Three LAB strains (AC-1, AC-5 and A

Three LAB strains (AC-1, AC-5 and AC-6) were selected based
on the results of the freeze challenge and were considered as
potential inhibitors of the chosen target pathogenic microorganisms
(Table 1). These strains could potentially produce
bacteriocin or bacteriocin-like substances with antimicrobial activity.Target
pathogens were chosen on the basis of their notable
deleterious influence on the safety of food products. The presumed
LAB strains were cultured overnight in MRS broth at 37 °C.
Cells were then removed by centrifuging at 9000 g for 15 min
at 4 °C. To rule out any inhibition due to pH reduction caused
by organic acid production, the supernatant was adjusted to pH
6.0 with sterilized 2.5 mole/l NaOH. Later, the supernatant was
filtered through a syringe filter with a pore size of 0.22 m (Merck
Millipore) and maintained in sterile conditions. The screening
for antimicrobial activity was carried out according to Vaconcelos,
Gomes de Andrade Lima, and Torres Calazans (2010) with some
modifications. The cell-free supernatants were treated by addition
of a sterile solution of catalase (Sigma) (1 mg/ml) for 30 min
to eliminate any possible inhibitory action of hydrogen peroxide.
They were then added at the same volume to MH (Mueller–
Hinton) (Acumedia) broth inoculated with 10% (v/v) of a diluted
1:10 (v/v) overnight culture (37 °C) of the target pathogenic strains.
This extract was placed into a 96-well plate, and the inhibitory
growth test was measured after 3 and 6 h of growth at 37 °C using
a detection absorbance reader microplate spectrophotometer
model PowerWave XS at 630 nm (Biotek,Winooski,VT, USA).Tests
were performed in duplicate, and the percentage of growth
inhibition was calculated using the following equation:

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สายพันธุ์ห้องปฏิบัติการ 3 (AC 1, AC-5 และ AC 6) ได้เลือกใช้ผลของความท้าทายหยุด และได้ถือเป็นจุลินทรีย์เป้าหมาย inhibitors เป็นของเลือก(ตาราง 1) สายพันธุ์เหล่านี้อาจไม่สามารถผลิตbacteriocin หรือสาร bacteriocin เหมือนกับกิจกรรมจุลินทรีย์เป้าหมายโรคที่ถูกเลือก โดยความโดดเด่นมีอิทธิพลที่สุดในความปลอดภัยของผลิตภัณฑ์อาหาร จะ presumedห้องปฏิบัติการสายพันธุ์ถูกอ่างค้างคืนในซุป MRS ที่ 37 องศาเซลเซียสออกเซลล์ โดย centrifuging g 9000 สำหรับ 15 นาทีที่แล้วที่ 4 องศาเซลเซียส การยกเลิกใด ๆ ยับยั้งเนื่องจากเกิดการลดค่า pHโดยการผลิตกรดอินทรีย์ supernatant ถูกปรับค่า pH6.0 กับ sterilized 2.5 โมล/l NaOH ภายหลัง supernatant ถูกกรองผ่านตัวกรองเข็มมีรูขนาด 0.22 ม. (เมอร์คมาก) และรักษาสภาพฆ่าเชื้อ คัดกรองสำหรับกิจกรรมจุลินทรีย์ถูกดำเนินการตาม Vaconcelosยูโกมีส de Andrade ลิมา และ Calazans ทอร์เรส (2010) กับปรับเปลี่ยน Supernatants ฟรีเซลล์ได้รับการรักษา โดยการเพิ่มของโซลูชันกอซของ catalase (ซิกมา) (1 mg/ml) สำหรับ 30 นาทีเพื่อกำจัดการกระทำลิปกลอสไขใด ๆ เป็นไปได้ของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์พวกเขาถูกเพิ่มในไดรฟ์ข้อมูลเดียวกันกับ MH (เลอร์ –Hinton) (Acumedia) ซุป inoculated 10% (v/v) ของการแตกออก1:10 (v/v) นอนวัฒนธรรม (37 ° C) ของสายพันธุ์อุบัติของเป้าหมายสารสกัดนี้มีอยู่ในแผ่นดี 96 และที่ลิปกลอสไขทดสอบการเจริญเติบโตที่วัดหลังจาก 3 และ 6 h ของการเติบโตที่ 37 ° C โดยใช้การตรวจหา absorbance อ่าน microplate เครื่องทดสอบกรดด่างรุ่น PowerWave XS ที่ 630 nm (Biotek, Winooski, VT สหรัฐอเมริกา)ทดสอบดำเนินซ้ำ และเปอร์เซ็นต์การเจริญเติบโตยับยั้งคำนวณโดยใช้สมการต่อไปนี้:

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สามสายพันธุ์ LAB (AC-1, AC-5 และ AC-6) ได้รับการคัดเลือกขึ้นอยู่
กับผลของความท้าทายแช่แข็งและได้รับการพิจารณาว่าเป็น
สารยับยั้งที่มีศักยภาพของจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคเป้าหมายได้รับการแต่งตั้ง
(ตารางที่ 1) สายพันธุ์เหล่านี้อาจจะผลิต
bacteriocin หรือสาร bacteriocin เช่นเดียวกับ activity.Target ยาต้านจุลชีพ
ก่อโรคที่ถูกเลือกบนพื้นฐานของพวกเขาโดดเด่น
อิทธิพลอันตรายต่อความปลอดภัยของผลิตภัณฑ์อาหาร สันนิษฐานว่า
สายพันธุ์ LAB ถูกเลี้ยงค้างคืนในอาหาร MRS broth ที่อุณหภูมิ 37 ° C.
เซลล์ที่ถูกลบออกไปแล้วโดยการปั่นแยกที่ 9000 กรัมเป็นเวลา 15 นาที
ที่ 4 ° C ที่จะออกกฎการยับยั้งใด ๆ เนื่องจากการลดลงของค่าความเป็นกรดที่เกิด
จากการผลิตกรดอินทรีย์ใสได้รับการปรับให้มีค่า pH
6.0 ที่มีการฆ่าเชื้อ 2.5 โมล / ลิตร NaOH ต่อมาใสได้รับการ
กรองผ่านตัวกรองเข็มฉีดยาที่มีขนาดรูขุมขนของ 0.22 เมตร (เมอร์
ค) และเก็บรักษาไว้ในสภาพปลอดเชื้อ การตรวจคัดกรอง
หาฤทธิ์ต้านจุลชีพได้ดำเนินการตาม Vaconcelos,
Gomes de Andrade ลิมาและตอร์เร Calazans (2010) กับบางส่วน
ปรับเปลี่ยน supernatants ปราศจากเซลล์ได้รับการรักษาโดยการเพิ่ม
ของการแก้ปัญหาผ่านการฆ่าเชื้อของ catalase (Sigma) (1 mg / ml) เป็นเวลา 30 นาที
เพื่อขจัดยับยั้งการกระทำใด ๆ ที่เป็นไปได้ของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์.
พวกเขาถูกเพิ่มแล้วในปริมาณเดียวกันกับ MH (Mueller-
ฮินตัน) (Acumedia) น้ำซุปเชื้อด้วย 10% (v / v) เจือจาง
1:10 (v / v) วัฒนธรรมในชั่วข้ามคืน (37 ° C) ของเป้าหมายสายพันธุ์ที่ทำให้เกิดโรค.
สารสกัดนี้ถูกวางลงในแผ่น 96-ดี และยับยั้ง
การเจริญเติบโตของการทดสอบการวัดที่ 3 และ 6 ชั่วโมงของการเจริญเติบโตที่อุณหภูมิ 37 ° C โดยใช้
การตรวจสอบการดูดกลืนแสงอ่าน microplate สเปก
รุ่น POWERWAVE XS ที่ 630 นาโนเมตร (Biotek, นุ, เวอร์มอนต์สหรัฐอเมริกา) .Tests
ได้ดำเนินการในที่ซ้ำกันและร้อยละ การเจริญเติบโตของ
การยับยั้งที่คำนวณได้จากสมการต่อไปนี้:

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 สายพันธุ์ ( ac-1 Lab , และ AC ac-6 ) ได้รับการคัดเลือกจาก
ผลแช่แข็งที่ท้าทายและถูกถือว่าเป็นสารยับยั้งที่มีศักยภาพของการเลือกเป้าหมาย

เชื้อโรคจุลินทรีย์ ( ตารางที่ 1 ) สายพันธุ์เหล่านี้อาจผลิต
ต่อหรือต่อเช่นสารที่มีฤทธิ์ต้านจุลชีพ . เชื้อโรคเป้าหมาย
ถูกเลือกบนพื้นฐานของ
เด่นของพวกเขาคงมีผลต่อความปลอดภัยของผลิตภัณฑ์อาหาร สันนิษฐาน
แล็บเพาะเลี้ยงสายพันธุ์ชั่วข้ามคืนใน MRS broth ที่ 37 ° C .
เซลล์แล้วลบออกโดยวรรณนาที่ 9000 กรัม 15 นาที
ที่ 4 องศา เพื่อออกกฎใด ๆเนื่องจากการเกิดสารอ
โดยการผลิตกรดอินทรีย์ คือ นำค่า pH
6.0 กับฆ่าเชื้อ 2.5 โมลต่อลิตร NaOH . ต่อมา น่านคือ
กรองผ่านตัวกรองที่มีขนาดรูพรุนของเข็ม 0.22 m ( เมอร์คมิลลิ
) และรักษาในสภาพปลอดเชื้อ การคัดกรองฤทธิ์ต้านจุลชีพ
เพื่อดำเนินการตาม vaconcelos
Gomes เดอ อันดราเด้ , ลิม่า และ ตอร์เรส calazans ( 2010 ) กับบาง
การปรับเปลี่ยน การสังเคราะห์ supernatants ได้รับนอกจากนี้
ของโซลูชั่นปลอดเชื้อของคาตาเลส ( ซิกม่า ) ( 1 mg / ml ) สำหรับ 30 นาที
เพื่อขจัดอาจยับยั้งการกระทำของ ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ .
จากนั้นเพิ่มที่ปริมาณเดียวกันกับ MH ( Mueller –
เด็ก ) ( acumedia ) น้ำซุปที่ใส่ 10% ( v / v )
เจือจาง 1 : 10 ( v / v ) วัฒนธรรมในชั่วข้ามคืน ( 37 ° C ) ของเป้าหมาย
เชื้อโรคสายพันธุ์ สารสกัดนี้จะถูกวางไว้ใน 96 ดีจาน และทดสอบการยับยั้งการเจริญเติบโต
วัดหลัง 3 และ 6 ชั่วโมงของการเจริญเติบโตที่อุณหภูมิ 37 องศา C โดยใช้
การตรวจหาค่าการดูดกลืนแสง Spectrophotometer แบบอ่านพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย
powerwave XS ที่ 630 nm ( biotek Winooski , VT , USA ) การทดสอบ
แสดงในที่ซ้ำกัน และร้อยละของการยับยั้งการเจริญเติบโต
คำนวณได้โดยใช้สมการต่อไปนี้ :