Four healthy nonpregnant, nonlactating, ovariectomized Holstein cows (age 6.2 to 8.2 yr; body weight 610 + 63 kg) were used in this study. A bilateral ovariectomy was performed in each cow by lateral laparotomy at least 3 mo prior to the experiment to exclude the effects of gonadal steroid hormones. The cows were housed separately and loose tied at least 1 week prior to the start of the experiment. The cows were fed 5 kg of grass hay and 0.5 kg of concentrate twice
daily and had free access to tap water. One intravenous catheter was inserted into each jugular vein 1 day prior to the ACTH infusion to alleviate the stress associated with the infusion and blood collection. An extension tube was connected to the catheter for blood collection and fixed to the halter.
The dose of ACTH was based on previous studies [7,8].
Synthetic ACTH (0.5 mg, Cortrosyn, Daiichi-Sankyo,
Tokyo, Japan) was dissolved in 2 L of isotonic NaCl
solution. The experiment was performed according to a
2 2 crossover design. In brief, cows were infused for
12 h with either ACTH solution at a rate of 41.67 g/h
or isotonic NaCl solution as a corresponding control,
and 1 wk later these processes were carried out again,
but with infusion of the solution that the animal had not
yet received. Blood samples were collected before the
start of infusion (0 h; baseline) and at 6, 12, 15, 18, 21,
24, 36, 48, 60, and 72 h after the start of infusion using
heparinized tubes (BD Vacutainer, Becton, Dickson
and Company, Plymouth, UK). The blood samples
were placed on ice immediately and centrifuged
(1,000g, 15 min) within 10 min. Separated plasma was
stored at 50°C until analysis. This study protocol was
approved by the Iwate University Laboratory Animal
Care and Use Committee.
All biochemical parameters were determined in duplicate.
Plasma cortisol concentrations were measured
by radioimmunoassay (cortisol RIA, TFB Ltd, Tokyo,
Japan; intra-assay coefficient of variance 3.6 0.4%;
interassay coefficient of variance 2.8 0.3%). Plasma
glucose (hexokinase method), Ca (ortho-cresolphthalein
complexone method), Pi (purine nucleoside phosphorylase,
xanthine dehydrogenase method), and magnesium
(Mg, isocitrate dehydrogenase method) were
measured using an Accute TBA-40FR AutoAnalyzer
(Toshiba, Tokyo, Japan) and commercial test kits.
Plasma activity oftartrate-resistant acid phosphatase
isoform 5b (TRAP5b) and plasma concentration of hydroxyproline
(HYP), the bone resorption markers, was
determined fluorometrically [9] and spectrophotometrically
[10], respectively. The activity of bone-specific
alkaline phosphatase (BALP), a bone formation marker,
was measured spectrophotometrically using a LabAssay
ALP kit (Wako Pure Chemical Industries Ltd,
Osaka, Japan) and the heat-inactivation method (56°C,
15 min) [11].
Numerical data are presented as the mean SD.
After Kolmogorov–Smirnov normality testing, parametric
data were analyzed by one-way repeated-measures
analysis of variance and the Holm–Sidak post hoc
test to compare the changes in each parameter for each
group. Nonnormally distributed data were analyzed by
one-way repeated-measures analysis of variance on
