4.3. Cellular trafficking
Regulated trafficking also plays a key role in plant aquaporin
expression and regulation. PIP1s have been described since long as
having no or a weak water transport activity when individually
expressed in Xenopus oocytes. This can be explained by a failure to
traffic properly to the oocyte plasma membrane [22], this defect being
overcome after co-expression with PIP2 homologs. Direct evidence for
a physical interaction between PIP1s and PIP2s was obtained in oocytes
or plants by affinity copurification, coimmunopurification and fluorescence
resonance energy transfer (FRET) methods [22,23]. Thus,
formation of heterotetramers comprising various PIP1 and PIP2
combinations may be crucial for proper localization of PIPs at the
surface of plant cells.
Stimulus-induced subcellular trafficking of plant aquaporins was
first characterized in ice plant McTIP1;2. This aquaporin was found to
be redistributed from tonoplast to intracellular vesicles during osmotic
stress by a glycosylation-dependent mechanism [67]. Regulated
trafficking of PIPs and TIPs was also proposed to play an important
role during root response to salt and oxidative stresses [24,25].
Following treatment of Arabidopsis roots with 100 mM NaCl for 4 h
or with 2 mM H2O2 for 15 min, Lpr was inhibited by N70% and an
intracellular relocalization of several highly expressed plasma
membrane and tonoplast aquaporins was observed [39]. Further
studies showed that the salt-induced relocalization of PIPs is mediated
by reactive oxygen species (ROS)-activated cell signaling cascades. In
addition, the role of AtPIP2;1 phosphorylation at Ser283 in directing
the protein to a specific endosomal (prevacuolar) compartment was
demonstrated [20,73]. Advanced fluorescence microscopic approaches
have recently brought deeper insights into the effects of salt on the
membrane dynamics of PIPs in root epidermal cells. Variable-angle evanescent wave microscopy indicated that the diffusion rate of a
PIP2;1-GFP fusion at the cell surface was increased by 2-fold by salt
stress, whereas fluorescence correlation spectroscopy revealed that
PIP2;1-GFP density in the plasma membrane was decreased by 46%
[74]. Moreover, a novel Fluorescence Recovery After Photobleaching
(FRAP) approach indicated that salt stress enhances PIP cycling
between the cell surface and endosomes, by acting on both endocytosis
and exocytosis [75,76]. The cellularmechanisms that govern the surface
diffusion and cycling of PIPs are still undetermined.
4.3. โทรศัพท์มือถือค้าควบคุมการค้ายังมีบทบาทสำคัญในพืชอาควอพอรินนิพจน์และการควบคุม PIP1s ได้อธิบายไว้ตั้งแต่นานเป็นไม่มีกิจกรรมการขนส่งน้ำอ่อนแอเมื่อแต่ละหรือแสดงในการแช่สารละลาย Xenopus นี้สามารถอธิบายความล้มเหลวในการรับส่งข้อมูลได้อย่างถูกต้องใน oocyte พลาสมาเมมเบรน [22], นี้เป็นความบกพร่องเอาชนะหลังจากนิพจน์ร่วมกับ PIP2 homologs หลักฐานโดยตรงสำหรับการโต้ตอบทางกายภาพระหว่าง PIP1s และ PIP2s ได้รับในการแช่สารละลายหรือต้นไม้ โดยความสัมพันธ์ copurification, coimmunopurification และ fluorescenceการสั่นพ้องพลังงาน (ไม่สบายใจ) วิธีการถ่ายโอน [22,23] ดังนั้นก่อตัวของ heterotetramers PIP1 และ PIP2 ต่าง ๆชุดอาจจะสำคัญสำหรับแปลของ PIPs ที่เหมาะสมพื้นผิวของเซลล์พืชกระตุ้นทำให้เกิด subcellular ค้าของโรงงาน aquaporins ได้ลักษณะในโรงงานน้ำแข็ง McTIP1 แรก 2 อาควอพอรินนี้พบถูก redistributed จาก tonoplast เพื่ออสุจิ intracellular ระหว่างการออสโมติกความเครียด โดยกลไกขึ้นอยู่กับ glycosylation [67] ควบคุมยังถูกเสนอค้า PIPs และเคล็ดลับในการเล่นที่มีความสำคัญบทบาทระหว่างรากตอบสนองต่อความเครียดเกลือ และ oxidative [24,25]ต่อไปนี้รักษาราก Arabidopsis กับ 100 มม. NaCl สำหรับ 4 hหรือกับ 2 มม. H2O2 สำหรับ 15 นาที Lpr ถูกห้าม โดย N70% และrelocalization intracellular ของพลาสมาสูงแสดงหลายaquaporins เมมเบรนและ tonoplast ถูกสังเกต [39] เพิ่มเติมการศึกษาแสดงให้เห็นว่า relocalization เกิดจากเกลือของ PIPs mediatedโดยชนิดปฏิกิริยาออกซิเจน (ROS) -เรียกเซลล์ตามปกติน้ำตก ในนอกจากนี้ บทบาทของ AtPIP2; phosphorylation ที่ Ser283 1 ในผู้กำกับมีโปรตีนให้ช่องเฉพาะ endosomal (prevacuolar)สาธิต [20,73] แนวทางกล้องจุลทรรศน์ fluorescence ขั้นสูงล่าสุดได้นำลึกเจาะลึกผลกระทบของเกลือในการเมมเบรน dynamics ของ PIPs ในรากเซลล์ epidermal ระบุคลื่น evanescent แปรมุม microscopy ที่อัตราการแพร่เป็นPIP2; 1-GFP ฟิวชั่นที่ผิวเซลล์เพิ่มขึ้นโดยการ 2-fold ด้วยเกลือความเครียด ในขณะที่ก fluorescence ความสัมพันธ์เปิดเผยที่PIP2 ความหนาแน่น 1 GFP ในเยื่อพลาสมาถูกลด 46%[74] . Moreover นวนิยาย Fluorescence หลังจากกู้คืน Photobleachingวิธีการ (FRAP) ระบุว่า ความเครียดเกลือช่วยปีบขี่จักรยานระหว่างเซลล์ผิวและ endosomes โดยดำเนินการในทั้งสอง endocytosisและ exocytosis [75,76] Cellularmechanisms ที่ครอบคลุมพื้นผิวแพร่และขี่จักรยานของ PIPs จะยังคงถูกระบุ
การแปล กรุณารอสักครู่..

