Whole genomic DNA, used as a templa

Whole genomic DNA, used as a template
for PCR, was extracted from the livers of all
individuals, following a standard phenolchloroform-
isoamylalcohol protocol (Sambrook
and Russell, 2001), with slight modification.
Briefly, after homogenization, the tissue was
digested at 37°C overnight using 25 μg/μL
proteinase K in 0.5% (w/v) SDS in STE buffer
(0.1 M NaCl, 50 mM Tris and 1 mM EDTA, pH
8.0). Then, the mixture was extracted with phenolchloroform-
isoamylalcohol (25:24:1) and the
DNA was precipitated with 0.05 volume of 0.2 M
NaCl and 2.5 volume of 100% ethanol. After
washing in 70% ethanol, the genomic DNA was
air-dried and resuspended in TE buffer.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทั้งหมด genomic DNA ใช้เป็นแม่แบบสำหรับ PCR ถูกสกัดจาก livers ทั้งหมดบุคคล การต่อแบบมาตรฐาน phenolchloroform-โพรโทคอล isoamylalcohol (Sambrookและ รัสเซล 2001), มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยสั้น ๆ หลัง homogenization เนื้อเยื่อได้เจ่าที่ 37° C ค้างคืนใช้ 25 μg μLproteinase K 0.5% (w/v) SDS ในบัฟเฟอร์ท(0.1 M NaCl, EDTA ทริสเรทติ้งและ 1 มม. 50 มม. pH8.0) แล้ว ส่วนผสมถูกสกัด ด้วย phenolchloroform -isoamylalcohol (25:24:1) และดีเอ็นเอถูกตกตะกอน ด้วย 0.05 ปริมาณ 0.2 เมตรNaCl และ 2.5 ปริมาตรของเอทานอล 100% หลังจากซักผ้าในเอทานอล 70% ดีเอ็นเอ genomic ถูกบัฟเฟอร์ TE air-dried และ resuspended ในการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทั้งดีเอ็นเอที่ใช้เป็นแม่แบบสำหรับ PCR ถูกสกัดจากตับของทุกบุคคลดังต่อไปนี้phenolchloroform- มาตรฐานisoamylalcohol โปรโตคอล (Sambrook และรัสเซล, 2001) มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย. สั้น ๆ หลังจากที่เป็นเนื้อเดียวกันเนื้อเยื่อที่ถูกย่อยที่37 องศาเซลเซียสในชั่วข้ามคืนโดยใช้ 25 ไมโครกรัม / ไมโครลิตรโปรK 0.5% (w / v) SDS ในบัฟเฟอร์ STE (0.1 M NaCl 50 มิลลิทริสและ 1 มิลลิ EDTA, pH 8.0) จากนั้นผสมถูกสกัดด้วย phenolchloroform- isoamylalcohol (25: 24: 1) และดีเอ็นเอตกตะกอนที่มีปริมาณ0.05 0.2 M NaCl 2.5 และปริมาณของเอทานอล 100% หลังจากที่ล้างในเอทานอล 70% ที่เป็นดีเอ็นเอและอากาศแห้งresuspended ในบัฟเฟอร์ TE

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ทั้งจีโนมดีเอ็นเอ ที่ใช้เป็นแม่แบบ
สำหรับ PCR , สกัดจากตับของ
บุคคล ตามมาตรฐาน phenolchloroform -
isoamylalcohol โพรโทคอล ( sambrook
และ Russell , 2001 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย
สั้นหลังจากการเนื้อเยื่อถูกย่อยที่อุณหภูมิ 37 องศา C
ใช้ 25 กรัม / μค้างคืน μ L
k โปร 0.5% ( w / v ) SDS ใน Ste บัฟเฟอร์
( 0.1 M NaCl , 50 มม. โดย 1 mM EDTA pH
8.0 )จากนั้น ผสมสาร phenolchloroform -

isoamylalcohol ( 25:24:1 ) และดีเอ็นเอตกตะกอนกับ 0.05 ปริมาณ 0.2 M
โซเดียมคลอไรด์ 2.5 ปริมาณเอทานอล 100 % หลังจาก
ล้างเอทานอล 70% , ดีเอ็นเอคือ
แห้ง resuspended ใน TE buffer