All reagents used in PCR amplificat

All reagents used in PCR amplification were purchased from Fermentas
International Inc., Ontario, Canada. The amplification was done in
50 μl reaction volumes as described by Hoefel et al. (2005). Each PCR
reaction consisted of 200 μM of each dNTP, 1.0 μM of each primer,
2.5 mM MgCl2, 1X PCR buffer, 2.5 U of Taq DNA polymerase, and 1 μl
DNA template. The thermal cycling included an initial denaturation
step at 95 °C for 10 min; 30 cycles of a denaturation step at 95 °C for
30 s, an annealing step at 50 °C for 1 min, an extension step at 72 °C
for 2 min; and a final extension at 72 °C for 10 min. The PCR product
was checked using 0.8% (w/v) agarose gel electrophoresis. The gel was
visualized using an Image Master® VDS.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ใช้ขยาย PCR reagents ทั้งหมดซื้อจาก Fermentas
อินเตอร์เนชั่นแนล อิงค์ Ontario ประเทศแคนาดา ทำการขยายใน
μl 50 ปฏิกิริยาปริมาณตามที่อธิบายไว้โดย Hoefel et al. (2005) PCR แต่ละ
ปฏิกิริยาประกอบด้วย μM 200 ของแต่ละ dNTP, μM 1.0 แต่ละพื้น,
2.5 มม. MgCl2 บัฟเฟอร์ X PCR 1, 2.5 U Taq DNA พอลิเมอเรส และ 1 μl
DNA แม่แบบ จักรยานความร้อนรวม denaturation เป็นต้น
ขั้นตอนที่ 95 ° C สำหรับ 10 นาที รอบ 30 ของขั้นตอน denaturation ที่ 95 ° C สำหรับ
30 s การอบเหนียวมีขั้นตอนในขั้นตอนการขยายที่ 72 ° C, 50 ° C สำหรับ 1 นาที
สำหรับ 2 นาที และนามสกุลเป็นขั้นสุดท้ายที่ 72 ° C สำหรับ 10 นาที ผลิตภัณฑ์ PCR
ถูกตรวจสอบโดยใช้ electrophoresis เจ agarose 0.8% (w/v) เจถูก
visualized ใช้ VDS ®เป็นภาพต้นแบบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สารเคมีที่ใช้ในการขยาย PCR ซื้อมาจาก Fermentas
อินเตอร์เนชั่นแนลอิงค์, Ontario, แคนาดา ขยายที่ทำใน
ปริมาณ 50 ไมโครลิตรปฏิกิริยาตามที่อธิบาย Hoefel ตอัล (2005) แต่ละวิธี PCR
ปฏิกิริยาประกอบด้วย 200 ไมโครโมลาร์ของแต่ละ dNTP, 1.0 ไมครอนของแต่ละไพรเมอร์
2.5 มิลลิ MgCl2 บัฟเฟอร์ 1X PCR 2.5 U ของ Taq ดีเอ็นเอโพลิเมอร์และ 1 ไมโครลิตร
ดีเอ็นเอแม่แบบ การขี่จักรยานร้อนรวม denaturation เริ่มต้น
ขั้นตอนที่ 95 ° C เป็นเวลา 10 นาที; 30 รอบของขั้นตอน denaturation 95 ° C เป็นเวลา
30 วินาทีขั้นตอนการหลอมที่ 50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาทีขั้นตอนการขยายที่ 72 ° C
เป็นเวลา 2 นาที; และนามสกุลสุดท้ายที่ 72 ° C เป็นเวลา 10 นาที ผลิตภัณฑ์ PCR
ถูกตรวจสอบโดยใช้ 0.8% (w / v) อิเจล agarose เจลที่ได้รับการ
มองเห็นโดยใช้โทภาพ® VDS

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สารเคมีที่ใช้ในการเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอ ทั้งหมดซื้อมาจาก fermentas
อินเตอร์เนชั่นแนลอิงค์ , Ontario , แคนาดา การเพิ่มปริมาณได้ใน
50 μ L ปฏิกิริยาปริมาณตามที่อธิบายไว้โดย hoefel et al . ( 2005 ) ในปฏิกิริยา PCR
จำนวน 200 μ M ของแต่ละ dntp 1.0 μ M ของแต่ละชุดไพรเมอร์
2.5 มม. , 1x PCR buffer , 2.5 U ของดีเอ็นเอพอลิเมอเรส ทัค และ 1 μ L
ดีเอ็นเอแม่แบบการขี่จักรยานความร้อนรวมเริ่มต้นที่ 95 องศา C (
ขั้น 10 นาที ; 30 รอบของขั้นตอนที่ 95 องศา C (
30 s , ขั้นตอนที่ 50 องศา C อบนาน 1 นาที ต่อขั้นตอนที่ 72 ° C
2 มิน และงานสุดท้ายที่ 72 ° C สำหรับ 10 นาที pcr ผลิตภัณฑ์
ถูกตรวจสอบโดยใช้ 0.8 % ( w / v ) , เจล เจลคือภาพโดยใช้ภาพต้นแบบ
® VDS .