Microscopic study of ultrasound-med

Microscopic study of ultrasound-mediated microbubble destruction
effects on vascular smooth muscle cells
Bo Zhang1*
, Yi-Rong Hou1
, Tian Chen1
, Bing Hu2
1
Department of Ultrasound Medicine, East Hospital, School of Medicine, Tongji University, Shanghai 200120, China
2
Department of Ultrasound, 6th People’s Hospital Affiliated to Shanghai Jiaotong University, Shanghai, China
Contents lists available at ScienceDirect
Asian Pacific Journal of Tropical Medicine
journal homepage:www.elsevier.com/locate/apjtm
ARTICLE INFO ABSTRACT
Article history:
Received15 January 2015
Received in revised form 20 February 2015
Accepted 15 March 2015
Available online 20 April 2015
Keywords:
Atomic force acoustic microscopy
Vascular smooth muscle cell
Ultrasound
Microbubble
*Corresponding author: Bo Zhang, M.D., Chief Physician, Department of
Ultrasound Medicine, East Hospital, School of Medicine, Tongji University, Shanghai
200120, China.
Tel: [phone]
E-mail: [e-mail]
Foundation project: It is supported by Shanghai Pudong New Area Health Plan
Committee Of Academic Leaders Project (NO. PWRd2013-02), National Natural
Fund (NO. 81401428).
1. Introduction
Coronary heart disease and cerebral vascular stenosis caused by
cardiovascular and cerebrovascular stenosis has become one of
the main life-threatening diseases in human health and safety[1,2].
At present, vascular stenosis treatments are divided into three
categories: drug treatment, surgical operation, interventional therapy.
Among these methods, interventional therapy is a new treatment
that has minimum trauma effects and performs well. Percutaneous
transluminal angioplasty (PTA) is a common approach for relieving
stenosis, and improving cardiac and cerebral blood supply; but this
approach has a recurrence rate of 30%-50%[3]. Research revealed
that excessive proliferation and migration of smooth muscle cells
were the main causes, which leads to restenosis[4]. Effectively
preventing vascular restenosis after PTA operation has been a
big problem that needs to be solved during cardiovascular and
cerebrovascular disease PTA treatments. So far, there are mainly
Objective: To observe vascular smooth muscle cell morphological changes induced by
ultrasound combined with microbubbles by Atomic Force Acoustic Microscopy (AFAM).
Methods: A7r5 rat aortic smooth muscle cells were divided into groups: control group (without
ultrasonic irradiation, no micro bubbles) and US+MB group (45 kHz, 0.4 W/cm2
ultrasound
irradiate for 20 seconds with a SonoVue™ concentration of [(56-140)暳105
/mL]. Cell micromorphological
changes (such as topographic and acoustic prognosis) were detected, before and
after ultrasound destruction by AFAM. Results: In cell morphology, smooth muscle cells were
spread o and connected to each another by fibers. At the center of the cell, the nuclear area had
a rough surface and was significantly elevated from its surroundings. The cytoskeletal structure
of the reticular nucleus and cytoplasm in the morphology of A7r5 cells (20毺m×20毺m) were
clear before microbubble intervention. After acoustic exciting, the cell structure details of
the acoustic image were improved with better resolution, showing the elasticity of different
tissues. In the acoustic image, the nucleus was harder, more flexible and uneven compared
with the cytoplasm. Many strong various-sized echo particles were stuck on the rough nuclear
membrane’s substrate surface. The nuclear membrane did not have a continuous smooth
surface; there were many obstructions (pores). After ultrasound-intervention was combined
with microbubbles, the dark areas of the A7r5 cell images was increased in various sizes and
degrees. The dark areas showed the depth or low altitudes of the lower regions, suggesting
regional depressions. However, the location and scope of the acoustic image dark areas were
not similar to those found in the topographic images. Therefore, it was likely that the dark
areas, both from the topographic and acoustic images, were sound-holes. In addition, some
cell nuclei become round in different degrees after irradiation. Conclusions: Atomic force
microscopy and acoustic excitation method can noninvasively and completely display a cell’s
structure, connections and elastic properties at a nano scale in just several minutes. The dark
areas, both from the topographic and acoustic images, may be sound-holes; therefore, it would
be helpful if these sound-holes were found. These findings provide a relationship between cell
apoptosis after ultrasound and microbubble ultrasound irradiation, and the sound-hole effect.
IF: 0.926
326 Bo Zhang et al./Asian Pacific Journal of Tropical Medicine (2015)325-329
four methods used for reducing restenosis; but the effects are not
ideal[3]. Among those methods, anticoagulants does not achieve high
local drug concentrations surrounding the stent. Radiation can easily
cause hemal brittleness, increasing the rate of cancer. At present,
gene therapy is still not a safe, effective and stable method for
enabling the objective gene to express in the target organs. The longterm
efficacy of drug-eluting stents has not yet been determined;
however, the risk of inducing thrombosis has already been proven[4].
Therefore, there is an urgent clinical need for establishing a method
that has a long-term efficacy and can conveniently, safely, and
efficiently inhibit intimal hyperplasia; as well as preventive methods
for vascular restenosis.
In recent years, it has been found that ultrasonic irradiation can
inhibit proliferation and promote vascular smooth muscle cell
apoptosis[5]. This method can be used for treating vascular restenosis,
which promises positive results in clinical practice. However, the
efficiency of inhibiting cells’ proliferation is rather low. Study of
Zhang et al revealed that cell apoptosis is only around 3%[6] after
ultrasonic irradiation. Consequently, researchers are studying the
effect of the combination of ultrasonic irradiation and microbubbles.
And it turned out that the combination method performed better
than using ultrasonic irradiation purely, which could led 20% cells’
apoptosis after s ultrasonic irradiation for 24 hour[7]. What’s more,
with the same irradiation frequency and intensity, different types of
microbubbles can have a direct impact on ultrasonic intervention,
which may be associated with the number of microbubbles, the
expansion size at a certain frequency and radiation intensity, and the
jets and shock waves that occurs when a bubble bursts. Atomic force
acoustic microscopy (AFAM) has been developed to observe the
morphology and internal information of a cell. AFAM can produce
high-resolution images by atomic force microscopy (AFM) and
provide a non-destructive imaging method by acoustic microscopy.
These features can help observe atomic force micrographs and
acoustic microscopy in situ, simultaneously. AFAM can obtain the
internal information of cells through acoustic waves at a nanometerlevel
resolution. Once the ultrafine images and elastic coefficients
of the same internal and surface areas are acquired, a 3D image of
the sample can be easily obtained. The elasticity information of cells
can also be observed by AFAM, which has become a powerful tool
for observing cell morphology. The research aims to observe the
morphological changes of vascular smooth muscle cells (A7r5 cells)
after ultrasound, and microbubble ultrasound irradiation by AFAM.
We hope to explain the effects of microbubbles on single vascular
smooth muscle cells and to explore the mechanisms of vascular
smooth muscle cell apoptosis. Providing experimental basis and
reference would be helpful in exploring the most suitable frequency
and microbubble dose for further studies.
2. Materials and methods
2.1. Cell preparation method and cell samples
A7r5 rat aortic smooth muscle cells were purchased from the cell
bank of the Chinese Academy of Sciences. Cells were cultured
with a high glucose DMEM medium, containing 10% fetal bovine
serum and 1% penicillin and streptomycin, in a cultivating box with
5% CO2 at 37 曟. A borosilicate glass was used as a cell adhesion
substrate. To make the polylysine adhere on the glass coverslips, the
coverslips were immersed and soaked in ethanol for 15 minutes, and
100 毺g/mL of polylysine diluted with PBS solution 0.25 mL was
dribbled on the coverslips; after preparation, the coverslips kept at 4
曟 overnight. On the next day, the excess polylysine was absorbed
and the coverslips were washed with sterile water, twice[5]. Then,
the coverslips were air-dried and irradiated in ultraviolet light for 15
minutes[5].
The coverslips were placed in a 6-well culture plate, placed in 1
伊106
/mL cells 1 mL, then the cells were cultured according to the
above conditions. It was removed when 70%-80% of the coverslip
was covered with cells.
2.2. Experimental equipment
Instruments used for the experiment included: carbon dioxide
incubator (BPH-9042, Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co.
Ltd.); HiRox7700 optical microscope (for observing cells in 6-well
culture plate); ultrasonic transducer connected to an ultrasonic
generator (model: dm-40; Acoustic Laboratory of Shanghai
Academy of Sciences, China), the output power was monitored by a
digital power analyzer (model: ppa2500; N4L); needle hydrophone
(model: SPRH -S -1000; SEA) connected to a digital display
(model: TDS 1024B Tech); Atomic force acoustic microscopy was
used for monitoring ultrasound (AFAM, SPM by Veeco DI, Santa
Barbara, CA, USA production). Two AFAM modes, contact mode
and vibration mode were used.
2.3. Analysis method
The cells were divided into 2 groups: control group (treated without
ultrasonic irradiation, no microbubbles) and US+MB group [45 kHz,
0.4 W/cm2
by ultrasound-mediated microbubble destruction for 20
seconds with microbubble concentration: (56-140)伊105
microbubbles
per milliliter]. The coverslips that were covered with cells were
placed into c