rank, followed by Dunn’s test. Student’s t-test or Mann–
Whitney U test was performed after the normality
test to compare groups at the same time point. Significance
was set at P 0.05. Analyses were performed
สี่เพื่อสุขภาพ nonpregnant, nonlactating, ovariectomized โฮลชไตน์วัว (อายุปี 6.2 8.2; 610 + 63 กก.น้ำหนักตัว) ใช้ในการศึกษานี้ Ovariectomy ทวิภาคีทำในวัวแต่ละ โดย laparotomy ข้างน้อย 3 เดือนก่อนการทดลองเพื่อแยกผลของฮอร์โมนเตียรอยด์ gonadal วัวถูกตั้งแยกต่างหาก และหลวมผูกอย่างน้อย 1 สัปดาห์ก่อนเริ่มการทดลอง วัวที่เลี้ยง 5 กก.หญ้าฟาง และข้น 0.5 กก.สองประจำวันและเข้าถึงประปา สายสวนทางหลอดเลือดดำที่หนึ่งถูกแทรกลงในหลอดเลือดดำ jugular ทุก 1 วันก่อนคอนกรีต ACTH เพื่อบรรเทาความเครียดที่เกี่ยวข้องกับคอนกรีตและเลือด มีท่อเชื่อมต่อกับสายสวนสำหรับเก็บเลือด และรับการฟั่นปริมาณของ ACTH ถูกใช้บน [7.8]สังเคราะห์ ACTH (0.5 มก. Cortrosyn ไดอิจิบริษัทซันเคียวคาโตเกียว ญี่ปุ่น) ละลายใน isotonic NaCl 2 Lการแก้ไขปัญหา ดำเนินการทดลองตาม2 การออกแบบครอสโอเวอร์ 2 สรุป วัวที่ผสมสำหรับ12 ชม. ด้วยโซลูชันใด ACTH ที่อัตรา 41.67 g/hหรือ isotonic NaCl โซลูชันเป็นตัวควบคุมที่สอดคล้องกันและ 1 สัปดาห์ภายหลังกระบวนการเหล่านี้ได้ดำเนินการอีกครั้งแต่ชงของสัตว์ไม่มียังได้ รับ มีการรวบรวมตัวอย่างเลือดก่อนการเริ่มต้น ที่ 6, 12, 15, 18, 21 และคอนกรีต (0 h พื้นฐาน)24, 36, 48, 60 และ 72 ชั่วโมงหลังจากเริ่มใช้คอนกรีตหลอด heparinized (BD Vacutainer, Becton ดิ๊กสันและ บริษัท พลีมัท UK) ตัวอย่างเลือดวางบนน้ำแข็งทันที และเหวี่ยง(1, 000 กรัม 15 นาที) ได้ภายใน 10 นาทีภาค พลาสม่าเก็บที่อุณหภูมิ 50° C จนถึงการวิเคราะห์ โพรโทคอลการศึกษานี้ได้อนุมัติ โดยอิวาเตะมหาวิทยาลัยห้องปฏิบัติการสัตว์การดูแลรักษา และใช้คณะกรรมการค่าพารามิเตอร์ทางชีวเคมีทั้งหมดถูกกำหนดในรายการซ้ำคอร์ติซอเข้มข้นวัดได้โดย radioimmunoassay (คอร์ติซอ RIA, Ltd กสิกร โตเกียวญี่ปุ่น intra-ทดสอบสัมประสิทธิ์ของความแปรปรวน 3.6 0.4%interassay ค่าสัมประสิทธิ์ของความแปรปรวน 2.8 0.3%) พลาสม่ากลูโคส (hexokinase วิธี), Ca (ortho cresolphthaleinวิธี complexone), Pi (purine nucleoside phosphorylaseวิธีของ dehydrogenase xanthine), และแมกนีเซียม(มก. วิธี dehydrogenase isocitrate) ได้วัด Accute TBA 40FR AutoAnalyzer(Toshiba โตเกียว ญี่ปุ่น) และชุดทดสอบในเชิงพาณิชย์พลาสม่ากิจกรรม oftartrate ทนกรดisoform 5b (TRAP5b) และความเข้มข้นของพลาสมาของ hydroxyproline(HYP), เครื่องหมายก็กระดูก ถูกกำหนด fluorometrically [9] และ spectrophotometrically[10], ตามลำดับ กิจกรรมของกระดูกเฉพาะอัลคาไลน์ฟอสฟาเตส (BALP), เครื่องหมายการก่อตัวของกระดูกมีวัด spectrophotometrically ใช้ LabAssay การชุด ALP (วาโกะงานเพียวเคมีอุตสาหกรรม จำกัดโอซาก้า ญี่ปุ่น) และวิธียกเลิกการเรียกความร้อน (56 ° Cนาทีที่ 15) [11]ข้อมูลตัวเลขจะแสดงเป็นหมายความว่าแอพเดียวหลังจากคัมภีร์พระไตรปิฎกว่าคอลโมโกรอฟ – Smirnov ทดสอบ พาราเมตริกdata were analyzed by one-way repeated-measuresanalysis of variance and the Holm–Sidak post hoctest to compare the changes in each parameter for eachgroup. Nonnormally distributed data were analyzed byone-way repeated-measures analysis of variance onrank, followed by Dunn’s test. Student’s t-test or Mann–Whitney U test was performed after the normalitytest to compare groups at the same time point. Significancewas set at P 0.05. Analyses were performed
การแปล กรุณารอสักครู่..
