The primers and probe were designed

The primers and probe were designed with the Primer Express
software (version 2.1, Applied Biosystems, Foster, California) inside
the TMS1 fragment to amplify a 142 bp amplicon. The forward primer
was degenerate because of the polymorphism observed in the
region of pTi Bo542 (Accession number DQ058764.1). The DNA
plant quality was checked with universal plant universal primers
(Taberlet, Gielly, Pautou, & Bouvet, 1991). In the present study,
new primers and probes were also newly designed targeting
regions present in the Agrobacterium sp. and present in different
GMO events, namely: the P-mas, T-Tr7 and T-mas (Table 1). The
real-time PCR experiments were performed on an ABI 7900 with
the software upgrade for nonfluorescent quencher probe support.
The qPCR reactions were also run using the Power SYBR
Green
PCR Master Mix (Applied Biosystems) and the appropriate PCR
primers. Bacterial standards ranging in dilution from 1  107 to
1  10CFU/ml were run on each plate. Melting temperature
(Tm) was measured for each qPCR reaction. If the measured Tm
was outside the prespecified range (determined from the standards)
for each specific organism then the resulting concentration
was considered not detected.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ไพรเมอร์และโพรบถูกออกแบบ ด้วยพื้นด่วนซอฟต์แวร์ (รุ่น 2.1, Biosystems ใช้ ฟอสเตอร์ แคลิฟอร์เนีย) ภายในส่วน TMS1 ขยาย amplicon เป็น bp 142 รองพื้นไปข้างหน้าdegenerate เพราะโพลิมอร์ฟิซึมในภูมิภาคของ pTi Bo542 (ทะเบียนหมายเลข DQ058764.1) ดีเอ็นเอตรวจสอบคุณภาพพืชกับพืชสากลสากลไพรเมอร์(Taberlet, Gielly, Pautou และบู เว 1991) ในการศึกษาปัจจุบันไพรเมอร์ใหม่และคลิปปากตะเข้ก็ยังเพิ่งมากำหนดเป้าหมายภูมิภาคแสดงใน sp.อโกรแบคทีเรียม และนำเสนอในที่ต่าง ๆจีเอ็มโอเหตุการณ์ ได้แก่: P-มาส T Tr7 และ T-มาส (ตารางที่ 1) ที่ดำเนินการทดลอง PCR แบบเรียลไทม์บน 7900 ลักชัวรี่ที่มีซอฟต์แวร์อัพเกรดสำหรับสนับสนุนโพรบ nonfluorescent quencherปฏิกิริยา qPCR ยังถูกเรียกใช้พลังงาน SYBR เขียวผสมหลัก PCR (Biosystems ใช้) และ PCR ที่เหมาะสมไพรเมอร์ มาตรฐานจากแบคทีเรียเจือจางจาก 1 107 ไปจนถึง1 10 CFU/ml ถูกเรียกใช้บนแต่ละแผ่น อุณหภูมิการละลาย(Tm) เป็นวัดในแต่ละปฏิกิริยา qPCR ถ้า Tm วัดมีอยู่ช่วง prespecified (กำหนดจากมาตรฐาน)สำหรับสิ่งมีชีวิตแต่ละเฉพาะความเข้มข้นได้เขาก็ไม่ตรวจพบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ไพรเมอร์และการสอบสวนได้รับการออกแบบด้วยไพรเมอร์เอ็กซ์เพรสซอฟแวร์ (รุ่น 2.1, Applied Biosystems, ฟอสเตอร์, แคลิฟอร์เนีย) ภายในส่วนTMS1 เพื่อขยาย 142 bp amplicon ไพรเมอร์ไปข้างหน้าเป็นคนเลวเพราะความแตกต่างที่สังเกตได้ในพื้นที่ของPTI Bo542 (หมายเลขภาคยานุวัติ DQ058764.1) ดีเอ็นเอที่มีคุณภาพได้รับการตรวจสอบโรงงานที่มีไพรเมอร์สากลพืชสากล(Taberlet, Gielly, Pautou และบูเวต, 1991) ในการศึกษาปัจจุบัน, ไพรเมอร์โพรบใหม่และยังได้รับการออกแบบใหม่กำหนดเป้าหมายภูมิภาคในปัจจุบันเอสพี Agrobacterium และนำเสนอในที่แตกต่างกันเหตุการณ์จีเอ็มโอคือ: P-Mas T-TR7 และ T-Mas (ตารางที่ 1) แบบ real-time PCR ทดลองได้ดำเนินการใน ABI 7900 ที่มีการอัพเกรดซอฟต์แวร์สำหรับnonfluorescent ดับสนับสนุนการสอบสวน. ปฏิกิริยา qPCR ยังทำงานโดยใช้พลังงาน SYBR? สีเขียวPCR โทผสม (Applied Biosystems) และ PCR ที่เหมาะสมไพรเมอร์ มาตรฐานแบคทีเรียหลากหลายในการลดสัดส่วนตั้งแต่วันที่ 1? ที่จะ 107 1 10 CFU / ml วิ่งในแต่ละจาน จุดหลอมเหลว(TM) วัดสำหรับแต่ละปฏิกิริยา qPCR ถ้าวัด Tm อยู่นอกช่วง prespecified (กำหนดจากมาตรฐาน) สำหรับแต่ละสิ่งมีชีวิตที่เฉพาะเจาะจงแล้วความเข้มข้นที่เกิดขึ้นได้รับการพิจารณาตรวจไม่พบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ไพรเมอร์ที่ออกแบบและตรวจสอบด้วยไพรเมอร์ด่วน
ซอฟต์แวร์ ( รุ่น 2.1 ประยุกต์ Biosystems ฟอสเตอร์ แคลิฟอร์เนีย ) ภายใน tms1
ส่วนขยายและเป็น 142 BP .
primer ไปข้างหน้าก็เสื่อมเพราะความหลากหลายที่พบในเขตของ bo542 PTI
( เปลี่ยนเบอร์ dq058764.1 ) ดีเอ็นเอ
พืชคุณภาพตรวจสอบกับพืชสากล สากล ไพรเมอร์ ( taberlet gielly
, ,pautou &บูเวต์ , 1991 ) ในการศึกษาดีเอ็นเอโพรบและ
ใหม่ยังออกแบบใหม่เป้าหมาย
ภูมิภาคในปัจจุบัน Agrobacterium sp . และปัจจุบันแตกต่างกัน
จีเอ็มโอเหตุการณ์ คือ p-mas t-tr7 , และ t-mas ( ตารางที่ 1 )
PCR แบบเรียลไทม์จากจำนวนการอัพเกรดซอฟต์แวร์ ABI 7900 กับ
สนับสนุนตรวจสอบ nonfluorescent
เร .การ qpcr ปฏิกิริยายังเรียกการใช้พลังงานสีเขียว SYBR

PCR Master Mix ( Applied Biosystems ) และเหมาะสม PCR
รองพื้น มาตรฐานของตั้งแต่ในเจือจางจาก 1  107
1  10  cfu / ml มีวิ่งในแต่ละจาน ละลายอุณหภูมิ
( TM ) คือวัดแต่ละ qpcr ปฏิกิริยา ถ้าวัด TM
ข้างนอกช่วงจร ( พิจารณาจากมาตรฐาน )
สำหรับแต่ละสิ่งมีชีวิตเฉพาะแล้วซึ่งสมาธิ
ถือว่าไม่พบ