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ศึกษาด้วยกล้องจุลทรรศน์ทำลาย microbubble mediated ซาวด์ลักษณะพิเศษบนเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือดบ่อ Zhang1 *ร่องยี่ Hou1เทียน Chen1, Bing Hu21แพทย์แผนกอัลตร้าซาวด์ ตะวันออกโรงพยาบาล โรงเรียนแพทย์ มหา เซี่ยงไฮ้ 200120 จีน2ฝ่ายซาวด์ 6 คนโรงพยาบาลที่สังกัดมหาวิทยาลัยมหาวิทยาลัยเซี่ยงไฮ้ เซี่ยงไฮ้ จีน เนื้อหารายการ ScienceDirectสมุดเอเชียแปซิฟิกของเวชศาสตร์เขตร้อนสมุด homepage:www.elsevier.com/locate/apjtmบทความข้อมูลบทคัดย่อบทความประวัติ:Received15 2015 มกราคมรับแบบฟอร์มที่ปรับปรุง 20 2015 กุมภาพันธ์15 2015 มีนาคมการยอมรับมีออนไลน์ 20 2015 เมษายนคำสำคัญ:แรงอะตอม microscopy อะคูสติกเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือดอัลตร้าซาวด์Microbubble * ผู้เขียนที่เกี่ยวข้อง: บ่อจาง นพ. หัวหน้าแพทย์ ภาควิชายาอัลตร้าซาวด์ ตะวันออกโรงพยาบาล โรงเรียนแพทย์ มหา เซี่ยงไฮ้200120 จีน โทร: 86-15800620806 อีเมล์: [e-mail] โครงการมูลนิธิ: ตามเซี่ยงไฮ้ผู่ตงใหม่ตั้งสุขภาพวางแผนคณะกรรมการโครงการผู้นำทางวิชาการ (หมายเลข PWRd2013-02), ธรรมชาติแห่งชาติกองทุนรวม (หมายเลข 81401428)1. บทนำ โรคและตีบของหลอดเลือดสมองที่เกิดจากcerebrovascular และหลอดเลือดหัวใจตีบได้กลายเป็นหนึ่งหลักชีวิตคุกคามโรคสุขภาพของมนุษย์และความปลอดภัย [1, 2]ปัจจุบัน การรักษาหลอดเลือดตีบจะแบ่งออกเป็น 3หมวดหมู่: ยารักษา interventional บำบัด การดำเนินการผ่าตัดในวิธีการเหล่านี้ interventional บำบัดเป็นการรักษาแบบใหม่ที่มีลักษณะการบาดเจ็บน้อยที่สุด และทำดี Percutaneousangioplasty transluminal (PTA) เป็นวิธีการทั่วไปสำหรับการปลดปล่อยตีบ และเพิ่มเลือดหัวใจ และสมองจัดหา แต่นี้วิธีมีอัตราเกิดของ 30% - 50% [3] เปิดเผยงานวิจัยที่แพร่หลายมากเกินไปและการย้ายถิ่นของเซลล์กล้ามเนื้อเรียบมีสาเหตุหลัก ซึ่งนำไปสู่การ restenosis [4] อย่างมีประสิทธิภาพป้องกันหลอดเลือด restenosis หลังจากดำเนินงาน PTA ได้รับการปัญหาใหญ่ที่ต้องแก้ไขในระหว่างหัวใจและหลอดเลือด และการรักษาโรค cerebrovascular PTA ไกล มีส่วนใหญ่วัตถุประสงค์: เพื่อสังเกตการเปลี่ยนแปลงของเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือดเกิดจากอัลตร้าซาวด์ร่วมกับ microbubbles โดยอะตอมแรงระดับ Microscopy (AFAM)วิธีการ: เซลล์กล้ามเนื้อเรียบที่เอออร์ตาหนู A7r5 ได้แบ่งกลุ่ม: กลุ่มควบคุม (ไม่ได้วิธีการฉายรังสีอัลตราโซนิก ไม่มีฟองอากาศขนาดเล็ก) และสหรัฐอเมริกา + MB (45 kHz, 0.4 W/cm2 อัลตร้าซาวด์แผ่รังสี 20 วินาทีด้วยความเข้มข้น SonoVue ™ [(56-140) 暳105/mL] เซลล์ micromorphologicalเปลี่ยนแปลง (เช่นคาดคะเน topographic และอะคูสติก) พบ ก่อน และหลังจากอัลตร้าซาวด์การทำลายโดย AFAM ผลลัพธ์: ในสัณฐานวิทยาของเซลล์ เซลล์กล้ามเนื้อเรียบได้o กระจาย และเชื่อมต่อกับแต่ละอื่น ๆ โดยเส้นใย ที่เซลล์ ตั้งนิวเคลียร์ได้พื้นผิวหยาบและสูงขึ้นอย่างมากจากสภาพแวดล้อม โครงสร้าง cytoskeletalreticular นิวเคลียสและไซโทพลาซึมในรูปร่าง A7r5 ถูกเซลล์ (20毺m × 20毺m)ยกเลิกก่อนที่จะแทรกแซง microbubble หลังจากที่อคูสติกที่น่าตื่นเต้น รายละเอียดของโครงสร้างเซลล์ของรูปอะคูสติกถูกปรับปรุง ด้วยความละเอียดดี แสดงความยืดหยุ่นของแตกต่างกันเนื้อเยื่อ ในรูปอะคูสติก นิวเคลียสยาก มีความยืดหยุ่นมากขึ้น และไม่สม่ำเสมอเมื่อเทียบมีไซโทพลาซึม อนุภาคสะท้อนขนาดต่าง ๆ แข็งแรงมากติดอยู่บนวางแผนนิวเคลียร์พื้นผิวพื้นผิวของเมมเบรน ไม่มีเมมเบรนนิวเคลียร์เรียบต่อเนื่องผิว มีมีสิ่งกีดขวาง (รูขุมขน) หลังจากอัลตร้าซาวด์แทรกแซงถูกรวมมี microbubbles พื้นที่มืดภาพเซลล์ A7r5 ขึ้นในขนาดต่าง ๆ และองศา แสดงให้เห็นว่าพื้นที่สีเข้มลึกหรือระดับต่ำสุดของขอบเขตล่าง แนะนำทรายภูมิภาค อย่างไรก็ตาม ตั้งและขอบเขตของพื้นที่มืดภาพระดับได้ไม่เหมือนกับที่พบในภาพ topographic ดังนั้น ก็มีแนวโน้มที่มืดพื้นที่ ทั้งจากภาพ topographic และอะคูสติก หลุม เสียงได้ นอกจากนี้ บางแอลฟาเซลล์เป็นรอบในองศาที่แตกต่างจากวิธีการฉายรังสี บทสรุป: แรงอะตอมmicroscopy และวิธีการในการกระตุ้นอะคูสติกสามารถ noninvasively และสมบูรณ์แสดงเซลล์โครงสร้าง การเชื่อมต่อ และการยืดหยุ่นคุณสมบัติที่ระดับนาโนในนาทีละ ความมืดพื้นที่ ทั้งจากภาพ topographic และอะคูสติก อาจเป็นหลุม เสียง ดังนั้น มันจะค่อยพบหลุมเสียงเหล่านี้ ผลการวิจัยเหล่านี้มีความสัมพันธ์ระหว่างเซลล์apoptosis หลังจากอัลตร้าซาวด์และ microbubble ซาวด์วิธีการฉายรังสี และผลกระทบเสียงหลุมถ้า: 0.926326 บ่อจาง et al. เอเซียแปซิฟิกสมุดของเวชศาสตร์เขตร้อน (2015) 325-329วิธีที่ 4 ใช้สำหรับลด restenosis แต่ไม่มีผลกระทบเหมาะ [3] ในบรรดาวิธีการ anticoagulants ไม่ประสบความสำเร็จสูงความเข้มข้นยาเฉพาะที่ stent ล้อมรอบ สามารถแผ่รังสีได้อย่างง่ายดายทำให้เปราะ hemal เพิ่มอัตราของโรคมะเร็ง ในปัจจุบันยีนบำบัดยังคงไม่ถูกวิธีปลอดภัย