A fetuin derivative of α-amanitin w

A fetuin derivative of α-amanitin was prepared and used as an antigen in rabbits. The antigen was superior to previous bovine serum albumin derivatives of β-amanitin by its lower toxicity and high immunogenicity. On the other hand, the antibodies raised with the α-amanitin derivative did not show full crossreactivity with the other amatoxins, as did the immunoglobulins induced by protein derivatives of β-amanitin. The procedure for activating nylon surfaces and coupling proteins onto them was improved with respect to surface charge and homogeneity. A partially purified IgG-fraction derived from the sera of rabbits immunized against amatoxins was covalently attached to the activated nylon surfaces. The covalently coupled immunoglobulins were complexed with a tritiated amatoxin. Then small pieces of the nylon sheet were punched out and incubated with the amatoxin solution to be analyzed. This procedure represents a method for dosing, in one step and without pipetting, the immunoglobulins and the labelled hapten. Determination of amatoxin concentrations was achieved by counting the radioactivity in the incubation fluid. The limit of detection was about 3 ng of amatoxins per ml. The radioimmunoassay was used to measure amatoxin concentrations in serum, urine, duodenal fluid, and gastric juice of patients with Amanita poisoning. Since such assays can be performed in 2-3 hr, the results can be used to determine the therapeutic protocol. The assay was likewise used to determine the concentration of amatoxins in mushroom tissue. For Amanita phalloides, for example, we found that the amatoxin concentration (mg/g dry weight) is 4.5 times higher in the gills than in the bulb.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อนุพันธ์ fetuin ของα-amanitin เตรียม และใช้เป็นการตรวจหาในกระต่าย ตรวจหาการมีเหนือกว่าก่อนหน้าวัว serum albumin อนุพันธ์ของβ-amanitin โดยความเป็นพิษต่ำความสูง immunogenicity บนมืออื่น ๆ แอนตี้ขึ้น ด้วยอนุพันธ์α amanitin ไม่ได้แสดง crossreactivity เต็ม มี amatoxins อื่น ๆ เป็นได้ที่เกิดจากโปรตีนอนุพันธ์ของβ-amanitin immunoglobulins ขั้นตอนในการเปิดใช้งานพื้นผิวไนลอน และ coupling โปรตีนไปไม่ขึ้นกับค่าผิวและ homogeneity บริสุทธิ์บางส่วน IgG-เศษส่วนมาจากนโยบายของกระต่ายที่ immunized กับ amatoxins covalently แนบกับพื้นไนล่อนที่เรียกใช้งาน Immunoglobulins covalently coupled complexed กับ tritiated amatoxin ได้ แล้ว ชิ้นเล็ก ๆ ของแผ่นไนล่อนถูกเจาะรูออก และ incubated ด้วยโซลูชั่น amatoxin จะวิเคราะห์ ขั้นตอนนี้แสดงถึงวิธีการกระบวน ในขั้นตอนเดียว และไม่ มี pipetting, immunoglobulins และ hapten มัน กำหนดความเข้มข้น amatoxin สำเร็จ โดยนับ radioactivity ในน้ำมันคณะทันตแพทยศาสตร์ ขีดจำกัดของการตรวจสอบเกี่ยวกับ 3 ng amatoxins ต่อ ml Radioimmunoassay ที่ใช้วัดความเข้มข้นของ amatoxin ในซีรั่ม ปัสสาวะ duodenal น้ำมัน และ gastric น้ำของผู้ป่วยที่มีการเกิดพิษ ตั้งแต่ assays ดังกล่าวสามารถดำเนินการใน 2-3 ชั่วโมง ผลลัพธ์สามารถใช้เพื่อกำหนดโพรโทคอลรักษา การวิเคราะห์ในทำนองเดียวกันใช้เพื่อกำหนดความเข้มข้นของ amatoxins