4.3 การค้ามือถือการค้าการควบคุมนอกจากนี้ยังมีบทบาทสำคัญในโรงงาน aquaporin การแสดงออกและการควบคุม PIP1s ได้รับการอธิบายตั้งแต่ตราบใดที่มีหรือไม่มีกิจกรรมการขนส่งทางน้ำที่อ่อนแอเมื่อเป็นรายบุคคลที่แสดงออกในเซลล์ไข่Xenopus นี้สามารถอธิบายได้ด้วยความล้มเหลวในการจราจรที่ถูกต้องไปยังเยื่อหุ้มเซลล์ [22], ข้อบกพร่องนี้ถูกเอาชนะหลังจากร่วมแสดงออกกับโฮโมลอกPIP2 หลักฐานโดยตรงสำหรับปฏิสัมพันธ์ทางกายภาพระหว่าง PIP1s และ PIP2s ที่ได้รับในการพัฒนาของไข่หรือพืชโดยความสัมพันธ์copurification, coimmunopurification เรืองแสงและเสียงสะท้อนการถ่ายโอนพลังงาน(ฉลุ) วิธีการ [22,23] ดังนั้นการก่อตัวของ heterotetramers ประกอบ PIP1 ต่างๆและ PIP2 รวมกันอาจจะเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการแปลที่เหมาะสมของ PIPs ที่พื้นผิวของเซลล์พืช. กระตุ้นการค้าที่เกิดขึ้นในเซลล์ของ aquaporins โรงงานลักษณะแรกในโรงงานน้ำแข็งMcTIP1 2 aquaporin นี้ถูกพบว่าได้รับการจัดสรรจากการtonoplast ถุงภายในเซลล์ในระหว่างการออสโมติกความเครียดโดยกลไกglycosylation ขึ้นอยู่กับ [67] การควบคุมการค้า PIPs และเคล็ดลับการได้รับการเสนอการเล่นที่สำคัญบทบาทในช่วงการตอบสนองรากเกลือและความเครียดoxidative [24,25]. ต่อไปนี้การรักษาราก Arabidopsis 100 มิลลิโซเดียมคลอไรด์เป็นเวลา 4 ชั่วโมงหรือ2 มิลลิ H2O2 15 นาที Lpr ถูกยับยั้งโดย N70% และrelocalization เซลล์หลายพลาสม่าแสดงความสูงเยื่อและtonoplast aquaporins พบว่า [39] นอกจากนี้การศึกษาแสดงให้เห็นว่า relocalization เกลือที่เกิดขึ้นของลูกเต๋าเป็นผู้ไกล่เกลี่ยโดยออกซิเจน(ROS) เซลล์ -activated น้ำตกส่งสัญญาณ ในนอกจากนี้บทบาทของ AtPIP2 ที่ 1 phosphorylation ที่ Ser283 ในการกำกับโปรตีนเพื่อendosomal เฉพาะ (prevacuolar) ช่องได้รับการแสดงให้เห็นถึง[20,73] วิธีเรืองแสงขั้นสูงกล้องจุลทรรศน์ได้นำเมื่อเร็ว ๆ นี้ข้อมูลเชิงลึกที่ลึกลงไปในผลกระทบของเกลือที่การเปลี่ยนแปลงของเยื่อPIPs ในรากเซลล์ผิวหนัง มุมตัวแปรกล้องจุลทรรศน์คลื่นหายชี้ให้เห็นว่าอัตราการแพร่กระจายของPIP2; ฟิวชั่น 1 GFP ที่เซลล์ผิวเพิ่มขึ้น 2 เท่าจากเกลือความเครียดในขณะที่สเปคโทรสัมพันธ์เรืองแสงเปิดเผยว่าPIP2 ความหนาแน่น 1 GFP ในเยื่อหุ้มเป็น ลดลง 46% [74] นอกจากนี้นวนิยายเรืองแสงการกู้คืนหลังจาก Photobleaching (FRAP) วิธีการที่ระบุความเครียดเกลือที่ช่วยเพิ่มการขี่จักรยาน PIP ระหว่างเซลล์ผิวและ endosomes โดยทำหน้าที่ทั้ง endocytosis และ exocytosis [75,76] cellularmechanisms ที่ควบคุมพื้นผิวการแพร่กระจายและการขี่จักรยานของPIPs ยังคงบึกบึน
การแปล กรุณารอสักครู่..
