Total nucleic acid was isolated fro

Total nucleic acid was isolated from A. tubingensis (grown in SC with 2% raw corn starch) using liquid nitrogen [42] and mRNA was retrieved with the FastTrack 2.0 mRNA Isolation Kit (Invitrogen Corporation, Carlsbad, CA, USA). First strand cDNA was obtained with the RevertAid™ H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit (ThermoScientific, South Africa) and used for amplification of the complete cDNA copies of amyA and glaA using a Perkin Elmer Gene Amp® PCR System 2400 and TaKaRa Ex Taq™ (Takara Bio Inc, Japan) as per the manufacturer’s recommendations. The amyA and glaA cDNA fragments were blunt-end ligated into the pTZ57R/T vector (InsTAclone™ PCR Cloning Kit, ThermoScientific), thereafter designated pTZ-AmyA and pTZ-GlaA, respectively. Sequence analysis was done with the ABI PRISM™ 3100 Genetic Analyser, BLAST program (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi webcite) and DNAMAN (version 4.1) (Lynnon Biosoft).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กรดนิวคลีอิกรวมถูกแยกจาก A. tubingensis (ปลูกใน SC กับแป้งข้าวโพดดิบ 2%) โดยใช้ไนโตรเจนเหลว [42] และ mRNA ถูกดึงกับ mRNA FastTrack 2.0 ชุดแยก (Invitrogen Corporation คาร์ลส CA, USA) แรกสแตรนด์ cDNA กล่าวกับ cDNA RevertAid ™ H ลบแรกสาระชุดสังเคราะห์ (ThermoScientific แอฟริกาใต้) และใช้สำหรับขยายสำเนา cDNA ที่สมบูรณ์ของ amyA และ glaA โดยใช้ PCR เพอร์เอลเมอยีน Amp ®ระบบ 2400 และ™ Taq อดีต TaKaRa (Takara ชีวภาพ Inc ญี่ปุ่น) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต AmyA และ glaA ในบางส่วนของ cDNA ทู่ส่วนควบเป็นเวกเตอร์ pTZ57R/T (InsTAclone ™ PCR โคลนชุด ThermoScientific), pTZ AmyA หลังจากนั้นกำหนด และ pTZ-GlaA ตามลำดับ ทำการวิเคราะห์ ด้วยการปริซึม ABI ™ 3100 พันธุ Analyser โปรแกรมระเบิด (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi webcite) และ DNAMAN (เวอร์ชัน 4.1) (Lynnon Biosoft)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กรดนิวคลีอิกรวมแยกได้จากเอ tubingensis (ปลูกในเซาท์แคโรไลนาด้วยแป้งข้าวโพดดิบ 2%) โดยใช้ไนโตรเจนเหลว [42] และ mRNA ถูกดึงด้วย FastTrack 2.0 mRNA แยก Kit (Invitrogen คอร์ปอเรชั่น Carlsbad, CA, USA) cDNA สาระครั้งแรกที่ได้รับกับ RevertAid ™ H ลบแรก Strand ยีนสังเคราะห์ Kit (ThermoScientific, แอฟริกาใต้) และใช้สำหรับการขยายของสำเนายีนที่สมบูรณ์ของ amyA และ glaA ใช้ Perkin Elmer ยีนแอมป์® PCR ระบบ 2400 TAKARA Ex Taq ™ (Takara Bio Inc, ญี่ปุ่น) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต amyA และ glaA ยีนชิ้นส่วนถูกทื่อสิ้น ligated เป็น pTZ57R / T เวกเตอร์ (InsTAclone ™ PCR โคลนชุด ThermoScientific) กำหนดหลังจากนั้น PTZ-AmyA และ PTZ-GlaA ตามลำดับ วิเคราะห์ลำดับที่ทำด้วย ABI PRISM ™ 3100 วิเคราะห์ทางพันธุกรรมโปรแกรมระเบิด (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi webcite) และ DNAMAN (รุ่น 4.1) (Lynnon Biosoft)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

รวมกรดนิวคลีอิกถูกแยกจาก อ. tubingensis ( เติบโตใน SC 2 % แป้งดิบข้าวโพดโดยใช้ไนโตรเจนเหลว ) [ 42 ] และ mRNA mRNA ถูกดึงกับ Fasttrack 2.0 แยกชุด ( Invitrogen Corporation , Carlsbad , CA , USA ) วิธีแรก ชายหาดได้ด้วย revertaid ™ H ลบเส้นดีเอ็นเอสังเคราะห์ ( thermoscientific ชุดแรก ,แอฟริกาใต้ ) และใช้วิธีแบบชุดสมบูรณ์ของ amya glaa เพอร์กินเอลเมอร์ ยีน และใช้แอมป์® PCR และอดีตได้ดี™ระบบ 2400 ทาคาระ ( Takara ชีวภาพ Inc , ญี่ปุ่น ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต การ amya glaa cDNA และเศษเป็นปลายทู่ผูกเป็น ptz57r / T เวกเตอร์ ( instaclone ™ดีเอ็นเอโคลนนิ่งชุด thermoscientific ) หลังจากนั้นเขต PTZ และ glaa amya PTZ ,ตามลำดับ การวิเคราะห์ลำดับทำกับ ABI ปริซึม™ 3100 พันธุกรรมวิเคราะห์โปรแกรมระเบิด ( http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/blast.cgi webcite ) และ dnaman ( เวอร์ชั่น 4.1 ) ( lynnon ไบโอซอฟท์ )