ในเนื้อเยื่อเห็ด เกิด phalloides เช่น เราพบว่าความเข้มข้น amatoxin (มิลลิกรัม/กรัมน้ำหนักแห้ง) สูง 4.5 ครั้งใน gills กว่าในกระเปาะ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อนุพันธ์ fetuin ของα-amanitin ได้รับการเตรียมความพร้อมและใช้เป็นแอนติเจนในกระต่าย แอนติเจนจะดีกว่าอนุพันธ์วัวซีรั่มอัลบูมิก่อนหน้าของβ-amanitin โดยความเป็นพิษลดลงและภูมิคุ้มกันสูง ในทางตรงกันข้าม, แอนติบอดี้ขึ้นกับอนุพันธ์α-amanitin ไม่แสดง crossreactivity เต็มไปด้วย amatoxins อื่น ๆ ตามที่ได้ภูมิคุ้มกันบกพร่องที่เกิดจากตราสารอนุพันธ์โปรตีนของβ-amanitin ขั้นตอนการเปิดใช้งานพื้นผิวไนลอนและการมีเพศสัมพันธ์โปรตีนบนพวกเขาได้รับการปรับปรุงเกี่ยวกับพื้นผิวค่าใช้จ่ายและความสม่ำเสมอ บริสุทธิ์บางส่วน IgG-ส่วนที่ได้มาจากซีรั่มของกระต่ายวัคซีนป้องกัน amatoxins ติด covalently กับพื้นผิวไนลอนเปิดใช้งาน immunoglobulins คู่ covalently ถูก complexed กับ amatoxin tritiated จากนั้นชิ้นเล็ก ๆ ของแผ่นไนลอนที่ถูกกดออกและบ่มด้วยโซลูชั่น amatoxin ที่จะวิเคราะห์ ขั้นตอนนี้แสดงให้เห็นถึงวิธีการใช้ยาในขั้นตอนเดียวและไม่มีปิเปตภูมิคุ้มกันบกพร่องและ hapten ป้าย การกำหนดความเข้มข้น amatoxin ก็ประสบความสำเร็จโดยการนับกัมมันตภาพรังสีในน้ำบ่ม ขีด จำกัด ของการตรวจสอบเกี่ยวกับการศึกษาของ 3 amatoxins ต่อมิลลิลิตร radioimmunoassay ถูกใช้ในการวัดความเข้มข้นในซีรั่ม amatoxin ปัสสาวะของเหลวลำไส้และน้ำย่อยของผู้ป่วยที่มีพิษ Amanita ตั้งแต่การตรวจดังกล่าวสามารถดำเนินการใน 2-3 ชั่วโมงผลที่สามารถใช้ในการกำหนดโปรโตคอลการรักษา ทดสอบถูกนำมาใช้เช่นกันเพื่อตรวจสอบความเข้มข้นของ amatoxins ในเนื้อเยื่อเห็ด สำหรับ phalloides Amanita ตัวอย่างเช่นเราพบว่ามีความเข้มข้น amatoxin (mg / กรัมน้ำหนักแห้ง) เป็น 4.5 เท่าสูงกว่าในเหงือกกว่าในหลอดไฟ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

คนเป็นอนุพันธ์ของแอลฟาอะมานิตินเตรียมไว้ และใช้เป็นแอนติเจนในกระต่าย แอนติเจนที่ดีกว่าเดิมคืออัลบูมินอนุพันธ์ของบีตา - อะมานิตินโดยความเป็นพิษต่ำและสามารถสูง บนมืออื่น ๆ , แอนติบอดีเพิ่มขึ้นกับแอลฟาอะมานิตินอนุพันธ์ไม่ได้แสดง crossreactivity เต็มกับมาท็ ซิน อื่น ๆเช่นเดียวกับมมูโนโกลบูลินและอนุพันธ์ของโปรตีนบีตา - อะมานิติน . ขั้นตอนการเปิดใช้งานพื้นผิวไนลอนและโปรตีนคู่ลงบนพวกเขามีการปรับปรุงเกี่ยวกับประจุพื้นผิวและความสม่ำเสมอ . เป็นส่วนที่ได้มาจากบริสุทธิ์บางส่วน IgG ( ของกระต่ายที่ได้รับกับมาท็ ซิน คือ covalently แนบใช้ไนลอน พื้นผิวมมูโนโกลบูลิน เป็นคู่ที่ covalently complexed กับอะมาท็อกซิน tritiated . แล้วชิ้นเล็ก ๆของแผ่นไนลอนถูกชกไปบ่มด้วยอะมาท็อกซิน โซลูชั่น ที่จะวิเคราะห์ วิธีนี้เป็นวิธีสำหรับยาในขั้นตอนเดียวและไม่มี pipetting , มมูโนโกลบูลิน และติดป้าย hapten .การหาความเข้มข้นของอะมาท็อกซินทำโดยการนับกัมมันตภาพรังสีในการบ่มของเหลว ขีดจำกัดของการตรวจหาประมาณ 300 นาโนกรัมต่อมิลลิลิตร ซึ่ง radioimmunoassay มาท็ ซินใช้วัดอะมาท็อกซินความเข้มข้นในเลือดปัสสาวะ ลำไส้ของเหลว และน้ำย่อยในกระเพาะอาหารของผู้ป่วยเป็นการเกิดพิษ เนื่องจากวิธีการดังกล่าวสามารถดำเนินการได้ภายใน 2-3 ชั่วโมงผลลัพธ์ที่สามารถใช้เพื่อตรวจสอบขั้นตอนการรักษา ( ก็เช่นเดียวกันใช้เพื่อตรวจสอบความเข้มข้นของมาท็ ซิน ในเนื้อเยื่อเห็ด สำหรับสัดส่วนของร่างกาย ตัวอย่างเช่น เราพบว่า ความเข้มข้นของอะมาท็อกซิน ( มิลลิกรัม / กรัมน้ำหนักแห้ง ) เป็น 4.5 เท่าสูงกว่าในเหงือกมากกว่าในหลอดไฟ