มีประสิทธิภาพ และมีเสถียรภาพการเปิดยีนประสงค์แสดงในอวัยวะเป้าหมาย ตนประสิทธิภาพของยา eluting stents ไม่ยังตัดสินได้อย่างไรก็ตาม ความเสี่ยงของ inducing เลือดได้แล้วการพิสูจน์ [4]ดังนั้น การด่วนคลินิกจำเป็นสำหรับการกำหนดวิธีการที่มีประสิทธิภาพระยะยาว และสามารถสะดวก ปลอดภัย และมีประสิทธิภาพยับยั้งการเจริญเกิน intimal และวิธีป้องกันสำหรับ restenosis ของหลอดเลือด ในปีที่ผ่านมา จะพบว่าวิธีการฉายรังสีอัลตราโซนิกสามารถยับยั้งการงอก และการส่งเสริมเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือดapoptosis [5] วิธีนี้สามารถใช้สำหรับการรักษาหลอดเลือด restenosisซึ่งสัญญาผลบวกในทางปฏิบัติทางคลินิก อย่างไรก็ตาม การประสิทธิภาพของ inhibiting การงอกของเซลล์จะค่อนข้างต่ำ การศึกษาของอัล et จางเปิดเผย apoptosis ของเซลล์นั้นเป็นเพียงประมาณ 3% [6] หลังจากวิธีการฉายรังสีอัลตราโซนิก ดังนั้น การศึกษาวิจัยผลของวิธีการฉายรังสีอัลตราโซนิกและ microbubblesและจะเปิดออกว่า วิธีร่วมทำดีใช้วิธีการฉายรังสีอัลตราโซนิกเพียงอย่างเดียว ซึ่งไม่สามารถนำของเซลล์ 20%apoptosis หลัง s อัลตราโซนิกวิธีการฉายรังสีใน 24 ชั่วโมง [7] มีอะไรเพิ่มเติมมีความถี่เดียวกันวิธีการฉายรังสี และความรุนแรง ชนิดต่าง ๆmicrobubbles สามารถมีผลกระทบโดยตรงในการแทรกแซงอัลตราโซนิกซึ่งอาจจะสัมพันธ์กับจำนวน microbubbles การขยายขนาดเป็นบางความถี่และรังสีความเข้ม และjets และคลื่นกระแทกที่เกิดขึ้นเมื่อฟองระเบิด แรงอะตอมได้รับการพัฒนาระดับ microscopy (AFAM) สังเกตสัณฐานวิทยาและข้อมูลภายในของเซลล์ สามารถผลิต AFAMภาพความละเอียดสูง โดยอะตอมบังคับ microscopy (AFM) และมีวิธีการถ่ายภาพแบบไม่ทำลาย โดย microscopy อะคูสติกคุณลักษณะเหล่านี้สามารถช่วยสังเกต micrographs แรงอะตอม และmicroscopy ใน situ อะคูสติกพร้อมกัน AFAM สามารถขอรับการข้อมูลภายในของเซลล์ผ่านคลื่นอะคูสติกที่เป็น nanometerlevelความละเอียด เมื่อภาพ ultrafine และสัมประสิทธิ์ความยืดหยุ่นเดียวกันภายใน และผิวพื้นที่มีมา ภาพ 3 มิติของตัวอย่างง่าย ๆ ได้ ข้อมูลความยืดหยุ่นของเซลล์นอกจากนี้ยังสามารถสังเกต โดย AFAM ซึ่งได้กลายเป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสำหรับสังเกตสัณฐานวิทยาของเซลล์ การวิจัยมีวัตถุประสงค์เพื่อสังเกตการเปลี่ยนแปลงของเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือด (A7r5 เซลล์)หลังจากอัลตร้าซาวด์ และ microbubble ซาวด์วิธีการฉายรังสี โดย AFAMเราหวังว่าการอธิบายลักษณะพิเศษของ microbubbles บนหลอดเลือดเดี่ยวเซลล์กล้ามเนื้อเรียบและ การสำรวจกลไกของหลอดเลือดapoptosis ของเซลล์กล้ามเนื้อเรียบ ให้ทดลองพื้นฐาน และอ้างอิงจะเป็นประโยชน์ในการสำรวจความถี่ที่เหมาะสมที่สุดวิ microbubble ศึกษาเพิ่มเติม2. วัสดุและวิธีการ2.1 การเตรียมตัวอย่างวิธีและเซลล์เซลล์ เซลล์กล้ามเนื้อเรียบที่เอออร์ตาหนู A7r5 ซื้อจากเซลล์ธนาคารของสถาบันวิทยาศาสตร์จีน เซลล์มีอ่างมีกลูโคสสูง DMEM สื่อ ประกอบด้วย 10% ครรภ์วัวยาเพนนิซิลลินเซรั่มและ 1% และ streptomycin ในกล่อง cultivating ด้วย5% CO2 ที่ 37 曟 แก้ว borosilicate ถูกใช้เป็นยึดเกาะของเซลล์พื้นผิว ต้องการ polylysine ที่ยึดติดบนกระจก coverslips การcoverslips ไป และนำไปแช่ในเอทานอล 15 นาที และ毺g 100 mL ของ polylysine ผสมกับโซลูชัน PBS เป็น 0.25 mLdribbled บน coverslips หลังจากเตรียม coverslips เก็บไว้ที่ 4曟ค้างคืน ในวันถัดไป polylysine ส่วนเกินถูกดูดซึมและ coverslips ได้ล้างน้ำใส่ สอง [5] แล้วcoverslips ที่ air-dried และ irradiated ในรังสีอัลตราไวโอเลต 15นาที [5] Coverslips ถูกวางในวัฒนธรรมดี 6 แผ่น วางใน 1伊106/mL เซลล์ 1 mL แล้วเซลล์มีอ่างตามด้านบนเงื่อนไข ถูกเอาออกเมื่อ 70-80% ของ coverslipถูกปกคลุม ด้วยเซลล์2.2 การทดลองอุปกรณ์ เครื่องมือที่ใช้ในการทดลองรวม: คาร์บอนไดออกไซด์บ่มเพาะวิสาหกิจ (BPH-9042 เซี่ยงไฮ้ Yiheng ทางวิทยาศาสตร์เครื่องมือ จำกัดจำกัด); HiRox7700 กล้องจุลทรรศน์แสง (การสังเกตเซลล์ใน 6 ดีวัฒนธรรมจาน); พิกัดที่เชื่อมต่อกับการอัลตราโซนิค ultrasonicเครื่องกำเนิดไฟฟ้า (รุ่น: dm-40 ห้องปฏิบัติการระดับของเซี่ยงไฮ้สถาบันวิทยาศาสตร์ จีน), พลังงานถูกตรวจสอบโดยการวิเคราะห์ไฟฟ้าดิจิตอล (รุ่น: ppa2500 N4L); hydrophone เข็ม(รุ่น: SPRH -S-1000 ซี) เชื่อมต่อกับจอแสดงผลดิจิตอล(แบบจำลอง: TDS 1024B เทค); แรงอะตอมถูก microscopy อะคูสติกใช้สำหรับการตรวจอัลตร้าซาวด์ (AFAM, SPM โดย Veeco DI ซานตาบาร์บาร่า CA, USA ผลิต) สอง AFAM โหมด โหมดการติดต่อและใช้โหมดการสั่นสะเทือน2.3 การวิเคราะห์วิธี เซลล์ถูกแบ่งออกเป็น 2 กลุ่ม: (ถือว่าไม่มีกลุ่มควบคุมวิธีการฉายรังสีอัลตราโซนิก microbubbles ไม่) และสหรัฐอเมริกา + MB [45 kHz0.4 W/cm2 โดยทำลาย microbubble mediated ซาวด์สำหรับ 20วินาที ด้วยความเข้มข้น microbubble: 伊105 (56-140) microbubblesต่อ milliliter] Coverslips ที่ถูกครอบคลุม ด้วยเซลล์ได้อยู่ใน c