สี่ตั้งครรภ์มีสุขภาพดี nonlactating วัวโฮลตัดรังไข่ (อายุ 6.2-8.2 ปี; น้ำหนักตัว 610 + 63 กก.) ถูกนำมาใช้ในการศึกษานี้ ovariectomy ทวิภาคีได้รับการดำเนินการในวัวโดย laparotomy ด้านข้างแต่ละอย่างน้อย 3 เดือนก่อนที่จะมีการทดลองที่จะไม่รวมผลกระทบของเตียรอยด์ฮอร์โมนอวัยวะสืบพันธุ์ วัวถูกเก็บแยกต่างหากและผูกหลวมอย่างน้อย 1 สัปดาห์ก่อนที่จะเริ่มการทดลอง วัวได้รับการเลี้ยงดู 5 กกหญ้าฟางและ 0.5 กก. ของสมาธิเป็นครั้งที่สอง
ในชีวิตประจำวันและมีอิสระที่จะเข้าถึงน้ำประปา หนึ่งสายสวนทางหลอดเลือดดำถูกแทรกเข้าไปในแต่ละคอหลอดเลือดดำ 1 วันก่อนการแช่ ACTH เพื่อบรรเทาความเครียดที่เกี่ยวข้องกับยาและเลือดคอลเลกชัน หลอดขยายเชื่อมต่อกับสายสวนสำหรับคอลเลกชันของเลือดและการแก้ไขเพื่อแขวนคอ.
ปริมาณของ ACTH อยู่บนพื้นฐานของการศึกษาก่อนหน้า [7,8].
ACTH สังเคราะห์ (0.5 มิลลิกรัม Cortrosyn, Daiichi Sankyo-,
กรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น) ก็เลือนหายไป ใน 2 ลิตรของโซเดียมคลอไรด์ isotonic
วิธีการแก้ปัญหา การทดลองที่ได้ดำเนินการตามที่
2? การออกแบบ 2 ครอสโอเวอร์ ในช่วงสั้น ๆ วัวถูก infused สำหรับ
12 ชั่วโมงกับการแก้ปัญหา ACTH ทั้งในอัตรา 41.67 หรือไม่? g / H
หรือสารละลายโซเดียมคลอไรด์ isotonic เป็นตัวควบคุมที่สอดคล้องกัน
และอีก 1 สัปดาห์ต่อมากระบวนการเหล่านี้ได้ดำเนินการอีกครั้ง
แต่ด้วยการแช่ของการแก้ปัญหาว่า สัตว์ที่ไม่เคย
ได้รับ เก็บตัวอย่างเลือดก่อนที่จะมี
การเริ่มต้นของการฉีด (0 เอช; พื้นฐาน) และ 6, 12, 15, 18, 21,
24, 36, 48, 60, และ 72 ชั่วโมงหลังจากที่เริ่มต้นของการฉีดโดยใช้
หลอด heparinized (BD Vacutainer, Becton ดิกสัน
และ บริษัท พลีมั ธ , สหราชอาณาจักร) กลุ่มตัวอย่างเลือด
ถูกวางไว้บนน้ำแข็งทันทีและหมุนเหวี่ยง
(1,000g 15 นาที) ภายใน 10 นาที พลาสม่าแยกออกจากกันได้รับการ
เก็บรักษาไว้ที่ 50 องศาเซลเซียสจนการวิเคราะห์ โปรโตคอลศึกษาครั้งนี้ได้
รับการอนุมัติจากสัตว์ทดลองมหาวิทยาลัยอิวาตะ
. คณะกรรมการดูแลและการใช้
. ชีวเคมีทั้งหมดได้รับการพิจารณาในที่ซ้ำกัน
พลาสม่าความเข้มข้นของคอร์ติซอถูกวัด
โดย radioimmunoassay (cortisol RIA, TFB Ltd โตเกียว
ประเทศญี่ปุ่นค่าสัมประสิทธิ์ภายในการทดสอบความแปรปรวน 3.6? 0.4%;
? ค่าสัมประสิทธิ์กันมีความแปรปรวน 2.8 0.3%) พลาสม่า
กลูโคส (วิธี hexokinase), แคลิฟอร์เนีย (Ortho-cresolphthalein
วิธี complexone) Pi (purine nucleoside โฟ,
xanthine วิธี dehydrogenase) และแมกนีเซียม
(Mg วิธี isocitrate dehydrogenase) ได้รับการ
วัดโดยใช้ Accute TBA-40FR AutoAnalyzer
(โตชิบาโตเกียว ญี่ปุ่น) และชุดทดสอบเชิงพาณิชย์.
