The antimicrobial effects of the RC and SCP extracts were tested against some food borne pathogens. E. coli (ATCC 25922), S. aureus(ATCC 25923), L. monocytogenes (ATCC 19115), Salmonella Typhimurium(ATCC 14028) and B. cereus (ATCC 10876) were used as test
microorganisms. Two different inoculum doses were applied: low(~3 log CFU/mL) and high (~6 log CFU/mL) to detect the responses of the RC and SCP extracts for different contamination levels. Each of the test cultures were grown at 37 C for 18e24 h in Brain Heart Infusion Broth (BHI, pH 7.4 ± 0.2, LabM-LAB049), and then diluted with 0.1% sterile peptone water (PW, pH 6.3 ± 0.2, Oxoid-L37) to achieve a final inoculum of 6.0 log CFU/mL (high inoculum dose)and 3.0 log CFU/mL (low inoculum dose), appropriately. The MIC value of the each extract was determined by modification of the method described by LaBombardi, Sotos, Allen, and Sullivan (2008).200 mL of extract was placed into the first well of a 96-well microtiter panel. 100 mL BHI Broth was placed into each of the wells from 2nd to 12th in the row. 100 mL of the extract in the first well
was taken and placed into the 2nd well and mixed with BHI Broth.100 mL was taken from this mix in the 2nd well and placed into the 3rd well. Serial dilutions were made from the 2nd well to the 11th well by this method described shortly. 100 mL of the mixture was taken from the 11th well and was discarded. The 12th well which contains no extract was used as a positive control to detect the microbial growth. The final concentrations of extracts in the wells were; 1:1 (100%), 1:2 (50%), 1:4 (25%), 1:8 (12.50%), 1:16 (6.25%),1:32 (3.13%), 1:64 (1.56%), 1:128 (0.78%), 1:256 (0.39%), 1:512(0.20%), 1:1024 (0.10%), and the control (0%). After dilution, 100 mL of test culture was inoculated into each well from 1st to 12th. This procedure was repeated for each extract, each test microorganism and each inoculum dose, separately. The MIC plates were incubated
at 37 C for 24e48 h and the survival of the test microorganismwas checked by plating on Brain Heart Infusion Agar (BHI, pH 7.4 ± 0.2,LabM-LAB048). The petri dishes were incubated at 37 C for 18e24 h then the resultswere recorded. Although, the microflora of
the extracts were controlled to detect the presence of competitive microorganisms, the initial microflora of the extracts were analyzed by surface plating on BHI Agar for each treatment as a negative control. Three replicate trials with 2 parallels were carried out for each experiment.
ผลต้านจุลชีพของสารสกัดจาก RC และ SCP ได้ทดสอบกับเชื้อโรคที่ติดต่อจากอาหาร ใช้ e. coli (ATCC 25922), S. aureus(ATCC 25923), L. monocytogenes (ATCC 19115), Salmonella Typhimurium(ATCC 14028) และ B. cereus (ATCC 10876) เป็นการทดสอบจุลินทรีย์ ใช้ปริมาณ inoculum ที่แตกต่างกันสอง: ต่ำ (~ 3 ล็อก อาหรับ/mL) และสูง (~ 6 บันทึก อาหรับ/mL) เพื่อตรวจหาการตอบสนองของสารสกัด RC และ SCP สำหรับระดับการปนเปื้อนต่าง ๆ ทดสอบแล้ว เจือจาง ด้วยน้ำ peptone เป็นหมัน 0.1% (PW ค่า pH 6.3 ± 0.2, Oxoid L37) ให้ inoculum สุด 6.0 ได้เติบโตที่ 37 C สำหรับ 18e24 h ในสมองหัวใจคอนกรีตซุป (BHI ค่า pH 7.4 ± 0.2, LabM-LAB049), และวัฒนธรรมแต่ละล็อกล็อก 3.0 อาหรับ/mL (ยาต่ำ inoculum), และ อาหรับ/mL (ยาสูง inoculum) อย่างเหมาะสม กำหนดค่า MIC ของสารสกัดแต่ละ โดยการปรับเปลี่ยนวิธีการอธิบายไว้ โดย LaBombardi, Sotos อัลเลน และซัลลิแวน (2008) .200 mL สารสกัดวางลงในบ่อแรกของแผง microtiter 96 ดี 100 มิลลิลิตร BHI ซุปวางลงในหลุมจาก 2 ถึง 12 ในแถวแต่ละ 100 มิลลิลิตรของสารสกัดในบ่อแรกดำเนินการ และอยู่ในอันดับดี และผสมกับ Broth.100 BHI mL นำมาจากส่วนผสมนี้ใน 2 ดี และอยู่ใน 3 ดี Dilutions อนุกรมได้ทำจากดี 2 ดี 11 โดยวิธีนี้อธิบายไม่นานกับ ส่วนผสม 100 มิลลิลิตรถ่ายจาก 11 ที่ดี และถูกละทิ้ง 12 ดีซึ่งสารสกัดไม่ถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวกการตรวจสอบการเจริญเติบโตจุลินทรีย์ ความเข้มข้นสุดท้ายของสารสกัดในหลุมได้ 1:1 (100%), 1:2 (50%), 1:4 (25%), 1:8 (12.50%), 1:16 (6.25%), 1:32 (3.13%), 1:64 (1.56%), 1:128 (0.78%), 1:256 (0.39%) 1:512(0.20%), 1:1024 (0.10%), และการควบคุม (0%) หลังจากเจือจาง 100 mL ของทดสอบถูก inoculated ในแต่ละดีจาก 1 ถึง 12 ขั้นตอนนี้สำหรับแยกแต่ละ แต่ละการทดสอบจุลินทรีย์ และแต่ละ ปริมาณ inoculum แยกซ้ำอีกครั้ง แผ่น MIC ได้รับการกกที่ 37 C สำหรับ 24e48 h และการอยู่รอดของ microorganismwas ทดสอบที่ตรวจสอบ โดยชุบบนสมองหัวใจคอนกรีต Agar (BHI ค่า pH 7.4 ± 0.2, LabM-LAB048) จาน petri ได้รับการกกที่ 37 C 18e24 h แล้ว resultswere ที่บันทึก ถึงแม้ว่า จุลินทรีย์ของสารสกัดที่ควบคุมการตรวจหาจุลินทรีย์ที่แข่งขัน จุลินทรีย์เริ่มต้นของสารสกัดถูกวิเคราะห์ โดยผิวชุบใน BHI Agar สำหรับทรีตเมนท์เป็นตัวควบคุมค่าลบ สาม replicate ทดลอง ด้วยแนวที่ 2 ได้ดำเนินการสำหรับแต่ละการทดลอง
การแปล กรุณารอสักครู่..