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การศึกษาด้วยกล้องจุลทรรศน์ของอัลตราซาวด์พึ่งทำลาย microbubble
ผลกระทบต่อเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือดบ่อ Zhang1 *, Yi-ร่อง Hou1 เทียน Chen1, Bing Hu2 1 กรมอัลตราซาวด์แพทยศาสตร์โรงพยาบาลตะวันออกโรงเรียนแพทย์ Tongji University, เซี่ยงไฮ้ 200120, จีน2 กรม อัลตราซาวด์ของโรงพยาบาลคนที่ 6 ของเครือไปเซี่ยงไฮ้ Jiaotong University, เซี่ยงไฮ้, ประเทศจีนรายการเนื้อหาที่มีอยู่ใน ScienceDirect เอเชียแปซิฟิกวารสารเวชศาสตร์เขตร้อนวารสารหน้าแรก: www.elsevier.com/locate/apjtm บทความข้อมูลบทคัดย่อประวัติศาสตร์บทความ: Received15 มกราคม 2015 ที่ได้รับในการแก้ไข รูปแบบที่ 20 กุมภาพันธ์ 2015 ได้รับการยอมรับ 15 มีนาคม 2015 มีจำหน่ายออนไลน์ 20 เมษายน 2015 คำสำคัญ: แรงอะตอมกล้องจุลทรรศน์อะคูสติกหลอดเลือดเซลล์กล้ามเนื้อเรียบอัลตราซาวด์microbubble * ผู้รับผิดชอบ: บ่อจาง, MD, แพทย์หัวหน้าภาควิชาตร้าซาวด์แพทยศาสตร์โรงพยาบาลตะวันออกโรงเรียนแพทย์Tongji มหาวิทยาลัยเซี่ยงไฮ้200120, จีน. โทรศัพท์: 86-15800620806 E-mail: [e-mail] โครงการมูลนิธิได้รับการสนับสนุนจากเซี่ยงไฮ้ผู่ตงใหม่พื้นที่แผนสุขภาพคณะกรรมการวิชาการของโครงการผู้นำ (NO PWRd2013-02) แห่งชาติธรรมชาติกองทุน(NO. 81401428). 1 ความรู้เบื้องต้นเกี่ยวกับโรคหัวใจและหลอดเลือดในสมองตีบเกิดจากการตีบหลอดเลือดหัวใจและหลอดเลือดได้กลายเป็นหนึ่ง. โรคที่คุกคามชีวิตหลักในสุขภาพของมนุษย์และความปลอดภัย [1,2] ในปัจจุบันการรักษาหลอดเลือดตีบแบ่งออกเป็นสามประเภท: การรักษายาเสพติด การผ่าตัดการรักษาด้วยการใช้มาตรการแทรกแซง. ในบรรดาวิธีการเหล่านี้การรักษาด้วยการใช้มาตรการแทรกแซงคือการรักษาใหม่ที่มีผลการบาดเจ็บน้อยที่สุดและมีประสิทธิภาพดี ลวดangioplasty transluminal (PTA) เป็นวิธีการที่พบบ่อยสำหรับการบรรเทาตีบและการปรับปรุงปริมาณเลือดหัวใจและสมอง; แต่วิธีการที่มีอัตราการกำเริบของ 30% -50% [3] การวิจัยพบว่าการแพร่กระจายมากเกินไปและการย้ายถิ่นของเซลล์กล้ามเนื้อเรียบเป็นสาเหตุหลักที่นำไปสู่การrestenosis [4] ได้อย่างมีประสิทธิภาพการป้องกัน restenosis หลอดเลือดหลังจากการดำเนินการผลิต PTA ได้รับปัญหาใหญ่ที่ต้องได้รับการแก้ไขในระหว่างหัวใจและหลอดเลือดและโรคหลอดเลือดสมองการรักษาPTA จนถึงขณะนี้มีส่วนใหญ่จะเป็นวัตถุประสงค์: เพื่อสังเกตเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือดเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาที่เกิดจาก. อัลตราซาวนด์รวมกับ microbubbles โดยแรงอะตอมอะคูสติกกล้องจุลทรรศน์ (AFAM) วิธีการ: A7r5 หนูหลอดเลือดเซลล์กล้ามเนื้อเรียบถูกแบ่งออกเป็นกลุ่มกลุ่มควบคุม (โดยการฉายรังสีอัลตราโซนิกไม่มีฟองอากาศขนาดเล็ก) และกลุ่มของสหรัฐ + MB (45 เฮิร์ทซ์ 0.4 W / cm2 อัลตราซาวนด์ฉายรังสีเป็นเวลา 20 วินาทีที่มีความเข้มข้นของ SonoVue ™ [(56-140)暳105 มิลลิลิตร /]. เซลล์สัณฐานเปลี่ยนแปลง(เช่นภูมิประเทศและอะคูสติก การพยากรณ์โรค) ได้รับการตรวจพบก่อนและหลังจากการทำลายอัลตราซาวนด์โดยAFAM ผลการศึกษา:. ในการเปลี่ยนรูปร่างของเซลล์เซลล์กล้ามเนื้อเรียบถูก. แพร่กระจาย o และเชื่อมต่อกับแต่ละอื่นโดยเส้นใยที่ศูนย์ของเซลล์บริเวณนิวเคลียร์มีพื้นผิวที่หยาบและอย่างมีนัยสำคัญสูงจากสภาพแวดล้อม. โครงสร้าง cytoskeletal ของนิวเคลียสตาข่ายและพลาสซึมในลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์ A7r5 นี้ (20毺ม. × 20毺ม.) เป็นที่ชัดเจนก่อนที่จะแทรกแซงmicrobubble. หลังจากที่น่าตื่นเต้นอะคูสติกรายละเอียดโครงสร้างของเซลล์ของภาพอะคูสติกได้รับการปรับปรุงด้วยความละเอียดที่ดีกว่าการแสดงความยืดหยุ่นของที่แตกต่างกันเนื้อเยื่อ ในภาพอะคูสติกที่นิวเคลียสเป็นสิ่งที่ยากและมีความยืดหยุ่นมากขึ้นและไม่สม่ำเสมอเมื่อเทียบกับพลาสซึม หลายคนสะท้อนอนุภาคขนาดต่างๆที่แข็งแกร่งติดอยู่บนนิวเคลียร์ขรุขระพื้นผิวของเมมเบรน เมมเบรนนิวเคลียร์ไม่ได้มีอย่างต่อเนื่องเรียบผิว มีสิ่งกีดขวางจำนวนมาก (รูขุมขน) หลังจากแทรกแซงอัลตราซาวนด์ได้ร่วมกับ microbubbles พื้นที่มืดของภาพ A7r5 มือถือเพิ่มขึ้นในขนาดต่างๆและองศา พื้นที่ที่มืดแสดงให้เห็นความลึกหรือความสูงต่ำของบริเวณชั้นล่างบอกหดหู่ในระดับภูมิภาค แต่สถานที่และขอบเขตของบริเวณที่มืดภาพอะคูสติกก็ไม่ได้คล้ายกับที่พบในภาพภูมิประเทศ ดังนั้นจึงเป็นโอกาสที่มืดพื้นที่ทั้งจากภาพภูมิประเทศและอะคูสติกเป็นเสียงหลุม นอกจากนี้บางส่วนนิวเคลียสเซลล์กลายเป็นในรอบองศาที่แตกต่างหลังจากการฉายรังสี สรุป: แรงอะตอมกล้องจุลทรรศน์และวิธีการกระตุ้นnoninvasively อะคูสติกและสมบูรณ์สามารถแสดงเซลล์โครงสร้างและคุณสมบัติการเชื่อมต่อที่ยืดหยุ่นในระดับนาโนในหลายเพียงไม่กี่นาที ที่มืดพื้นที่ทั้งจากภาพภูมิประเทศและอะคูสติกอาจจะเป็นเสียงหลุม; จึงจะเป็นประโยชน์ถ้าเสียงเหล่านี้หลุมที่พบ การค้นพบเหล่านี้ให้ความสัมพันธ์ระหว่างเซลล์apoptosis หลังจากอัลตราซาวด์และการฉายรังสีอัลตราซาวนด์ microbubble และผลเสียงหลุม. ถ้า: 0.926. 326 บ่อ Zhang et al, / เอเชียแปซิฟิกวารสารเวชศาสตร์เขตร้อน (2015) 325-329 สี่วิธีการที่ใช้ในการลด restenosis ; แต่ผลกระทบจะไม่เหมาะ [3] ในวิธีการเหล่านั้น anticoagulants ไม่ประสบความสำเร็จสูงความเข้มข้นของยาเสพติดในท้องถิ่นโดยรอบขดลวด การฉายรังสีสามารถทำให้เกิดความเปราะ Hemal, เพิ่มอัตราการเกิดโรคมะเร็ง ในปัจจุบันการรักษาด้วยยีนยังไม่ปลอดภัยวิธีที่มีประสิทธิภาพและมีเสถียรภาพสำหรับการเปิดใช้งานยีนวัตถุประสงค์ในการแสดงในอวัยวะเป้าหมาย ระยะยาวประสิทธิภาพของขดลวดเคลือบยายังไม่ได้รับการพิจารณา; แต่ความเสี่ยงของการกระตุ้นให้เกิดการอุดตันได้รับการพิสูจน์แล้ว [4]. ดังนั้นจึงมีความจำเป็นทางคลินิกอย่างเร่งด่วนในการสร้างวิธีการที่มีประสิทธิภาพในระยะยาวและสามารถสิ่งอำนวยความสะดวกได้อย่างปลอดภัยและมีประสิทธิภาพยับยั้งการ hyperplasia intimal; เช่นเดียวกับวิธีการป้องกันสำหรับ restenosis หลอดเลือด. ในปีที่ผ่านมามันได้รับพบว่าการฉายรังสีอัลตราโซนิกสามารถยับยั้งการงอกและส่งเสริมเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือดapoptosis [5] วิธีการนี้สามารถนำมาใช้สำหรับการรักษา restenosis หลอดเลือดซึ่งสัญญาผลในเชิงบวกในการปฏิบัติทางคลินิก อย่างไรก็ตามประสิทธิภาพในการยับยั้งการแพร่กระจายของเซลล์ 'ค่อนข้างต่ำ การศึกษาZhang et al, แสดงให้เห็นว่าการตายของเซลล์เป็นเพียงประมาณ 3% [6] หลังจากการฉายรังสีอัลตราโซนิก ดังนั้นนักวิจัยกำลังศึกษาผลกระทบจากการรวมกันของการฉายรังสีอัลตราโซนิกและ microbubbles ได้. และมันกลับกลายเป็นว่าวิธีการรวมกันทำได้ดีกว่าการใช้การฉายรังสีอัลตราโซนิกหมดจดซึ่งอาจนำไปสู่ ​​20% เซลล์ apoptosis หลังของการฉายรังสีอัลตราโซนิกเป็นเวลา 24 ชั่วโมง [7] . มีอะไรมากกว่าที่มีความถี่การฉายรังสีเดียวกันและความรุนแรงแตกต่างกันของmicrobubbles อาจมีผลกระทบโดยตรงต่อการแทรกแซงล้ำซึ่งอาจจะเกี่ยวข้องกับจำนวนmicrobubbles ที่ขนาดการขยายตัวที่ความถี่บางอย่างและความเข้มของรังสีและเจ็ตส์และช็อกคลื่นที่เกิดขึ้นเมื่อระเบิดฟอง แรงอะตอมกล้องจุลทรรศน์อะคูสติก (AFAM) ได้รับการพัฒนาขึ้นเพื่อสังเกตลักษณะทางสัณฐานวิทยาและข้อมูลภายในของเซลล์ AFAM