนะ -
enex , USA ) เชื่อมต่อกับ pre คอลัมน์ราศีเมถุน ( 4 3 มิลลิเมตร c18 phenomenex , USA ) ปริมาณการฉีด 20 จะ เฟสเคลื่อนที่เป็นโซลูชั่นของออร์โธฟอสฟอริกแอซิดที่ pH 2.8 สูบ



ที่flโอ๊ย 0.6 มิลลิลิตร / นาที ให้กลิ่นที่ถูกบันทึกไว้ที่ 244 nm และอุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสความเข้มข้นของ AA ถูกคำนวณจากสมการของรูปโค้งวางแผนสำหรับมาตรฐานโซลูชั่นAA identi จึงการกระทำบนพื้นฐานของ reten - tion และ UV การดูดซึมสเปกตรัมของมาตรฐานตัวอย่างกรดแอสคอร์บิก ( รูปที่ 1 ) .
ในจึงตัดสินใจเดินทางไปเวทีเนื้อหาของ AA ได้วิเคราะห์ตัวอย่าง ( AAP อีคิว ( , 2 ) ) และปริมาณการใช้ลดลง dhaa ทริส ( 2-carboxyethyl ) ฟอสฟีนและรวมเนื้อหาของวิตามิน C ถูกกำหนด ( TC , อีคิว ( 3 ) )