กิจกรรมพลาสม่า oftartrate ทนกรดฟอสฟา
5b ไอโซฟอร์ม (TRAP5b) และความเข้มข้นของพลาสม่าไฮดรอกซี่
(HYP) เครื่องหมายกระดูกสลายถูก
กำหนดฟลูออเร [9] และ spectrophotometrically
[10] ตามลำดับ กิจกรรมของกระดูกเฉพาะ
ด่าง phosphatase (BALP), เครื่องหมายการสร้างกระดูก
วัด spectrophotometrically ใช้ LabAssay
ชุด ALP (Wako เพียวเคมีอุตสาหกรรม จำกัด ,
โอซาก้าประเทศญี่ปุ่น) และวิธีความร้อนการใช้งาน (56 องศาเซลเซียส
15 นาที) [11].
ข้อมูลตัวเลขแสดงเป็นหมายความว่าอย่างไร SD.
หลังจากการทดสอบภาวะปกติ Kolmogorov-Smirnov, พารา
วิเคราะห์ข้อมูลโดยทางเดียวซ้ำมาตรการ
การวิเคราะห์ความแปรปรวนและเกาะ-Sidak โพสต์เฉพาะกิจ
ทดสอบเพื่อเปรียบเทียบการเปลี่ยนแปลงในแต่ละพารามิเตอร์สำหรับแต่ละ
กลุ่ม Nonnormally กระจายข้อมูลมาวิเคราะห์โดย
วิธีหนึ่งที่วิเคราะห์ซ้ำมาตรการความแปรปรวนใน
อันดับรองลงมาทดสอบดันน์ t-test ของนักเรียนหรือ Mann-
ทดสอบ Whitney U ได้รับการดำเนินการหลังจากภาวะปกติ
ทดสอบเพื่อเปรียบเทียบกลุ่มที่จุดในเวลาเดียวกัน อย่างมีนัยสำคัญ
เป็นที่ตั้ง P? 0.05 ได้ดำเนินการวิเคราะห์
การแปล กรุณารอสักครู่..
4 nonpregnant nonlactating รังไข่ , สุขภาพ , โคโฮลสไตน์ ( อายุ 6.2 8.2 ปี ; น้ำหนัก 610 + 63 กก. ) สถิติที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ มีกลุ่มทวิภาคีในการปฏิบัติแต่ละวัวโดยการเปิดหน้าท้อง อย่างน้อย 3 โมก่อนการทดลอง เพื่อแยกผลของสเตอรอยด์ฮอร์โมน วัวถูกแยกและหลวมผูกอย่างน้อย 1 สัปดาห์ก่อนเริ่มการทดลอง วัวกินหญ้าแห้ง 5 กิโลกรัม และ 0.5 กิโลกรัม มีสมาธิ สองครั้งทุกวัน และได้เข้าฟรี น้ำประปา หนึ่งถูกแทรกลงในแต่ละหลอดสวนหลอดเลือดดำหลอดเลือดดำคอ 1 วัน ก่อนที่จะฉีด ACTH เพื่อบรรเทาความเครียดที่เกี่ยวข้องกับการฉีดและเก็บเลือด ส่วนขยายท่อเชื่อมต่อกับสายสวนเพื่อเก็บเลือดและการแก้ไขเพื่อยั้ง .ปริมาณของ ACTH ขึ้นอยู่กับการศึกษาก่อนหน้านี้ [ 7 , 8 )เซลล์ไฟฟ้าเคมีสังเคราะห์ ( 0.5 mg cortrosyn DAIICHI SANKYO , , ,โตเกียว , ญี่ปุ่น ) ละลายใน 1 ลิตรของไอโซโทนิคโซเดียมคลอไรด์โซลูชั่น ทดสอบตามเป็น2 2 การออกแบบครอสโอเวอร์ ในช่วงสั้น ๆ , วัวถูกผสมสำหรับ12 ชั่วโมงกับเซลล์ไฟฟ้าเคมี โซลูชั่น ในอัตรา 60 กรัม / ชั่วโมงหรือไอโซโทนิค NaCl สารละลายเป็นตัวควบคุมที่สอดคล้องกัน1 สัปดาห์ต่อมา กระบวนการเหล่านี้ถูกหามออกไปอีกแต่ด้วยการให้โซลูชั่นที่สัตว์ไม่ได้ที่ได้รับยัง