สามารถผลิตภาพความละเอียดสูงโดยใช้กล้องจุลทรรศน์แรงอะตอม(AFM) และให้วิธีการถ่ายภาพแบบไม่ทำลายโดยใช้กล้องจุลทรรศน์อะคูสติก. คุณสมบัติเหล่านี้สามารถช่วยให้สังเกตไมโครแรงอะตอมและกล้องจุลทรรศน์อะคูสติกในแหล่งกำเนิดพร้อมกัน AFAM สามารถได้รับข้อมูลภายในของเซลล์ผ่านคลื่นอะคูสติกที่nanometerlevel ละเอียด เมื่อภาพขนาดเล็กมากและค่าสัมประสิทธิ์ความยืดหยุ่นของภายในและพื้นที่ผิวเดียวกันจะได้มาเป็นภาพ 3 มิติของกลุ่มตัวอย่างที่สามารถรับได้อย่างง่ายดาย ข้อมูลความยืดหยุ่นของเซลล์ยังสามารถสังเกตได้โดย AFAM ซึ่งได้กลายเป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสำหรับการสังเกตลักษณะทางสัณฐานวิทยาเซลล์ การวิจัยนี้มีจุดมุ่งหมายที่จะสังเกตเห็นการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาของเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือด (เซลล์ A7r5) หลังจากอัลตราซาวนด์และ microbubble ฉายรังสีอัลตราซาวนด์โดย AFAM. เราหวังว่าจะอธิบายผลกระทบของ microbubbles ในหลอดเลือดเดียวเซลล์กล้ามเนื้อเรียบและการสำรวจกลไกของหลอดเลือดกล้ามเนื้อเรียบการตายของเซลล์ ให้รากฐานการทดลองและการอ้างอิงจะเป็นประโยชน์ในการสำรวจความถี่ที่เหมาะสมที่สุดและปริมาณmicrobubble สำหรับการศึกษาต่อไป. 2 วัสดุและวิธีการ2.1 วิธีการเตรียมเซลล์และเซลล์ตัวอย่างA7r5 หนูหลอดเลือดเซลล์กล้ามเนื้อเรียบที่ซื้อมาจากเซลล์ธนาคารของจีนAcademy of Sciences เซลล์เพาะเลี้ยงที่มีระดับน้ำตาลสูงปานกลาง DMEM ที่มีวัวของทารกในครรภ์ 10% ซีรั่มและยาปฏิชีวนะ 1% และ streptomycin ในกล่องเพาะปลูกที่มีCO2 5% ที่ 37曟 แก้ว borosilicate ที่ถูกนำมาใช้เป็นเซลล์ยึดเกาะพื้นผิว เพื่อให้เป็นไปตาม polylysine ใน coverslips แก้วที่coverslips ถูกแช่และแช่ในเอทานอลเป็นเวลา 15 นาทีและ100毺กรัม / มิลลิลิตร polylysine เจือจางด้วยวิธีการแก้ปัญหาพีบีเอส 0.25 มิลลิลิตรไหลในcoverslips นั้น หลังจากที่เตรียม coverslips เก็บไว้ที่ 4 曟ในชั่วข้ามคืน ในวันถัดไปส่วนเกิน polylysine ถูกดูดกลืนและcoverslips ถูกล้างด้วยน้ำหมันสอง [5] จากนั้นcoverslips มีอากาศแห้งและการฉายรังสีในแสงอัลตราไวโอเลตเป็นเวลา 15 นาที [5]. coverslips ถูกวางไว้ในจานวัฒนธรรม 6 อย่างดีวางอยู่ใน 1 伊106 มิลลิลิตร / เซลล์ 1 มิลลิลิตรแล้วเซลล์เพาะเลี้ยงตามเงื่อนไขข้างต้น มันถูกเอาออกเมื่อ 70% -80% ของ coverslip ถูกปกคลุมด้วยเซลล์. 2.2 อุปกรณ์การทดลองเครื่องมือที่ใช้สำหรับการทดสอบรวม: คาร์บอนไดออกไซด์ศูนย์บ่มเพาะ(BPH-9042, เซี่ยงไฮ้ Yiheng วิทยาศาสตร์ Instrument Co. Ltd. ); กล้องจุลทรรศน์ HiRox7700 ออปติคอล (สำหรับการสังเกตเซลล์ใน 6 ดีแผ่นวัฒนธรรม); transducer ล้ำเสียงเชื่อมต่อกับอัลตราโซนิกเครื่องกำเนิดไฟฟ้า(รุ่น DM-40 อะคูสติกของห้องปฏิบัติการเซี่ยงไฮ้Academy of Sciences, จีน) กำลังขับได้รับการตรวจสอบโดยการวิเคราะห์ไฟฟ้าดิจิตอล(รูปแบบ: ppa2500; N4L); เข็ม hydrophone (รูปแบบ: SPRH -S -1000; SEA) เชื่อมต่อกับจอแสดงผลดิจิตอล(รุ่น TDS 1024B เทค); กล้องจุลทรรศน์แรงอะตอมอะคูสติกที่ถูกนำมาใช้สำหรับการตรวจสอบการอัลตราซาวนด์ (AFAM, SPM โดยวีโก้ดิซานตาบาร์บาร่า, CA, ผลิต USA) สองโหมด AFAM โหมดการติดต่อและโหมดการสั่นสะเทือนถูกนำมาใช้. 2.3 วิธีการวิเคราะห์เซลล์ที่ถูกแบ่งออกเป็น 2 กลุ่มกลุ่มควบคุม (ได้รับการรักษาโดยไม่ต้องฉายรังสีอัลตราโซนิกไม่microbubbles) และสหรัฐอเมริกา + กลุ่ม MB [45 เฮิร์ทซ์0.4 W / cm2 โดยอัลตราซาวนด์พึ่งทำลาย microbubble 20 วินาทีที่มีความเข้มข้น microbubble (56- 140) 105伊microbubbles ต่อมิลลิลิตร] coverslips ที่ถูกปกคลุมไปด้วยเซลล์ถูกวางลงในค

