Transcript levels for photosynthesi

Transcript levels for photosynthesis were assessed by three
independent biological replicates in real-time PCR in triplicate
with reaction mixtures (final volume, 20 lL) containing
5 lL of cDNA, 0.5 lM of both forward and reverse primers,
and 19 FastStart SYBR Green Master mix (Roche). A balanced
randomized block design was used for the real-time
RT-PCR experiments (Rieu and Powers 2009). The following
standard protocol was applied for the amplification of each
mRNA: 10 min at 95 C, followed by 40 cycles of 10 s at
95 C, 15 s at 60 C, and 15 s at 72 C. The reference gene
was S1F Sense CCAAAGGAGGTGCCTGTTCA, S2R Antisense
TTGAGGTGAGTCAGAATGTTGTTC described by
Yang et al. 2005. The six photosynthesis-related genes
monitored were: psaA (photosystem I P700 chlorophyll a
apoprotein A1), psaB (photosystem I P700 chlorophyll a
apoprotein A2), psbA (photosystem II protein D1), ccsA
(cytochrome c biogenesis protein), ycf3 (photosystem I
assembly protein ycf3), ndhF (NADH dehydrogenase
subunit 5) with primer sequence as Table 4.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีประเมินระดับเสียงบรรยายสำหรับการสังเคราะห์ด้วยแสง โดยสามทางชีวภาพอิสระเหมือนกับใน PCR แบบเรียลไทม์ใน triplicateมีส่วนผสมของปฏิกิริยา (ปริมาตรสุดท้าย 20 lL) ที่ประกอบด้วย5 lL ของ cDNA, 0.5 lM ของไพรเมอร์ทั้งไปข้างหน้า และย้อนหลังและ 19 FastStart SYBR Green หลักผสม (Roche) ที่สมดุลออกแบบบล็อก randomized ถูกใช้ในแบบเรียลไทม์ทดลองของ RT-PCR (Rieu และอำนาจ 2009) ต่อไปนี้ใช้สำหรับขยายของแต่ละโพรโทคอลมาตรฐานmRNA: 10 นาทีที่ 95 C ตามรอบ 40 10 s ที่95 C, 15 s ที่ 60 C และ 15 s ที่ค. 72 ยีนอ้างอิงมี S1F ความรู้สึก CCAAAGGAGGTGCCTGTTCA, S2R Antisenseโดย TTGAGGTGAGTCAGAATGTTGTTCยาง et al. 2005 ยีนที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์ด้วยแสงที่ 6ตรวจสอบได้: psaA (photosystem ฉัน P700 คลอโรฟิลล์ aapoprotein A1), psaB (photosystem ฉัน P700 คลอโรฟิลล์ aapoprotein A2), psbA (photosystem II โปรตีนง 1, ccsA(โปรตีน cytochrome c biogenesis), ycf3 (photosystem ฉันส่วนประกอบโปรตีน ycf3), ndhF (NADH dehydrogenaseย่อยที่ 5) มีลำดับรองพื้นเป็นตาราง 4

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ระดับ Transcript
สำหรับการสังเคราะห์แสงได้รับการประเมินโดยสามซ้ำชีวภาพอิสระPCR แบบ real-time
ในเพิ่มขึ้นสามเท่าด้วยผสมปฏิกิริยา(เล่มสุดท้าย 20 LL) ที่มี
5 LL ของยีน, 0.5 LM
ทั้งข้างหน้าและไพรเมอร์กลับและ19 FastStart SYBR ผสมสีเขียวโท (Roche) สมดุลการออกแบบบล็อกสุ่มใช้สำหรับเวลาจริงทดลองRT-PCR (Rieu และพลัง 2009) ต่อไปนี้โปรโตคอลมาตรฐานถูกนำมาใช้สำหรับการขยายของแต่ละmRNA: 10 นาทีที่ 95 C ตามด้วย 40 รอบของ 10 วินาทีที่? 95 C, 15 วินาทีที่ 60 องศาเซลเซียสและ 15 วินาทีที่ 72 C? ยีนอ้างอิงเป็น S1F รู้สึก CCAAAGGAGGTGCCTGTTCA, S2R antisense TTGAGGTGAGTCAGAATGTTGTTC อธิบายโดยYang et al, ปี 2005 หกสังเคราะห์ยีนที่เกี่ยวข้องกับการได้รับการตรวจสอบ: psaA (photosystem ฉัน P700 คลอโรฟิลapoprotein A1) psaB (photosystem ฉัน P700 คลอโรฟิลapoprotein A2) psbA (photosystem II โปรตีน D1) CCSA (cytochrome โปรตีนค biogenesis) ycf3 (photosystem ผมโปรตีนycf3 ประกอบ) ndhF (NADH dehydrogenase subunit 5) ด้วยไพรเมอร์เป็นลำดับตารางที่ 4

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผลการเรียนระดับสำหรับการสังเคราะห์แสงได้ถูกประเมิน โดย 3
อิสระชีวภาพซ้ำใน PCR แบบเรียลไทม์ทั้งสามใบ
ที่มีส่วนผสมของปฏิกิริยา ( เล่ม 20 จะสุดท้าย )
5 จะประกอบด้วย cDNA 0.5 LM ของทั้งสองไปข้างหน้าและย้อนกลับไพรเมอร์
19 faststart SYBR กรีนมาสเตอร์ผสม ( ยา ) สมดุล
Randomized Block ใช้สำหรับการทดลองนี้เรียลไทม์
( Rieu และพลัง 2009 )ต่อไปนี้
โปรโตคอลมาตรฐานที่ใช้สำหรับการเพิ่มปริมาณของ mRNA แต่ละ
: 10 นาทีที่ 95  C ตามด้วย 40 รอบ 10 s
95  C 15 S 60  C , และ 15 s 72  C อ้างอิง
คือความรู้สึก ccaaaggaggtgcctgttca s1f ยีน antisense s2r ,
ttgaggtgagtcagaatgttgttc อธิบายโดย
หยาง et al . 2005 6 การสังเคราะห์ยีนที่เกี่ยวข้องกับการเป็น : psaa
( photosystem ผม p700 คลอโรฟิลล์
โพโปรตีน A1 ) , psab ( photosystem ผม p700 คลอโรฟิลล์
โปโปรตีน A2 ) , psba ( D1 โปรตีน photosystem II ) ccsa
( มั่มเครื่องกรองอากาศโปรตีน ) , ycf3 ( photosystem ผม
ประกอบโปรตีน ycf3 ) ndhf ( รวมทั้ง NADH dehydrogenase
5 ) ด้วยไพรเมอร์ลำดับตาราง 4