Extraction and partial purification

Extraction and partial purification of lipase:
After 24 h of seed germination, the seed coats were
removed manually and 20 g seed cotyledons were
homogenized in chilled acetone at 4°C. The
suspension was centrifuge at 3000 rpm and residue
obtained was dissolved in 100 mL distilled water
followed by centrifugation at 7500 rpm. The
supernatant was used as source of crude enzyme and
was precipitated by ammonium sulphate (80%
saturation) according to Michael et al. (2001). The
precipitate was obtained by centrifugation at 10,000
rpm for 20 min. Precipitate was dissolved in 20 mL
Tris-Cl buffer (10 mM, pH 8.5) and dialyzed
overnight against the same buffer. The dialyzed
enzyme was used as partially purified enzyme and
used for enzyme characterization.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สกัดและทำให้บริสุทธิ์บางส่วนของเอนไซม์ไลเปส:หลังจาก 24 ชมของการงอกของเมล็ดพืช เคลือบเมล็ดได้เอาออกด้วยตนเอง และมี cotyledons เมล็ด 20 กรัมhomogenized เป็นกลุ่มในอะซีโตนเย็นที่ 4 องศาเซลเซียส ที่เครื่องหมุนเหวี่ยงที่ 3000 rpm และสารตกค้างถูกระงับรับที่ละลายในน้ำกลั่น 100 มลตาม centrifugation ที่ 7500 รอบต่อนาที ที่ใช้เป็นแหล่งของเอนไซม์ดิบ supernatant และถูกตกตะกอน ด้วยแอมโมเนียมซัลเฟต (80%ความเข้ม) ตาม Michael et al. (2001) ที่precipitate กล่าว โดย centrifugation ที่ 10000rpm สำหรับ 20 นาที Precipitate ได้ละลายใน 20 mLทริสเรทติ้ง Cl บัฟเฟอร์ (10 mM, pH 8.5) และ dialyzedนอนกับบัฟเฟอร์ที่เดียวกัน ที่ dialyzedมีใช้เอ็นไซม์เป็นเอนไซม์บริสุทธิ์บางส่วน และใช้สำหรับจำแนกเอนไซม์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การสกัดและการทำให้บริสุทธิ์บางส่วนของเอนไซม์ไลเปส:
หลังจาก 24
ชั่วโมงของการงอกของเมล็ดที่เยื่อหุ้มเมล็ดที่ถูกลบออกด้วยตนเองและ20
กรัมเมล็ดใบเลี้ยงถูกปั่นในอะซีโตนแช่เย็นที่อุณหภูมิ4 องศาเซลเซียส
ระงับเป็นเครื่องหมุนเหวี่ยงที่ 3000
รอบต่อนาทีและกากที่ได้รับถูกละลายใน100
มลน้ำกลั่นตามด้วยการหมุนเหวี่ยงที่7500 รอบต่อนาที
ใสใช้เป็นแหล่งที่มาของเอนไซม์และได้รับการตกตะกอนโดยแอมโมเนียมซัลเฟต (80% อิ่มตัว) ไมเคิลอัลเอต (2001) ตะกอนที่ได้รับจากการหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาที ตะกอนถูกละลายใน 20 มลบัฟเฟอร์Tris-Cl (10 มิลลิค่า pH 8.5) และ dialyzed ค้างคืนกับบัฟเฟอร์เดียวกัน dialyzed เอนไซม์ที่ใช้เป็นเอนไซม์บริสุทธิ์บางส่วนและใช้สำหรับลักษณะการทำงานของเอนไซม์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสกัดและการทำให้บริสุทธิ์บางส่วนของเอนไซม์ไลเปส :
หลังจาก 24 ชั่วโมงของความงอกของเมล็ด , เมล็ดพันธุ์ตราถูก
ลบออกด้วยตนเองและ 20 กรัมเมล็ดบดในการแสดงออกถูก
เย็น 4 องศา อะซีโตน
ถูกระงับเครื่อง 3000 รอบต่อนาที และกาก
ได้ถูกละลายในน้ำกลั่น 100 มิลลิลิตร
ตามด้วยปั่นที่ 7500 รอบต่อนาที
ที่นำมาใช้เป็นแหล่งของเอนไซม์ดิบ
มาตกตะกอนด้วยแอมโมเนียมซัลเฟต ( 80 %
อิ่มตัว ) ตามไมเคิล et al . ( 2001 )
ที่ได้โดยการเหวี่ยงแยกที่ 10 , 000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาที
ตะกอนละลายใน 20 ml
โดย CL บัฟเฟอร์ ( อืม พีเอช 8.5 10 ) และซิ
ค้างคืนกับบัฟเฟอร์เดียวกัน ผ่าน
เอนไซม์ถูกใช้เป็นบางส่วน และใช้เอนไซม์เอนไซม์

ตัวละคร