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การศึกษาด้วยกล้องจุลทรรศน์ของอัลตราซาวด์เพื่อ microbubble ทำลายผลในเซลล์กล้ามเนื้อเรียบหลอดเลือด
โบ zhang1 *
, ยี่รงค์ hou1
, เทียน chen1
Bing hu2
1
ภาควิชาอายุรศาสตร์ อัลตร้าซาวน์ โรงพยาบาลตะวันออก โรงเรียนแพทย์ Tongji University , Shanghai 200120 จีน
2
ภาควิชาการ 6 คน รพ. บริษัท ในเครือที่ Shanghai Jiaotong University , Shanghai , ประเทศจีน
เนื้อหารายการของบริการ
เอเชียแปซิฟิกวารสารวารสารเวชศาสตร์เขตร้อน
หน้าแรก : www.elsevier . com / ค้นหา / apjtm

บทความข้อมูลบทคัดย่อบทความประวัติศาสตร์ :
received15 มกราคม 2015
รับแก้ไขแบบฟอร์ม 20 กุมภาพันธ์ 2015

รับ 15 มีนาคม 2015 ออนไลน์ 20 เมษายน 2015
คำสำคัญ :

ของกล้องจุลทรรศน์แรงอะตอมอะคูสติก กล้ามเนื้อเรียบเซลล์


microbubble อัลตร้าซาวน์* ผู้ที่สอดคล้องกัน : โบเตีย , แพทยศาสตรบัณฑิต หัวหน้าแพทย์แผนก
การแพทย์อัลตราซาวด์ที่โรงพยาบาลทางตะวันออก โรงเรียนแพทย์ Tongji University , Shanghai
200120 , จีน 86-15800620806

โทร : e-mail : มูลนิธิโครงการ [e-mail]
: โดยการสนับสนุนของเซี่ยงไฮ้ผู่ตงใหม่วางแผน
สุขภาพพื้นที่คณะกรรมการผู้นำโครงการวิชาการ ( ไม่ pwrd2013-02 ) , กองทุน
ธรรมชาติแห่งชาติ ( ฉบับที่ 81401428 )
1บทนำ
โรคหัวใจและโรคหลอดเลือดสมองตีบ เกิดจากหลอดเลือดสมองตีบ และโรคหัวใจและหลอดเลือด

หลักได้กลายเป็นหนึ่งในโรคที่คุกคามชีวิตในสุขภาพของมนุษย์และความปลอดภัย [ 1 , 2 ] .
ปัจจุบัน การตีบของหลอดเลือดแบ่งออกเป็นสามประเภท :
การรักษา การผ่าตัด การรักษา การรักษา ผ่าตัด ยา .
ของวิธีการเหล่านี้การรักษาบำบัดคือการรักษาใหม่ที่ได้ผล
บาดเจ็บน้อยที่สุด และแสดงได้ดี การขยายหลอดเลือดแดง
( PTA ) เป็นวิธีการทั่วไปสำหรับ relieving
หัวใจและสมองตีบ และเพิ่มเลือด แต่วิธีนี้
มีอัตราการเกิดขึ้นอีก 30 % - 50 % [ 3 ] วิจัยพบว่า การขยายตัวมากเกินไปและการย้ายถิ่นของ