การเก็บตัวอย่างเลือดก่อนเริ่มฉีด ( 0 H ; พื้นฐาน ) ที่ 6 , 12 , 15 , 18 , 21 ,24 , 36 , 48 , 60 , 72 ชั่วโมงหลังจากเริ่มยาใช้กลุ่มท่อ ( BD vacutainer เบคตอน , ดิกสัน ,และ บริษัท พลีมัธ , สหราชอาณาจักร ) ตัวอย่างเลือดถูกวางไว้บนน้ำแข็งทันที และไฟฟ้า( 1000 , 15 นาที ) ภายใน 10 นาทีแยกพลาสมาที่อุณหภูมิ 50 องศา C จนถึงการวิเคราะห์ การศึกษานี้เป็นโปรโตคอลได้รับอนุมัติจากมหาวิทยาลัย ซึ่งสัตว์ทดลองคณะกรรมการดูแลและใช้พารามิเตอร์ทางชีวเคมีพบว่าในที่ซ้ำกันcortisol พลาสม่าโดยมีวัดโดย radioimmunoassay ( cortisol RIA , ธนาคารกสิกรไทยจำกัด โตเกียวญี่ปุ่น อัฟกานิสถานค่าสัมประสิทธิ์ของความแปรปรวน 3.6 0.4% ;สัมประสิทธิ์ของความแปรปรวน interassay 2.8 0.3% ) พลาสมากลูโคส ( วิธี hexokinase ) Ca ( cresolphthalein โธcomplexone วิธีการ ) , PI ( purine ฟอ ฟรีเลสวคลีโอไซด์ ,วิธี dehydrogenase ของ ) , และแมกนีเซียม( วิธีเนสไอโซซิเตรตแมกนีเซียม , ) คือการวัด accute tba-40fr autoanalyzer( Toshiba , โตเกียว , ญี่ปุ่น ) และชุดทดสอบเชิงพาณิชย์กิจกรรม oftartrate ทนพระครูพลาสมาไอโซฟอร์ม 5B ( trap5b ) และพลาสมาปริมาณไฮดรอกซิโพรลีน( Hyp ) , กระดูกสลายเป็นเครื่องหมายกำหนด fluorometrically [ 9 ] และนี้[ 10 ] ตามลำดับ กิจกรรมของกระดูกที่เฉพาะเจาะจงอัลคาไลน์ฟอสฟาเตส ( balp ) , กระดูกสร้างเครื่องหมายวัดนี้ใช้ labassayแอลป์ Kit ( Wako บริสุทธิ์เคมีอุตสาหกรรมจำกัดโอซาก้า , ญี่ปุ่น ) และความร้อนทำให้วิธี ( 56 ° C ,15 นาที ) [ 11 ]ข้อมูลตัวเลขจะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย sd .หลังจากการเปลี่ยนแปลงและเพื่อปกติการทดสอบพาราเมตริกวิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้สถิติวันเวย์วัดซ้ำการวิเคราะห์ความแปรปรวนและเกาะ– sidak Post Hocการทดสอบเพื่อเปรียบเทียบการเปลี่ยนแปลงในแต่ละพารามิเตอร์สำหรับแต่ละกลุ่ม แจก nonnormally วิเคราะห์ข้อมูลโดยวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียวชนิดวัดซ้ำในอันดับรองลงมาคือ ดันน์ กำลังทดสอบ ( 2 ) นักเรียนหรือWhitney U Test ได้ตามปกติการทดสอบเพื่อเปรียบเทียบกลุ่มที่จุดเวลาเดียวกัน อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติที่ระดับ . 05มีนัยสำคัญทางสถิติที่ P < 0.05 . วิเคราะห์ข้อมูลแสดง
การแปล กรุณารอสักครู่..