2.6. Preparation of Leukocytes and

2.6. Preparation of Leukocytes and Plasma. To study the
effect of L. plantarum C014 supplemented fish diet on innate
immunity of hybrid catfish, groups of 20 uninfected fish
were fed the diets with and without L. plantarum C014 separately.
Each feeding was performed in three replicates. Blood
samples (4 fish at a time in each group) from caudal vein
were collected at 0, 15, 30, 45, and 60 days after feeding and
kept separately in heparin coated plastic tubes (BD, Franklin
Lakes, NJ, USA). Individual fish was sampled only once to
avoid the influence on the assays due to multiple bleedingand handling stress on the fish. Leukocytes and plasma were
prepared from each blood sample by using EZ Lympho-Sep-
Lymphocyte SeparationTubes (Biological Industries,Kibbutz
Beit-Haemek, Israel). Plasma was stored at −20∘C until used
for analysis. Separated leukocytes were washed twice in
Hanks Balanced Salt Solution (HBSS) (Sigma-Aldrich, St.
Louis, MO, USA) and resuspended in the same solution
to obtain the concentration of 107 cells/mL. The obtained
leukocytes and plasma were used for the determination of
phagocytic activity and lysozyme activity, respectively. Both
activities are parameters of innate immunity.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6 การเตรียมสอบของ Leukocytes และพลาสม่า การเรียนการผลของ L. plantarum C014 เสริมอาหารปลาในข้อสอบภูมิคุ้มกันของปลาดุกผสม กลุ่มเชื้อปลา 20ได้รับอาหารที่มี และไม่ มี L. plantarum C014 แยกต่างหากอาหารแต่ละที่ดำเนินการในสามเหมือนกับ เลือดตัวอย่างที่ 4 ปลาในแต่ละกลุ่ม) จากหลอดเลือดดำ caudalถูกรวบรวมไว้ที่ 0, 15, 30, 45 และ 60 วันหลังจากให้อาหาร และแยกเก็บในหลอดพลาสติกเคลือบเฮพาริน (BD แฟรงคลินทะเลสาบ NJ สหรัฐอเมริกา) ปลาแต่ละตัวเป็นตัวอย่างเพียงครั้งเดียวเพื่อหลีกเลี่ยงอิทธิพลใน assays เนื่องจากการจัดการความเครียดในปลา bleedingand หลาย Leukocytes และพลาสม่าเตรียมจากแต่ละตัวอย่างเลือดโดย EZ Lympho-Sep -SeparationTubes lymphocyte (อุตสาหกรรมชีวภาพ คิบบุทซ์Beit-Haemek อิสราเอล) พลาสม่าถูกเก็บไว้ที่ −20∘C จนกว่าจะใช้สำหรับการวิเคราะห์ แยก leukocytes ถูกล้างสองครั้งในแฮงส์สมดุลเกลือโซลูชัน (HBSS) (Aldrich ซิก เซนต์Louis, MO สหรัฐอเมริกา) และ resuspended ในโซลูชันเดียวกันเพื่อให้ได้ความเข้มข้นของ 107 เซลล์/มล. ที่ได้รับใช้สำหรับกำหนดของ leukocytes และพลาสม่ากิจกรรม phagocytic และกิจกรรม lysozyme