เซลล์กล้ามเนื้อเรียบมีสาเหตุหลักซึ่งนำไปสู่ restenosis [ 4 ] ได้อย่างมีประสิทธิภาพป้องกันไม่ให้หลอดเลือด
restenosis หลังผ่าตัด PTA ได้
ปัญหาใหญ่ที่ต้องแก้ไขระหว่างระบบหัวใจและหลอดเลือดและ
โรคหลอดเลือดสมอง PTA บําบัด ก็ส่วนใหญ่
วัตถุประสงค์ : เพื่อสังเกตการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาและเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือดโดย
อัลตร้าซาวด์ร่วมกับกล้องจุลทรรศน์แรงอะตอม microbubbles โดยอะคูสติก (
afam )วิธีการ : a7r5 หนูหลอดเลือดกล้ามเนื้อเรียบเซลล์แบ่งออกเป็นกลุ่ม คือ กลุ่มควบคุม ( ไม่มี
ultrasonic การฉายรังสีไม่มี micro ฟอง ) และเราบางครั้งกลุ่ม ( 45 kHz , 0.4 w / cm2

ปล่อยรังสีอัลตร้าซาวน์ สำหรับ 20 วินาทีกับ sonovue ™ความเข้มข้น [ ( 56-140 ) 暳 105
/ ml ] เซลล์ micromorphological
การเปลี่ยนแปลง ( เช่น ภูมิประเทศ และไม่มีอาการ ) ถูกตรวจพบก่อนและ
หลังจากอัลตราซาวด์ทำลายโดย afam . ผล : รูปร่างของเซลล์ เซลล์กล้ามเนื้อเรียบถูก
กระจาย O และเชื่อมต่อกับแต่ละอื่น ๆโดยเส้นใย ที่ศูนย์ของเซลล์พื้นที่นิวเคลียร์มีพื้นผิวขรุขระ และยังพบการยกระดับจากสภาพแวดล้อม โครงสร้างของเรติคิวลาร์นิวเคลียส และไซโตร กเลตัล
บทสวดมนต์ในลักษณะของ a7r5 เซลล์ ( 20 毺 m × 20 毺 M )
ล้างก่อนการแทรกแซง microbubble . หลังจากเสียงน่าตื่นเต้น รายละเอียดโครงสร้างเซลล์ของ
ภาพเสียงที่มีความละเอียดที่ดีขึ้นแสดงให้เห็นความยืดหยุ่นของเนื้อเยื่อที่แตกต่างกัน

ในรูปอะคูสติก , นิวเคลียสให้มากขึ้นมีความยืดหยุ่นและเรียบเทียบ
กับ cytoplasm หลายขนาดต่าง ๆสะท้อนแรงพบอนุภาคที่ติดบน
นิวเคลียร์ หยาบพื้นผิวพื้นผิวเมมเบรนของ เมมเบรนนิวเคลียร์ไม่ได้มีอย่างต่อเนื่องผิวเรียบ
; มีหลายอุปสรรค ( รู ) หลังจากอัลตราซาวด์คือการแทรกแซงรวม
กับ microbubbles , ด้านมืดของภาพเซลล์ a7r5 เพิ่มขึ้นในขนาดต่างๆและ
องศา พื้นที่ที่มืดมีความลึกหรือระดับความสูงต่ำของภูมิภาคล่าง แนะนำ
ทะเลในภูมิภาค อย่างไรก็ตามที่ตั้งและขอบเขตของภาพเสียงเข้มพื้นที่
ไม่คล้ายกับที่พบในสภาพภูมิประเทศ . ดังนั้น จึงเป็นโอกาสที่พื้นที่มืด
ทั้งจากภาพภูมิประเทศ และเสียงอะคูสติก , หลุม นอกจากนี้ บาง
นิวเคลียสเซลล์เป็นรอบในองศาที่แตกต่างกัน หลังการฉายรังสี สรุป : Atomic Force
กล้องจุลทรรศน์และวิธีการกระตุ้นอะคูสติกสามารถ noninvasively อย่างสมบูรณ์และแสดงโครงสร้างของ
เซลล์ , การเชื่อมต่อและคุณสมบัติยืดหยุ่นนาโนสเกลในเพียงไม่กี่นาที พื้นที่มืด
ทั้งจากภาพภูมิประเทศและอะคูสติก อาจจะเสียงหลุม ดังนั้น จึงจะเป็นประโยชน์ถ้ารูเสียง
เหล่านี้พบว่า การค้นพบนี้ให้ความสัมพันธ์ระหว่างเซลล์
( หลังจากอัลตร้าซาวน์ และ microbubble การฉายรังสีอัลตราซาวนด์ และช่องเสียง Effect .

แต่ถ้า : 0.926 โบ Zhang et al . / วารสารเอเชียแปซิฟิกของเวชศาสตร์เขตร้อน ( 2015 ) 325-329
4 วิธีที่ใช้ในการลด restenosis แต่ผลไม่ได้
เหมาะ [ 3 ] ระหว่างวิธีการเหล่านั้น นฤบาล ไม่ได้ให้ยาความเข้มข้นสูง
ท้องถิ่นรอบขดลวด . การฉายรังสีสามารถ
เพราะ hemal อายุเก็บเกี่ยว อัตราการเพิ่มขึ้นของโรคมะเร็ง ปัจจุบัน
ยีนบำบัดยังไม่ปลอดภัย มีประสิทธิภาพ และมีเสถียรภาพวิธีการ
ให้แสดงในเป้าหมายวัตถุประสงค์ของอวัยวะ ประสิทธิภาพระยะยาว
ของยา - eluting ขดลวดยังมุ่งมั่น ;
แต่ความเสี่ยงของการกระตุ้นให้มีการพิสูจน์ว่า [ 4 ] .
ดังนั้นมีความต้องการเร่งด่วนสำหรับการจัดตั้งคลินิกวิธี
ที่มีประสิทธิภาพในระยะยาวและสามารถเดินทางได้อย่างปลอดภัย และมีประสิทธิภาพยับยั้ง intimal hyperplasia

; รวมทั้งวิธีการป้องกันหลอดเลือด restenosis .
ในปีที่ผ่านมา พบว่า สามารถยับยั้งการงอกของรังสีอัลตราโซนิก
และส่งเสริมเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือด ( [
5 ]