ตามลำดับ ทั้งสองอย่างกิจกรรมมีพารามิเตอร์ของภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 เตรียมความพร้อมของเม็ดเลือดขาวและพลาสม่า เพื่อศึกษาผลกระทบของ L. plantarum C014 เสริมอาหารปลาในธรรมชาติภูมิคุ้มกันของปลาดุกลูกผสมกลุ่มของปลาที่ไม่ติดเชื้อ20 ได้รับการเลี้ยงดูอาหารที่มีและไม่มีแอล plantarum C014 แยกต่างหาก. แต่ละคนให้อาหารได้รับการดำเนินการในสามซ้ำ เลือดตัวอย่าง (4 ปลาในช่วงเวลาในแต่ละกลุ่ม) จากหลอดเลือดดำหางถูกเก็บที่0, 15, 30, 45, และ 60 วันหลังจากที่ให้อาหารและเก็บไว้แยกต่างหากในเฮเคลือบหลอดพลาสติก(BD, แฟรงคลินทะเลสาบ, NJ, สหรัฐอเมริกา) ปลาส่วนบุคคลเป็นตัวอย่างเพียงครั้งเดียวเพื่อหลีกเลี่ยงอิทธิพลต่อการตรวจเนื่องจากหลาย bleedingand จัดการความเครียดในปลา เม็ดเลือดขาวและพลาสม่าที่ถูกจัดทำขึ้นจากแต่ละตัวอย่างเลือดโดยใช้ EZ-lympho ก.ย. เม็ดเลือดขาว SeparationTubes (ชีวภาพอุตสาหกรรมอิสราเอลเลน-Haemek, อิสราเอล) พลาสม่าถูกเก็บไว้ที่-20∘Cจนนำมาใช้ในการวิเคราะห์ เม็ดเลือดขาวแยกกันถูกล้างครั้งที่สองในแฮงค์สโซลูชั่นสมดุลเกลือ (HBSS) (Sigma-Aldrich เซนต์หลุยส์, MO, USA) และ resuspended ในการแก้ปัญหาเดียวกันเพื่อให้ได้ความเข้มข้นของ107 เซลล์ / มิลลิลิตร ที่ได้รับเม็ดเลือดขาวและพลาสม่าถูกนำมาใช้ในการกำหนดกิจกรรมphagocytic และกิจกรรมไลโซไซม์ตามลำดับ ทั้งสองกิจกรรมพารามิเตอร์ของภูมิคุ้มกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 การเตรียมการของเม็ดเลือดขาว และพลาสมา เพื่อศึกษาผลของ L . plantarum c014 เสริมปลาอาหารต่อภูมิคุ้มกันโดยกำเนิด
ของปลาดุกลูกผสมกลุ่ม 20 มาก่อน ปลา
ได้รับอาหารที่มีและไม่มี L . plantarum c014 ต่างหาก
3 ซ้ำให้อาหารแต่ละแสดงใน . ตัวอย่างเลือด
( 4 ปลาที่เวลาในแต่ละกลุ่ม ) จากหลอดเลือดดำ
ถูกเก็บที่ระดับ 0 , 15 , 30 , 45 ,และ 60 วัน หลังการให้อาหาร และเก็บไว้แยกต่างหากในหลอดพลาสติก
เฮปารินเคลือบ ( BD , แฟรงคลิน
ทะเลสาบ , NJ , USA ) ปลาแต่ละอย่างเพียงครั้งเดียว

หลีกเลี่ยงอิทธิพลหรือเนื่องจาก bleedingand หลายการจัดการความเครียดในปลา เม็ดเลือดขาว และพลาสมา
เตรียมจากแต่ละตัวอย่างเลือดโดยใช้ EZ ลิมก.ย. -
lymphocyte separationtubes ( ชีวภาพอุตสาหกรรม นิคม
haemek เบต ,อิสราเอล ) พลาสมาอุณหภูมิ 20 C −∘จนใช้
สำหรับการวิเคราะห์ แยกเม็ดเลือดขาวถูกล้างสองครั้ง
แฮงค์สมดุลสารละลายเกลือ ( hbss ) ( ซิกม่า Aldrich เซนต์
หลุยส์ โม , USA ) และ resuspended ใน
วิธีเดียวกันให้มีความเข้มข้นของ 107 เซลล์ / มล. ตามลำดับ
เม็ดเลือดขาวและพลาสมาที่ใช้ในการหา
กิจกรรม กิจกรรม และไลโซไซม์สิ่งแปลกปลอมตามลำดับ ทั้ง
กิจกรรมที่เป็นพารามิเตอร์ของภูมิคุ้มกันโดยกำเนิด